牙鲆（Paralichthys olivaceus）dazl基因的克
发布时间：2022-12-25 12:05
近年来,关于生殖细胞的研究被全世界学者广泛关注,除在哺乳动物中有广泛深入的研究以外,在鱼类等低等脊椎动物中也逐渐开展起来,并取得很多进展。DAZL （deleted in azoospermia-like）是DAZ家族的成员之一,同时也是一种重要的RNA结合蛋白。现有研究发现,从无脊椎动物到脊椎动物,dazl特异地表达于雌性和雄性生殖细胞,可能在生殖细胞发育过程发挥重要作用。不少研究也从一些硬骨鱼中鉴定了dazl基因,并对其表达规律作出了详细的探讨。本研究克隆和鉴定了牙鲆（Paralichthys olivaceus） dazl基因,首次在硬骨鱼中发现了其mRNA的可变剪接形式,将这两种牙鲆dazl mRNA称为Podazl-Ⅰ和Podazl-Ⅱ,探究了它们在mRNA水平和蛋白水平的表达规律,并找到了牙鲆DAZL的靶mRNA,预测其功能。首先,通过基因克隆等方法,得到了牙鲆dazl基因,全长5413 bp,包括9个外显子和9个内含子,其中外显子1仅有ATG三个碱基,内含子9位于3’非翻译区,这些特征与许多dazl同源基因是相似的。一对dazl等位基因在内含子6的序列上有差异。由于外显子...
【文章页数】：124 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1.1 引言
1.2 鱼类生殖细胞发育
1.2.1 鱼类的性别决定及相关因子
1.2.2 鱼类生殖细胞发育及相关因子
1.2.3 鱼类生殖细胞特异表达基因
1.3 RNA结合蛋白
1.3.1 RNA结合蛋白的结构特征
1.3.2 RNA结合蛋白的功能
1.4 DAZ家族研究进展
1.4.1 DAZ家族的结构特征
1.4.2 DAZ家族成员的进化关系
1.4.3 DAZ家族的相关研究
1.4.4 DAZ家族与人类疾病
1.5 硬骨鱼dazl表达与功能研究
1.6 本研究的主要内容和意义
1.6.1 本研究的主要内容
1.6.2 本研究的创新性和意义
第二章 牙鲆dazl基因及其可变剪接mRNA的鉴定
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 实验材料
2.2.2 实验方法
2.3 结果
2.3.1 牙鲆dazl cDNA序列
2.3.2 牙鲆dazl DNA序列
2.3.3 牙鲆dazl两种可变剪接mRNA的鉴定
2.3.4 牙鲆dazl基因上游调控序列的预测
2.4 讨论
2.4.1 关于实验方法
2.4.2 关于牙鲆dazl UTR的可变剪接
2.4.3 关于牙鲆dazl可变剪接的意义
2.4.4 本章小结
第三章 牙鲆DAZL的表达规律
3.1 引言
3.2 材料与方法
3.2.1 实验材料
3.2.2 实验方法
3.3 结果
3.3.1 牙鲆dazl mRNA在各组织的相对表达水平
3.3.2 牙鲆dazl两种mRNA在性腺的表达
3.3.3 牙鲆dazl两种mRNA在胚胎发育时期的表达
3.3.4 牙鲆dazl两种mRNA在性腺的定位
3.3.5 牙鲆dazl甲基化对其表达的调控
3.3.6 牙鲆DAZL两种蛋白在组织的表达
3.3.7 牙鲆DAZL两种蛋白在性腺的定位
3.4 讨论
3.4.1 关于实验方法
3.4.2 关于牙鲆dazl mRNA与蛋白的表达
3.4.3 本章小结
第四章 牙鲆DAZL两种蛋白的靶mRNA研究
4.1 引言
4.2 材料与方法
4.2.1 实验材料
4.2.2 实验方法
4.3 结果
4.3.1 免疫沉淀产物的RT-PCR检测
4.3.2 高通量测序结果
4.3.3 牙鲆DAZL两种蛋白的靶mRNA
4.3.4 牙鲆dazl的两种mRNA可能是其蛋白产物的靶mRNA
4.4 讨论
4.4.1 关于实验方法
4.4.2 关于PODAZL的功能
4.4.3 本章小结
4.5 总结与展望
参考文献
致谢
个人简历
发表的学术论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]鱼类性别决定及分化相关基因研究进展[J]. 路畅,苏利娜,朱邦科. 湖北农业科学. 2014(13)
[2]胃癌细胞中Ras基因的表达、突变分析及新剪接型Kras△E2的发现[J]. 刘阳,段衍涛,王炤乾,王荣花,胡冉,王慧萍. 现代生物医学进展. 2014(03)
[3]Effects of Dietary Soy Isoflavones on Feed Intake,Growth Performance and Digestibility in Juvenile Japanese Flounder（Paralichthys olivaceus）[J]. MAI Kangsen,ZHANG Yanjiao,CHEN Wei,XU Wei,AI Qinghui,and ZHANG Wenbing Key Laboratory of Aquaculture Nutrition and Feed,Ministry of Agriculture,and the Key Laboratory of Mariculture,Ministry of Education,Ocean University of China,Qingdao 266003,P.R.China. Journal of Ocean University of China. 2012(04)
