拟态弧菌及其靶向DNA疫苗对草鱼肠道菌群和肠组织结构的影响
发布时间：2022-10-30 15:35
拟态弧菌（Vibrio mimicus）是一种常见的肠道病原菌,可引起养殖鱼类的严重腹水病,给水产养殖业带来较大经济损失,亟需开展该菌的致病机理和免疫防控研究。肠道菌群对宿主的营养吸收、生长发育、免疫抗病等方面发挥不可或缺的关键作用。在自然或人工因素作用下,宿主与肠道菌群的动态平衡一旦遭到破坏,宿主就会因肠道菌群结构紊乱而出现机体营养吸收代谢障碍、免疫功能降低等现象,引发各种疾病。同样,口服疫苗接种后也必将引起其肠道菌群结构的变化。目前,肠道菌群及其相关研究成为了科研关注的热点,也为探索病原的致病机理和防治方法提供了新思路。前期研究中我们从患病草鱼体内分离到一株毒力较强的拟态弧菌,构建了其DNA疫苗,并发现该疫苗可诱导鱼体产生良好的肠黏膜免疫应答。在此基础上,本论文研究了拟态弧菌感染以及拟态弧菌靶向DNA疫苗对草鱼肠道菌群和肠组织结构的影响。完成的主要研究工作和成果总结如下:1)拟态弧菌靶向DNA疫苗构建及其肠道原位表达检测。论文采用膜囊法以大肠杆菌DH5α冻干菌蜕装载拟态弧菌DNA疫苗,经荧光定量PCR检测发现1 mg菌蜕装载了214μg疫苗质粒,表明拟态弧菌靶向DNA疫苗构建成功。...
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
本论文常用中英文缩写词
文献综述
引言
1 材料与方法
1.1 菌株
1.2 主要试剂(盒)
1.3 主要溶液和培养基的配制
1.4 主要仪器
1.5 实验动物
1.6 拟态弧菌DNA疫苗的制备
1.7 拟态弧菌及其靶DNA疫苗对草鱼肠道菌群的影响
1.8 拟态弧菌及其DNA疫苗对草鱼肠组织结构的影响
2 结果与分析
2.1 DH5α冻干菌蜕对拟态弧菌DNA疫苗的装载量
2.2 拟态弧菌DNA疫苗在不同肠段中的原位表达情况
2.3 肠道内容物总DNA的提取质量
2.4 高通量测序序列分析
2.5 免疫与感染后草鱼肠道菌群的OTU聚类分析
2.6 免疫与感染后草鱼肠道菌群Alpha多样性分析
2.7 免疫与感染后草鱼肠道菌群群落结构分析
2.8 免疫与感染前后草鱼肠组织结构的变化
讨论
结论
参考文献
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]口服幽门螺杆菌疫苗候选株对小鼠肠道菌群的影响[J]. 陶好霞,张铮,袁盛凌,王艳春,关清,王雪涵,刘纯杰. 生物技术通讯. 2018(01)
[2]拟态弧菌感染黄颡鱼的动态病理损伤及病原分布研究[J]. 陈成,耿毅,汪开毓,余泽辉,陈德芳,欧阳萍,黄小丽,李亚军,唐俊辉. 南方水产科学. 2017(01)
[3]育肥饲料中虾青素含量对雄性中华绒螯蟹肠道和鳃部可培养优势细菌数量和组成的影响[J]. 马文元,吴旭干,张小明,赵庆,刘灿,龙晓文,成永旭,张庆华. 水产学报. 2016(09)
[4]肠道菌群的检测方法及研究进展[J]. 刘玉婷,郝微微,温红珠,邵兰君. 世界华人消化杂志. 2016(20)
[5]高通量测序技术在肠道菌群研究中的应用[J]. 陈蕾,周小理,周一鸣,李宗杰. 食品工业. 2016(03)
[6]16SrRNA基因序列分析技术在肠道菌群检测中的应用进展[J]. 徐爱蕾,黄毅,王为. 临床消化病杂志. 2015(03)
[7]四种小鼠肠道微生物DNA提取方法比较[J]. 吴敏娜,武亚琦,屈艳,魏纪东,钟根深. 生态学杂志. 2015(04)
[8]草鱼与团头鲂肠道菌群结构比较分析[J]. 王纯,倪加加,颜庆云,李金金,李星浩,余育和. 水生生物学报. 2014(05)
[9]肠道菌群对免疫系统的影响及其群落分析方法[J]. 陈丹丹,顾胜华,张金娜,宝福凯,汤岳琴,吴晓磊. 应用与环境生物学报. 2013(03)
[10]4种常见淡水鱼肠道菌群的分析[J]. 周玉法,李代军,刘东燕,刘敬博,姚淑红,蔡玉梅. 中国畜牧兽医. 2012(08)
博士论文
[1]鲤鱼早期发育阶段肠道菌群的分析及其免疫相关性研究[D]. 王蕾.山东师范大学 2017
[2]嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道炎症机制研究[D]. 宋学宏.苏州大学 2015
[3]两种重要鱼类致病菌感染及减毒活疫苗接种途径的研究[D]. 刘晓红.华东理工大学 2015
