厚壳贻贝足丝超氧化物歧化酶的重组表达及功能

发布时间：2022-11-03 20:25

　　为探明厚壳贻贝足丝中一种新型超氧化物歧化酶（Byssal superoxide dismutase,BSOD）类蛋白的结构与功能,对厚壳贻贝BSOD开展了序列分析并采用密码子优化结合大肠杆菌重组表达系统,开展BSOD重组表达以及表达产物的分离纯化和功能鉴定。序列分析结果表明,厚壳贻贝BSOD序列中含信号肽和典型的SOD结构域,属于分泌型SOD分子;其一级结构与数据库中已报道的其他物种SOD具有一定的相似性,但进化树分析结果表明厚壳贻贝BSOD是一种较为新颖的SOD分子,与水生甲壳类生物的胞外SOD同源。重组表达结果表明,重组BSOD主要通过包涵体形式表达。经复性后,重组厚壳贻贝BSOD具有明显的歧化酶酶活性;该活性在重组BSOD鳌合铜离子和锌离子后明显增强;且鳌合了铜离子和锌离子后重组BSOD对DPPH具有较强的清除率,表明BSOD是一种需要金属离子辅助的抗氧化蛋白。推测BSOD在足丝黏附过程中参与了其他富含多吧的足丝蛋白的保护以及还原态维持,并对贻贝足丝在固化和黏附前维持还原态具有重要意义。 

【文章页数】：13 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 厚壳贻贝BSOD的序列分析
    1.2 目标基因的密码子优化、设计与表达载体的构建
    1.3 重组足丝BSOD蛋白的表达、复性及分离纯化
    1.4 SDS-PAGE和Western分析
    1.5 重组足丝BSOD的质谱鉴定
    1.6 重组BSOD的功能测试
2 结果与分析
    2.1 厚壳贻贝SOD序列分析结果
    2.2 BSOD基因的设计和密码子优化
    2.3 重组BSOD的表达、纯化与鉴定
    2.4 重组BSOD的功能分析
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]利用质谱技术结合EST库搜索鉴定厚壳贻贝新型足丝蛋白（英文）[J]. 孙敬敬,李楠楠,王信超,廖智.  中国生物化学与分子生物学报. 2014(01)



本文编号：3700569