代谢产物拮抗水生病原菌的南极真菌筛选，鉴定与组分分析
发布时间：2023-04-09 01:20
中国是世界上最大的鱼类生产、消费、加工和出口国,但是鱼病的泛滥影响其可持续发展,对常规药物的耐药是鱼病泛滥的原因之一。极地微生物来源的活性物质种类多样,生物活性强,是极具开发潜力的新型药物来源,从极地真菌中寻找具有拮抗水生病原菌的先导化合物,是本研究的目的。本文以南极真菌为主要对象,首先筛选具有拮抗水生病原菌活性的菌株,包括真菌培养性状观察,粗提物获取和活性筛选,其次对真菌做形态和分子鉴定,接着观测其发酵过程特征,最后对抑菌组分进行活性追踪与结构鉴定。主要研究结果如下:23株南极真菌经发酵10 d后萃取,每1 L真菌发酵液的萃取浸膏含量为28-190 mg。经过kirby-bauer纸片法筛选,其中一株(B-7)对嗜水气单胞菌ATCC 7966、鳗弧菌HLPF、无乳链球菌均高度敏感。该菌株经形态和显微观察,符合担子菌门(Basidiomycota)的共同特征,经18S rDNA和ITS序列测定,鉴定为皱孔菌科(Meruliaceae)的烟管菌属(Bjerkandera)真菌。经过批量发酵,获得发酵产物浸膏20g。发酵浸膏通过活性追踪的方法继续分离纯化,经核磁共振波谱和质谱在活性组分区鉴...
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
1.1 课题研究的背景及意义
1.2 国内外同类研究工作的现状及分析
1.3 本文主要研究内容
第一章 拮抗水生病原菌的南极真菌筛选
1.1 真菌培养性状观察
1.1.1 材料和方法
1.1.1.1 实验材料和设备
1.1.1.2 培养基配制
1.1.1.3 菌种复苏
1.1.1.4 菌种斜面培养
1.1.1.5 发酵准备
1.1.1.6 大瓶发酵
1.1.1.7 发酵产物萃取
1.1.2 结果与讨论
1.1.2.1 菌种斜面培养观察
1.1.2.2 真菌培养过程观察
1.1.2.3 发酵产物测定
1.2 真菌发酵产物活性筛选
1.2.1 材料和方法
1.2.1.1 材料
1.2.1.2 培养基配制
1.2.1.3 细菌复苏与纯化
1.2.1.4 抑菌实验纸片制备
1.2.1.5 kirby-bauer纸片法抑菌筛选
1.2.2 结果与讨论
第二章 抗菌活性真菌生长观测与分子鉴定
2.1 活性真菌生长观测
2.1.1 材料和方法
2.1.2 结果与讨论
2.1.2.1 真菌B-7原始形态鉴定
2.1.2.2 真菌B-7斜面形态鉴定
2.1.2.3 真菌B-7种子液形态鉴定
2.1.2.4 真菌B-7发酵产物形态鉴定
2.2 活性真菌分子鉴定
2.2.1 材料和方法
2.2.1.1 材料
2.2.1.2 真菌B-7分子鉴定
2.2.2 结果与讨论
第三章 真菌发酵特征与浸膏活性追踪
3.1 真菌发酵特征研究
3.1.1 材料与方法
3.1.1.1 材料
3.1.1.2 真菌摇瓶发酵观测
3.1.1.3 真菌批量发酵
3.1.2 结果与讨论
3.2 真菌发酵浸膏活性追踪
3.2.1 材料和方法
3.2.1.1 材料与设备
3.2.1.2 发酵浸膏分离总体流程图
3.2.1.3 发酵浸膏初次分离步骤
3.2.1.4 组分1-6-1-2和1-6-4-3-3分离与鉴定
3.2.1.5 组分1-5-2-2分离与鉴定
3.2.2 结果与讨论
3.2.2.1 粗浸膏第一次分离
3.2.2.2 组分1-6分离
3.2.2.3 组分1-6-1分离
3.2.2.4 组分1-6-1-2的结构解析
3.2.2.5 组分1-6-4分离
3.2.2.6 组分1-6-4-3-3的结构解析
3.2.2.7 组分1-5分离和结构鉴定
3.2.2.8 其余组分成分分析
结论
参考文献
攻读硕士期间的主要科研成绩
致谢
附录
附录一 真菌分离化合物的波谱和质谱
组分1-6-1-2的波谱
组分1-6-4-3-3的波谱和质谱
组分1-5-2-2的波谱
本文编号：3786808
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
1.1 课题研究的背景及意义
1.2 国内外同类研究工作的现状及分析
1.3 本文主要研究内容
第一章 拮抗水生病原菌的南极真菌筛选
1.1 真菌培养性状观察
1.1.1 材料和方法
1.1.1.1 实验材料和设备
1.1.1.2 培养基配制
1.1.1.3 菌种复苏
1.1.1.4 菌种斜面培养
1.1.1.5 发酵准备
1.1.1.6 大瓶发酵
1.1.1.7 发酵产物萃取
1.1.2 结果与讨论
1.1.2.1 菌种斜面培养观察
1.1.2.2 真菌培养过程观察
1.1.2.3 发酵产物测定
1.2 真菌发酵产物活性筛选
1.2.1 材料和方法
1.2.1.1 材料
1.2.1.2 培养基配制
1.2.1.3 细菌复苏与纯化
1.2.1.4 抑菌实验纸片制备
1.2.1.5 kirby-bauer纸片法抑菌筛选
1.2.2 结果与讨论
第二章 抗菌活性真菌生长观测与分子鉴定
2.1 活性真菌生长观测
2.1.1 材料和方法
2.1.2 结果与讨论
2.1.2.1 真菌B-7原始形态鉴定
2.1.2.2 真菌B-7斜面形态鉴定
2.1.2.3 真菌B-7种子液形态鉴定
2.1.2.4 真菌B-7发酵产物形态鉴定
2.2 活性真菌分子鉴定
2.2.1 材料和方法
2.2.1.1 材料
2.2.1.2 真菌B-7分子鉴定
2.2.2 结果与讨论
第三章 真菌发酵特征与浸膏活性追踪
3.1 真菌发酵特征研究
3.1.1 材料与方法
3.1.1.1 材料
3.1.1.2 真菌摇瓶发酵观测
3.1.1.3 真菌批量发酵
3.1.2 结果与讨论
3.2 真菌发酵浸膏活性追踪
3.2.1 材料和方法
3.2.1.1 材料与设备
3.2.1.2 发酵浸膏分离总体流程图
3.2.1.3 发酵浸膏初次分离步骤
3.2.1.4 组分1-6-1-2和1-6-4-3-3分离与鉴定
3.2.1.5 组分1-5-2-2分离与鉴定
3.2.2 结果与讨论
3.2.2.1 粗浸膏第一次分离
3.2.2.2 组分1-6分离
3.2.2.3 组分1-6-1分离
3.2.2.4 组分1-6-1-2的结构解析
3.2.2.5 组分1-6-4分离
3.2.2.6 组分1-6-4-3-3的结构解析
3.2.2.7 组分1-5分离和结构鉴定
3.2.2.8 其余组分成分分析
结论
参考文献
攻读硕士期间的主要科研成绩
致谢
附录
附录一 真菌分离化合物的波谱和质谱
组分1-6-1-2的波谱
组分1-6-4-3-3的波谱和质谱
组分1-5-2-2的波谱
本文编号：3786808
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