硕士论文
[1]胆汁酸对草鱼生长、脂质代谢及肠道微生物区系的影响[D]. 陈昊杰.西北农林科技大学 2016
[2]感染嗜水气单胞菌草鱼肠道菌群结构研究[D]. 李东亮.西北农林科技大学 2016
[3]鮰爱德华氏菌感染黄颡鱼的病理形态学及病原分布研究[D]. 廖雨婷.四川农业大学 2012
[4]斑马鱼肠道微细结构及肠粘膜屏障的研究[D]. 姚一琳.南京农业大学 2010
[5]泰山螭霖鱼肠道组织学和免疫组织化学的研究[D]. 张金花.山东农业大学 2002
本文编号：3699155
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
本论文常用中英文缩写词
文献综述
引言
1 材料与方法
1.1 菌株
1.2 主要试剂(盒)
1.3 主要溶液和培养基的配制
1.4 主要仪器
1.5 实验动物
1.6 拟态弧菌DNA疫苗的制备
1.7 拟态弧菌及其靶DNA疫苗对草鱼肠道菌群的影响
1.8 拟态弧菌及其DNA疫苗对草鱼肠组织结构的影响
2 结果与分析
2.1 DH5α冻干菌蜕对拟态弧菌DNA疫苗的装载量
2.2 拟态弧菌DNA疫苗在不同肠段中的原位表达情况
2.3 肠道内容物总DNA的提取质量
2.4 高通量测序序列分析
2.5 免疫与感染后草鱼肠道菌群的OTU聚类分析
2.6 免疫与感染后草鱼肠道菌群Alpha多样性分析
2.7 免疫与感染后草鱼肠道菌群群落结构分析
2.8 免疫与感染前后草鱼肠组织结构的变化
讨论
结论
参考文献
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]口服幽门螺杆菌疫苗候选株对小鼠肠道菌群的影响[J]. 陶好霞,张铮,袁盛凌,王艳春,关清,王雪涵,刘纯杰. 生物技术通讯. 2018(01)
[2]拟态弧菌感染黄颡鱼的动态病理损伤及病原分布研究[J]. 陈成,耿毅,汪开毓,余泽辉,陈德芳,欧阳萍,黄小丽,李亚军,唐俊辉. 南方水产科学. 2017(01)
[3]育肥饲料中虾青素含量对雄性中华绒螯蟹肠道和鳃部可培养优势细菌数量和组成的影响[J]. 马文元,吴旭干,张小明,赵庆,刘灿,龙晓文,成永旭,张庆华. 水产学报. 2016(09)
[4]肠道菌群的检测方法及研究进展[J]. 刘玉婷,郝微微,温红珠,邵兰君. 世界华人消化杂志. 2016(20)
[5]高通量测序技术在肠道菌群研究中的应用[J]. 陈蕾,周小理,周一鸣,李宗杰. 食品工业. 2016(03)
[6]16SrRNA基因序列分析技术在肠道菌群检测中的应用进展[J]. 徐爱蕾,黄毅,王为. 临床消化病杂志. 2015(03)
[7]四种小鼠肠道微生物DNA提取方法比较[J]. 吴敏娜,武亚琦,屈艳,魏纪东,钟根深. 生态学杂志. 2015(04)
[8]草鱼与团头鲂肠道菌群结构比较分析[J]. 王纯,倪加加,颜庆云,李金金,李星浩,余育和. 水生生物学报. 2014(05)
[9]肠道菌群对免疫系统的影响及其群落分析方法[J]. 陈丹丹,顾胜华,张金娜,宝福凯,汤岳琴,吴晓磊. 应用与环境生物学报. 2013(03)
[10]4种常见淡水鱼肠道菌群的分析[J]. 周玉法,李代军,刘东燕,刘敬博,姚淑红,蔡玉梅. 中国畜牧兽医. 2012(08)
博士论文
[1]鲤鱼早期发育阶段肠道菌群的分析及其免疫相关性研究[D]. 王蕾.山东师范大学 2017
[2]嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道炎症机制研究[D]. 宋学宏.苏州大学 2015
[3]两种重要鱼类致病菌感染及减毒活疫苗接种途径的研究[D]. 刘晓红.华东理工大学 2015
硕士论文
[1]胆汁酸对草鱼生长、脂质代谢及肠道微生物区系的影响[D]. 陈昊杰.西北农林科技大学 2016
[2]感染嗜水气单胞菌草鱼肠道菌群结构研究[D]. 李东亮.西北农林科技大学 2016
[3]鮰爱德华氏菌感染黄颡鱼的病理形态学及病原分布研究[D]. 廖雨婷.四川农业大学 2012
[4]斑马鱼肠道微细结构及肠粘膜屏障的研究[D]. 姚一琳.南京农业大学 2010
[5]泰山螭霖鱼肠道组织学和免疫组织化学的研究[D]. 张金花.山东农业大学 2002
本文编号：3699155
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