天然四倍体泥鳅染色体组操作及微卫星分析

发布时间：2023-02-10 21:38

　　鱼类染色体组操作主要包括多倍体的人工诱导、雌核发育和雄核发育等,在鱼类遗传育种中占有重要的地位。本文为探讨鱼类人工诱导四倍体及雄核发育二倍体的新方法,以天然四倍泥鳅、二倍体泥鳅为研究对象,通过冷休克处理抑制第二极体释放,诱导四倍体,对其所产生后代的染色体数目、DNA相对含量、血红细胞核体积及微卫星等进行了较系统的分析;并采用冷休克方法诱导四倍体泥鳅雄核发育二倍体,对其后代的胚胎发育、倍性鉴定及用微卫星标记对雄核发育个体进行分析鉴定。具体结果如下:(1)冷休克诱导泥鳅四倍体的研究:结果表明,血红细胞核体积测定四倍体泥鳅的红细胞核长轴、短轴以及体积都显著大于三倍体(P<0.01)。流式细胞仪共检测一龄鱼147尾,其中三倍体泥鳅共31尾,四倍体泥鳅共116尾,占总数的78.9%;对流式细胞仪已确定的三倍体和四倍体泥鳅各3尾的鳍细胞体外培养进行染色体计数。结果显示,三倍体泥鳅染色体数目为3n=75,四倍体泥鳅染色体数目为4n=100;三种倍性鉴定方法结果一致。本试验采用了15对引物,筛选4对引物(Mac24、Mac37、Mac63、Mac425)用于微卫星标记的分析。结果表明,对照组均遗...

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 鱼类多倍体诱导方法
    1.2 人工诱导鱼类雌核发育
    1.3 人工诱导鱼类雄核发育
    1.4 鱼类倍性鉴定方法
    1.5 泥鳅的研究进展
第二章 冷休克诱导泥鳅四倍体倍性鉴定及微卫星分析
    1 材料
    2 方法
        2.1 倍性检测
        2.2 鳍细胞培养
        2.3 鳍组织细胞染色体标本的制备
        2.4 微卫星分析
    3 结果
        3.1 血红细胞核体测量
        3.2 流式细胞仪检测
        3.3 鳍细胞体外培养制备染色体观察
        3.4 基因组DNA的制备结果
        3.5 微卫星标记检测
    4 讨论
第三章 冷休克诱导泥鳅雄核发育二倍体倍性鉴定及微卫星分析
    1 材料
        1.1 材料亲本
    2 方法
        2.1 人工催产及受精
        2.2 冷休克处理
        2.3 受精卵孵化及仔鱼培育
        2.4 胚胎倍性检测
        2.5 受精卵和仔鱼管理及受精率、孵化率和成活率的统计
        2.6 显著性检验方法
        2.7 亲子鉴定
    3 结果
        3.1 受精率、孵化率及7天成活率
        3.2 胚胎倍性检测
        3.3 微卫星分析
    4 讨论
第四章 结论
参考文献
攻读学位期间发表论文
致谢



本文编号：3739959