中华鲟卵黄蓄积关键基因克隆及对饲料脂肪水平的响应研究

发布时间：2023-12-09 15:25

　　中华鲟(Acipenser sinensis)是我国特有的大型生殖洄游性鱼类,数量稀少。为更好的保护这一珍稀资源,中华鲟的人工繁殖工作很早就已经开展。但由于养殖过程中大多数中华鲟雌性个体始终无法突破生殖障碍由II期顺利过渡到III期,这给人工增殖工作带来很大的困难。因此,研究其卵巢发育的分子机制以及影响其卵巢发育的关键营养因子至关重要。本文系统地克隆了中华鲟卵黄沉积及水解关键基因的c DNA全序列,对其分子特征及功能进行了详细的分析。最后通过投喂中华鲟不同脂肪水平的饲料,根据卵巢的发育状况以及卵黄沉积及水解相关基因的表达情况来研究饲料中不同水平的脂肪对其卵巢发育的影响。研究结果如下:1.关于中华鲟卵黄沉积及水解关键基因的分子鉴定及表达分析本文首次较系统地克隆得到了6个中华鲟卵黄沉积及水解关键基因(vtgr,atp6v1c1,atp6v1h,ctsb,ctsd和ctsl)的c DNA全长序列,对其c DNA及氨基酸序列进行生物信息学分析发现,我们克隆得到的6条基因(vtgr,atp6v1c1,atp6v1h,ctsb,ctsd和ctsl)的序列全长分别是3640 bp,1638 bp,1...

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略词表
第一章 文献综述
    1 中华鲟的资源和繁殖研究
        1.1 中华鲟的种质资源状况
        1.2 中华鲟性腺发育状况以及繁殖生物学的研究
    2 鱼类卵黄沉积及相关基因的研究
        2.1 鱼类卵黄沉积的一般过程
        2.2 鱼体内卵黄沉积相关基因的研究现状
    3 饲料中的脂肪对亲鱼性腺发育的影响
    4 本研究目的和意义
第二章 中华鲟卵黄沉积及水解关键基因的分子特征及时空表达
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 实验鱼养殖及样品采集
        2.2 实验试剂
        2.3 中华鲟卵黄沉积及水解关键基因cDNA序列的克隆
            2.3.1 总RNA的提取及第一链c DNA的合成
            2.3.2 目的基因cDNA核心序列的克隆及测序
            2.3.3 目的基因cDNA3’和5’末端的克隆及测序
        2.4 目的基因的序列分析
        2.5 目的基因的时空表达分析
        2.6 统计分析
    3 结果与分析
        3.1 中华鲟卵黄沉积及水解关键基因的全长分析
        3.2 中华鲟卵黄沉积及水解关键基因的生物信息学分析
        3.3 中华鲟卵黄沉积及水解关键基因系统进化树的构建及分析
        3.4 中华鲟卵黄沉积及水解关键基因时空表达特征分析
    4 讨论
第三章 不同脂肪水平的饲料对中华鲟性腺发育影响研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验设计
            2.1.1 实验饲料
            2.1.2 试验鱼和饲养管理
            2.1.3 体检及样品采集
        2.2 样品分析
            2.2.1 样品常规分析
            2.2.2 样品组织学分析
            2.2.3 样品表达水平分析
        2.3 数据分析
    3 结果
        3.1 不同脂肪水平的饲料对中华鲟卵巢发育状况的影响
        3.3 不同脂肪水平的饲料对中华鲟卵黄沉积以及水解基因表达的影响
    4 讨论
第四章 全文总结与展望
    1 全文总结
    2 创新点
    3 展望
参考文献
附录 :硕士期间发表论文与专利
致谢



本文编号：3871719