三角帆蚌外套膜细胞培养的研究

发布时间：2023-01-31 04:21

　　我国是淡水珍珠的生产大国，淡水贝类当中三角帆蚌（Hypriosis cumingii）是我国珍珠产业的首选贝类，使用三角帆蚌作为育珠材料所产的珍珠具有色泽光鲜、珍珠层厚以及珍珠表面光滑圆润等特点，珍珠的质量普遍偏高，因此，三角帆蚌与池蝶蚌、褶纹冠蚌等为我国主要的淡水育珠贝类。然而，目前我国的淡水珍珠的产量与质量却出现了严重的不均衡发展，产量远远高于珍珠质量，从而导致我国淡水珍珠的销量出现严重滞后的问题。所产珍珠因其颗粒不饱满，光泽度不好，珍珠层较薄等问题制约了我国淡水珍珠产业的进一步发展。本实验室将游离细胞培养法应用到淡水珍珠的培育中，为培育高质量的大型有核珍珠提供了新思路，然而细胞培养又是制约此种方法进一步发展的主要因素。因此针对这一问题，本论文从三角帆蚌外套膜细胞培养条件的优化改良，细胞移植以及体外诱变对细胞生长的影响三方面探索了外套膜细胞的活力以及体外生长活性的变化特点，初步探索了三角帆蚌外套膜细胞DNA损伤及修复机制，主要结果如下所示： 1.三角帆蚌外套膜细胞体外培养条件的优化改良及最优培养时间的确定 （1）本实验在常规细胞培养的基础上，对培养条件进行改良，探索出更... 

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 水生生物细胞培养对防止微生物污染所采取的措施
        1.1.1 细胞来源与处理
        1.1.2 细胞培养的实验室要求
        1.1.3 细胞培养过程
    1.2 细胞培养技术在水产养殖中的应用
        1.2.1 细胞培养技术在鱼类、虾类研究上的应用
        1.2.2 细胞培养技术在贝类研究上的应用
    1.3 贝类细胞培养主要技术措施
        1.3.1 研究方法
        1.3.2 培养环境
    1.4 淡水育珠面临的问题
        1.4.1 淡水育珠技术
        1.4.2 插核工艺存在的问题
        1.4.3 淡水珍珠产量与质量的矛盾
    1.5 三角帆蚌外套膜细胞培养的新思路分析
        1.5.1 体内植入培养法对原代细胞培养的影响
        1.5.2 化学（ENU）以及物理(UV-light)诱变对原代细胞培养的影响
    1.6 研究目的与意义
    1.7 研究内容
第二章 三角帆蚌外套膜细胞体外培养条件的优化与改良
    2.1 材料和方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试剂及仪器
        2.1.3 试验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 组织培养显微观测分析
        2.2.2 细胞培养显微观测分析
        2.2.3 三角帆蚌外套膜细胞的RNA/DNA 比值分析
    2.3 讨论
        2.3.1 体外培养条件对三角帆蚌外套膜细胞原代培养的影响
        2.3.2 RNA/DNA作为细胞活力指标的讨论
第三章 细胞体内植入培养对细胞生长的影响
    3.1 材料和方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 试剂及仪器
        3.1.3 试验方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 体外培养的细胞植入活体外套膜中活力检测分析
        3.2.2 体外培养的细胞植入活体外套膜中生长活性检测分析
    3.3 讨论
        3.3.1 活体外套膜组织对体外培养细胞的影响
        3.3.2 细胞移植方法对大型有核珍珠培育的影响
第四章 ENU，UV诱变对三角帆蚌外套膜细胞生长的影响
    4.1 材料和方法
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试剂及仪器
        4.1.3 试验方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 诱变细胞所需ENU浓度、UV强度及照射时长的确定
        4.2.2 ENU诱变细胞活力及活性检测
        4.2.3 UV诱变细胞活力及活性检测
        4.2.4 ENU诱变细胞损伤性测定及细胞显微观测
        4.2.5 UV辐照细胞DNA损伤测定及细胞显微观测
    4.3 讨论
        4.3.1 乙酰基亚硝基脲(ethylnitrosourea, ENU)诱变对细胞生长的影响.44
        4.3.2 紫外线（UV- light）诱变对细胞生长的影响
第五章 研究结论
参考文献
附录
致谢



本文编号：3733713