[4]nanos同源基因在黑脊倒刺鲃生殖细胞中的表达研究[J]. 苏敏,陈元仲,吕博彦,唐良华. 生物技术. 2012(04)
[5]Identification of two Major Histocompatibility（MH） Class Ⅱ A Genes and Their Association to Vibrio anguillarum Infection in Half-smooth Tongue Sole（Cynoglossus semilaevis）[J]. LI Chunmei,WANG Xubo,ZHANG Quanqi ,WANG Zhigang,QI Jie,YI Qilin,LIU Zhipeng,WANG Yanan,and YU Haiyang College of Marine Life Sciences,Key Laboratory of Marine Genetics and Breeding,Ministry of Education,Ocean University of China,Qingdao 266003,P.R.China. Journal of Ocean University of China. 2012(01)
[6]半滑舌鳎Vasa基因cDNA克隆及其在繁殖周期的表达[J]. 张远青,温海深,何峰,李吉方,史丹,胡健,刘淼,母伟杰,马瑞芹. 水产学报. 2012(01)
[7]Molecular cloning,characterization and expression analysis of Sox9a and Foxl2 genes in half-smooth tongue sole（Cynoglossussemilaevis）[J]. DONG Xiaoli 1,2,CHEN Songlin 2,JI Xiangshan 3,SHAO Changwei 2 1 College of Fisheries,Ocean University of China,Qingdao 266003,China 2 Key Laboratory for Sustainable Utilization of Marine Fisheries Resources of Ministry of Agriculture,Yellow Sea Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Qingdao 266071,China 3 College of Animal Science and Technology,Shandong Agricultural University,Taian 271018,China. Acta Oceanologica Sinica. 2011(01)
[8]b-DAZL:A novel gene in bovine spermatogenesis[J]. Qingbo Zhang~a Qifa Li~(a,*) Jiahuang Li~b Xinfu Li~a Zhenshan Liu~a Dawei Song~a Zhuang Xie~a ~a Laboratory of Animal Reproductive Genetics and Molecular Evolution,College of Animal Science and Technology,Nanjing Agriculture University,Nanjing 210095,China ~b Pharmaceutic Biotechnology Key Laboratory,College of Life Science,Nanjing University,Nanjing 210093,China. Progress in Natural Science. 2008(10)
[9]半滑舌鳎DMRT 1基因的克隆与表达分析[J]. 孙业盈,张全启,齐洁,王志刚,陈妍婕,李春梅,钟其旺. 武汉大学学报(理学版). 2008(02)
[10]半定量RT-PCR法在检测基因表达水平中的应用[J]. 王荣,李红菊. 阜阳师范学院学报(自然科学版). 2007(01)
博士论文
[1]牙鲆（Paralichthys olivaceus）干细胞多能性相关转录因子Oct4、Nanog和Sox2的克隆与分析[D]. 高金宁.中国海洋大学 2014
[2]半滑舌鳎性腺差异表达基因的克隆鉴定与表达分析[D]. 孙业盈.中国海洋大学 2008
[3]Smad2/3在斑马鱼胚胎早期发育中的作用[D]. 贾顺姬.清华大学 2008
