糖诱导SUMO化修饰对黄颡鱼脂质代谢调控机理的研究

发布时间：2023-11-14 20:11

　　小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)修饰,也称SUMO化修饰,是一种重要的转录翻译后修饰,指SUMO以ATP依赖的方式共价结合细胞内靶蛋白中的赖氨酸残基的过程。SUMO化修饰参与许多生物学过程,如信号转导、核质转运、转录调控、DNA修复和细胞周期调控等,在细胞内环境稳态中发挥着重要的作用。糖类作为生物体重要的营养元素之一,与哺乳动物相比,鱼类对于膳食糖类的利用能力相对较低。然而,日粮投喂黄颡鱼碳水化合物可以起蛋白质节约效应。目前,SUMO化修饰在鱼类上研究较少,关于饲料葡萄糖对鱼类SUMO化修饰的研究仍处于空白水平。基于SUMO家族蛋白在哺乳动物及一些模式生物中进化较为保守,葡萄糖是否介导了某些脂质代谢转录因子,或者关键基因的SUMO化修饰而参与鱼类脂质代谢的调控?具体机理又是什么?以黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)为试验鱼,通过基因克隆技术,获得10个SUMO化修饰关键基因的c DNA序列,分析目的基因的基本分子特征,并进行生物信息学解析。然后,探讨了体内外糖水平对黄颡鱼肝脏SUMO化修饰关键基因转录水...

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略词表
第一章 文献综述
    1 SUMO化修饰的研究进展
        1.1 SUMO化修饰关键基因
        1.2 SUMO化修饰的功能
        1.3 鱼类SUMO化修饰研究进展
    2 SUMO化修饰对脂质代谢影响的研究进展
    3 糖类对SUMO化修饰影响的研究进展
    4 本研究的目的及意义
第二章 黄颡鱼SUMO化修饰关键基因的分子特征及组织分布
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验鱼的饲养及样品采集
        2.2 实验试剂
        2.3 SUMO化修饰关键基因c DNA序列的克隆
        2.4 SUMO化修饰关键基因序列分析
        2.5 SUMO化修饰关键基因的组织表达分析
        2.6 统计分析
    3 结果与分析
        3.1 黄颡鱼SUMO化修饰关键基因c DNA序列特征
        3.2 黄颡鱼SUMO化修饰关键基因氨基酸序列特征
        3.3 黄颡鱼SUMO化修饰关键基因氨基酸序列系统进化分析
        3.4 黄颡鱼SUMO化修饰关键基因组织分布水平
    4 讨论
第三章 糖水平对黄颡鱼肝脏SUMO化修饰关键基因的影响
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验设计
            2.1.1 黄颡鱼摄食不同糖水平饲料的养殖试验
            2.1.2 不同葡萄糖水平孵育黄颡鱼肝细胞试验
                2.1.2.1 黄颡鱼肝细胞分离及培养
                2.1.2.2 细胞活力测定
        2.2 实验试剂
        2.3 样品分析
            2.2.1 基因转录活性分析
        2.4 统计分析
    3 结果与分析
        3.1 饲料糖水平对黄颡鱼肝脏SUMO化修饰基因转录活性的影响
        3.2 葡萄糖孵育对黄颡鱼肝细胞活力的影响
        3.3 葡萄糖孵育对黄颡鱼肝细胞SUMO化修饰基因转录活性的影响
    4 讨论
第四章 葡萄糖介导SUMO化修饰调控黄颡鱼肝脏脂质代谢
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验试剂
        2.2 黄颡鱼肝脏细胞的分离及培养
        2.3 细胞酶活力分析
        2.4 细胞活力及脂质蓄积分析
        2.5 定量PCR
        2.6 蛋白质免疫印迹分析
        2.7 蛋白质免疫沉淀分析SUMO化修饰水平
        2.8 统计分析
    3 结果与分析
        3.1 葡萄糖对黄颡鱼肝细胞活力的影响
        3.2 葡萄糖对黄颡鱼肝细胞脂质蓄积的影响
        3.3 葡萄糖对黄颡鱼肝细胞脂质代谢基因表达及酶活性的影响
        3.4 葡萄糖对黄颡鱼肝细胞LXRα/SREBP1/SCD1 蛋白表达的影响
        3.5 葡萄糖对黄颡鱼肝细胞SREBP1的SUMO化修饰水平的影响
    4 讨论
全文总结
参考文献
附录
致谢



本文编号：3864125