三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)在氨氮胁迫下氨氮代谢终产物排出途径的研究

发布时间：2024-02-26 18:50

　　在水产养殖体系中,氨氮浓度会随时间的延长而快速增加,现已成为蟹类健康养殖中一个主要的生理挑战。本文通过运用DGE技术构建和分析了三疣梭子蟹在氨氮胁迫下的鳃基因表达谱,检测了氨氮代谢终产物排出相关的通道蛋白基因表达水平、尿素和尿酸合成相关的酶基因表达水平,测定了各组织中氨氮代谢终产物含量的变化,深入探讨了三疣梭子蟹在氨氮胁迫下的生理适应机制、解毒代谢机制和代谢产物的排出机制。本论文主要内容包括以下三个方面：1应用DGE技术构建与分析三疣梭子蟹在氨氮胁迫下鳃基因表达谱本实验运用数字基因表达谱(DGE)技术构建了三疣梭子蟹在5mg/L NH4Cl胁迫48h下的鳃基因表达谱。共产生58,336条unigenes,平均长度为689bp。差异基因功能分类表明在氨氮胁迫下被显著调节的生理过程主要有氨基酸代谢、核苷酸代谢、线粒体膜电位调节、活性氧代谢、抗氧化及免疫响应。本文选择了分别对与抗氧化系统、线粒体电子传递、蛋白质消化与吸收、免疫系统相关的7个基因进行了实时定量PCR验证。本研究结果为更好的理解三疣梭子蟹在氨氮胁迫下分子响应机制提供了极具价值的基因信息。2三疣梭子蟹在氨氮胁迫下氨排出途径的研究本...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 水生动物在氨氮胁迫下解毒代谢机制的研究进展
    2 甲壳动物在氨氮胁迫下氨氮代谢终产物排出途径的研究进展
        2.1 甲壳动物在氨氮胁迫下氨排出途径的研究进展
        2.2 甲壳动物在氨氮胁迫下尿素\尿酸排出途径的研究进展
    3 基因表达谱在水生动物抗胁迫研究中的应用及进展
第二章 三疣梭子蟹在氨氮胁迫下鳃基因表达谱的构建与分析
    1 材料和方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验设置
        1.3 样品制备
        1.4 文库构建与测序
        1.5 GO分析与KEGG通路分析
        1.6 实时荧光定量PCR验证
    2. 结果
        2.1 测序数据质量评估
        2.2 差异基因表达分析
        2.3 GO分析与KEGG通路分析
        2.4 DGE验证分析
    3. 讨论
    4 小结
第三章 三疣梭子蟹在氨氮胁迫下氨排出途径的研究
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验设置
        1.3 血样采集
        1.4 组织样品制备
        1.5 血淋巴氨含量的测定
        1.6 Na⁺/K⁺-ATP酶(NKA)与V-H⁺-ATP酶活力测定
        1.7 超微切片制作
        1.8 实时荧光定量分析(q RT-PCR)
        1.9 数据处理与分析
    2 结果
        2.1 氨氮胁迫对三疣梭子蟹血氨含量的影响
        2.2 三疣梭子蟹在氨氮胁迫下鳃组织中Rh、K⁺通道、NHE和NKCC的基因表达分析
        2.3 氨氮胁迫对三疣梭子蟹鳃组织中NKA酶活力的影响
        2.4 氨氮胁迫对三疣梭子蟹鳃组织中与微管相关的胞吐排氨机制的研究
    3 讨论
    4 小结
第四章 三疣梭子蟹在氨氮胁迫下尿酸、尿素代谢途径与组织分布的研究
    1 材料和方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验设置
        1.3 血样采集
        1.4. 组织样品制备
        1.5 实时荧光定量分析(q RT-PCR)
        1.6 含氮化合物含量测定
        1.7 数据处理与分析
    2 结果
        2.1 氨氮胁迫对三疣梭子蟹各组织中XO、CPSⅢ、ARG和URI基因表达水平的影响
        2.2 氨氮胁迫对三疣梭子蟹各组织中尿酸、尿素含量分布的影响
        2.3 氨氮胁迫对三疣梭子蟹鳃组织尿素转运蛋白(UT)基因表达水平的影响
    3 讨论
        3.1 氨氮胁迫对三疣梭子蟹氮代谢终产物合成途径的影响
        3.2 氨氮胁迫对三疣梭子蟹尿酸、尿素组织分布的影响
    4 小结
结论
参考文献
致谢
个人简历
学术成果



本文编号：3911700