硕士论文
[1]半滑舌鳎性别相关基因DAZL和WT1a的克隆与表达分析[D]. 张红.中国海洋大学 2013
[2]牙鲆vasa基因的克隆、表达分析及其启动子调控的GFP报告载体构建[D]. 吴晓萌.中国海洋大学 2013
[3]玉米苗期干旱胁迫下可变剪接及其调控因子的研究[D]. 李娇.郑州大学 2013
[4]牙鲆Paralichthys olivaceus性腺分化与发育的组织学研究[D]. 孙朝徽.东北农业大学 2008
本文编号：3726585
【文章页数】：124 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1.1 引言
1.2 鱼类生殖细胞发育
1.2.1 鱼类的性别决定及相关因子
1.2.2 鱼类生殖细胞发育及相关因子
1.2.3 鱼类生殖细胞特异表达基因
1.3 RNA结合蛋白
1.3.1 RNA结合蛋白的结构特征
1.3.2 RNA结合蛋白的功能
1.4 DAZ家族研究进展
1.4.1 DAZ家族的结构特征
1.4.2 DAZ家族成员的进化关系
1.4.3 DAZ家族的相关研究
1.4.4 DAZ家族与人类疾病
1.5 硬骨鱼dazl表达与功能研究
1.6 本研究的主要内容和意义
1.6.1 本研究的主要内容
1.6.2 本研究的创新性和意义
第二章 牙鲆dazl基因及其可变剪接mRNA的鉴定
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 实验材料
2.2.2 实验方法
2.3 结果
2.3.1 牙鲆dazl cDNA序列
2.3.2 牙鲆dazl DNA序列
2.3.3 牙鲆dazl两种可变剪接mRNA的鉴定
2.3.4 牙鲆dazl基因上游调控序列的预测
2.4 讨论
2.4.1 关于实验方法
2.4.2 关于牙鲆dazl UTR的可变剪接
2.4.3 关于牙鲆dazl可变剪接的意义
2.4.4 本章小结
第三章 牙鲆DAZL的表达规律
3.1 引言
3.2 材料与方法
3.2.1 实验材料
3.2.2 实验方法
3.3 结果
3.3.1 牙鲆dazl mRNA在各组织的相对表达水平
3.3.2 牙鲆dazl两种mRNA在性腺的表达
3.3.3 牙鲆dazl两种mRNA在胚胎发育时期的表达
3.3.4 牙鲆dazl两种mRNA在性腺的定位
3.3.5 牙鲆dazl甲基化对其表达的调控
3.3.6 牙鲆DAZL两种蛋白在组织的表达
3.3.7 牙鲆DAZL两种蛋白在性腺的定位
3.4 讨论
3.4.1 关于实验方法
3.4.2 关于牙鲆dazl mRNA与蛋白的表达
3.4.3 本章小结
第四章 牙鲆DAZL两种蛋白的靶mRNA研究
4.1 引言
4.2 材料与方法
4.2.1 实验材料
4.2.2 实验方法
4.3 结果
4.3.1 免疫沉淀产物的RT-PCR检测
4.3.2 高通量测序结果
4.3.3 牙鲆DAZL两种蛋白的靶mRNA
4.3.4 牙鲆dazl的两种mRNA可能是其蛋白产物的靶mRNA
4.4 讨论
4.4.1 关于实验方法
4.4.2 关于PODAZL的功能
4.4.3 本章小结
4.5 总结与展望
参考文献
致谢
个人简历
发表的学术论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]鱼类性别决定及分化相关基因研究进展[J]. 路畅,苏利娜,朱邦科. 湖北农业科学. 2014(13)
[2]胃癌细胞中Ras基因的表达、突变分析及新剪接型Kras△E2的发现[J]. 刘阳,段衍涛,王炤乾,王荣花,胡冉,王慧萍. 现代生物医学进展. 2014(03)
[3]Effects of Dietary Soy Isoflavones on Feed Intake,Growth Performance and Digestibility in Juvenile Japanese Flounder（Paralichthys olivaceus）[J]. MAI Kangsen,ZHANG Yanjiao,CHEN Wei,XU Wei,AI Qinghui,and ZHANG Wenbing Key Laboratory of Aquaculture Nutrition and Feed,Ministry of Agriculture,and the Key Laboratory of Mariculture,Ministry of Education,Ocean University of China,Qingdao 266003,P.R.China. Journal of Ocean University of China. 2012(04)
[4]nanos同源基因在黑脊倒刺鲃生殖细胞中的表达研究[J]. 苏敏,陈元仲,吕博彦,唐良华. 生物技术. 2012(04)
