嗜水气单胞菌胁迫下东北林蛙MHCⅠ基因在不同组织的表达

发布时间：2022-10-29 11:19

　　本研究旨在探讨嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila,Ah）胁迫下MHCⅠ基因在东北林蛙不同组织的表达特征,为揭示两栖类抗感染免疫应答机制提供依据。文中首先构建嗜水气单胞菌感染下的试验动物模型,通过苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-eosin staining,HE染色）观察病理学变化;利用RT-PCR克隆东北林蛙MHCⅠ基因α1+α2肽结合区并进行生物信息学分析,再运用荧光定量PCR技术检测Ah胁迫下MHCⅠ在不同组织中的转录水平。结果表明:在Ah感染后,皮肤、肝脏和肌肉等组织均出现细胞结构消失和纹理紊乱等现象;获得MHCⅠ基因α1+α2肽结合区片段494bp,可编码164个氨基酸,与两栖类同源性在77%以上,与哺乳类同源性低至14.96%,表明MHCⅠ基因α1+α2区在不同物种间保守性较低;荧光定量PCR结果显示,在Ah胁迫下,实验组肝脏、脾脏、肾脏、皮肤和肌肉组织MHCⅠ基因的转录水平在72 h前均高于对照组,但是各组织到达峰值的时间具有差异性（P＜0.01）,表明Ah胁迫下MHCⅠ基因在不同组织的表达时间存在差异。研究结果为进一步探究MHC分子在抗感染中... 

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 试验动物和菌株
        1.1.2 主要试剂
        1.1.3 仪器设备
    1.2 方法
        1.2.1 东北林蛙的人工感染和样品采集
        1.2.2 引物设计
        1.2.3 东北林蛙MHCⅠ类α1+α2的克隆及生物信息学分析
        1.2.4 东北林蛙病理组织切片的制备
        1.2.5 东北林蛙MHCⅠ类基因的荧光定量PCR分析
2 结果与分析
    2.1 东北林蛙MHCⅠ基因α1+α2区的克隆与鉴定
    2.2 东北林蛙MHCⅠ基因α1+α2区序列的生物信息学分析
    2.3 嗜水气单胞菌胁迫下东北林蛙组织的病理鉴定
    2.4 东北林蛙MHCⅠ基因在不同组织中的转录水平
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]蛙类常见传染病介绍及病原学鉴定研究进展[J]. 杜嘉楠,吴晨薇,叶颖萱,文艺,李婧妍,李靖,翟博宇,朱晓艺,曾祥伟.  今日畜牧兽医. 2019(08)
[2]LPS和嗜水气单胞菌胁迫下东北林蛙不同组织内TBK1转录产物表达动态的研究[J]. 曲俐俐,柴龙会,王伯驹,许晴,肖向红.  野生动物学报. 2019(01)
[3]东北林蛙基因组DNA不同提取方法的比较[J]. 陶久臣,于淼,邢波建,李倩,刘鹏,赵文阁.  黑龙江畜牧兽医. 2018(17)
[4]环境温度对东北林蛙不同地理种群繁殖期体温和胚胎发育的影响[J]. 徐骁骁,赵文阁,刘鹏.  生态学报. 2018(08)
[5]刺激隐核虫感染诱导斜带石斑鱼MHCIα和β2m基因的表达谱分析[J]. 徐冬冬,徐舜,吴凤依,罗晓春.  南方农业学报. 2016(12)
[6]黄鳝主要组织相容性复合体Iα基因的克隆及多态性分析[J]. 李伟,江翱,吴辉.  湖南农业大学学报(自然科学版). 2015(04)
[7]嗜水气单胞菌胁迫下东北林蛙皮肤MyD88和TRAF6基因表达的动态变化[J]. 史雪灿,柴龙会,牛曙东,肖向红.  动物医学进展. 2015(06)
[8]尼罗罗非鱼MHC Ⅰα全长cDNA的克隆、多态性及组织表达特征[J]. 黎建平,高风英,卢迈新,曹建萌,朱华平,可小丽,刘志刚.  中国水产科学. 2014(06)
[9]中国林蛙的分类及分布[J]. 李丕鹏,陆宇燕,李昂.  蛇志. 2014(02)
[10]东北林蛙的两性异形和抱对个体的形态相关性[J]. 刘鹏,刘恒,张德成,赵文阁.  动物学杂志. 2013(02)

硕士论文
[1]东北林蛙MHC基因的多态性及其遗传进化[D]. 陶久臣.哈尔滨师范大学 2019
[2]峨眉树蛙和斑腿树蛙MHCⅠ类基因的多态性及其进化[D]. 王永珍.华中师范大学 2012



本文编号：3697593