[5]Identification of two Major Histocompatibility（MH） Class Ⅱ A Genes and Their Association to Vibrio anguillarum Infection in Half-smooth Tongue Sole（Cynoglossus semilaevis）[J]. LI Chunmei,WANG Xubo,ZHANG Quanqi ,WANG Zhigang,QI Jie,YI Qilin,LIU Zhipeng,WANG Yanan,and YU Haiyang College of Marine Life Sciences,Key Laboratory of Marine Genetics and Breeding,Ministry of Education,Ocean University of China,Qingdao 266003,P.R.China. Journal of Ocean University of China. 2012(01)
[6]半滑舌鳎Vasa基因cDNA克隆及其在繁殖周期的表达[J]. 张远青,温海深,何峰,李吉方,史丹,胡健,刘淼,母伟杰,马瑞芹. 水产学报. 2012(01)
[7]Molecular cloning,characterization and expression analysis of Sox9a and Foxl2 genes in half-smooth tongue sole（Cynoglossussemilaevis）[J]. DONG Xiaoli 1,2,CHEN Songlin 2,JI Xiangshan 3,SHAO Changwei 2 1 College of Fisheries,Ocean University of China,Qingdao 266003,China 2 Key Laboratory for Sustainable Utilization of Marine Fisheries Resources of Ministry of Agriculture,Yellow Sea Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Qingdao 266071,China 3 College of Animal Science and Technology,Shandong Agricultural University,Taian 271018,China. Acta Oceanologica Sinica. 2011(01)
[8]b-DAZL:A novel gene in bovine spermatogenesis[J]. Qingbo Zhang~a Qifa Li~(a,*) Jiahuang Li~b Xinfu Li~a Zhenshan Liu~a Dawei Song~a Zhuang Xie~a ~a Laboratory of Animal Reproductive Genetics and Molecular Evolution,College of Animal Science and Technology,Nanjing Agriculture University,Nanjing 210095,China ~b Pharmaceutic Biotechnology Key Laboratory,College of Life Science,Nanjing University,Nanjing 210093,China. Progress in Natural Science. 2008(10)
[9]半滑舌鳎DMRT 1基因的克隆与表达分析[J]. 孙业盈,张全启,齐洁,王志刚,陈妍婕,李春梅,钟其旺. 武汉大学学报(理学版). 2008(02)
[10]半定量RT-PCR法在检测基因表达水平中的应用[J]. 王荣,李红菊. 阜阳师范学院学报(自然科学版). 2007(01)
博士论文
[1]牙鲆（Paralichthys olivaceus）干细胞多能性相关转录因子Oct4、Nanog和Sox2的克隆与分析[D]. 高金宁.中国海洋大学 2014
[2]半滑舌鳎性腺差异表达基因的克隆鉴定与表达分析[D]. 孙业盈.中国海洋大学 2008
[3]Smad2/3在斑马鱼胚胎早期发育中的作用[D]. 贾顺姬.清华大学 2008
硕士论文
[1]半滑舌鳎性别相关基因DAZL和WT1a的克隆与表达分析[D]. 张红.中国海洋大学 2013
[2]牙鲆vasa基因的克隆、表达分析及其启动子调控的GFP报告载体构建[D]. 吴晓萌.中国海洋大学 2013
[3]玉米苗期干旱胁迫下可变剪接及其调控因子的研究[D]. 李娇.郑州大学 2013
[4]牙鲆Paralichthys olivaceus性腺分化与发育的组织学研究[D]. 孙朝徽.东北农业大学 2008
本文编号：3726585
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/scyylw/3726585.html
