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草鱼IPS-1基因应对GCRV感染及病毒和细菌类似物刺激的功能研究

发布时间:2024-02-27 10:33
  草鱼(Ctenopharyngodon idella)在我国淡水养殖中占有重要的地位,但草鱼呼肠孤病毒引起的草鱼出血病严重影响了草鱼养殖业的发展。草鱼是低等脊椎动物,先天性免疫在草鱼免疫系统中占据重要地位,因此研究草鱼先天免疫相关基因的抗病机理将为草鱼出血病的治疗奠定理论基础。 IPS-1(IFN-β promoter stimulator1,IPS-1)是RLRs(retinoic acid-inducible gene-I(RIG-I)-like receptors,RLRs)家族重要的接头分子,在RLRs介导的抗病毒免疫反应中起重要作用。草鱼IPS-1(CiIPS-1)蛋白包含N端的CARD(caspase activation andrecruitment domain,CARD)、中间的多脯氨酸结构域(proline-rich domain,PRO)、一个TRAF2(tumour-necrosis factor receptor associated factor,TRAF)结合位点和一个C端的跨膜域(terminal transmembrane,TM)。在哺乳动物中研究表明...

【文章页数】:64 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1-1RLRs介导的信号转导和调控(YoneyamaandFujita2007)

图1-1RLRs介导的信号转导和调控(YoneyamaandFujita2007)

和MDA5识别RNA的能力有所不同,更能促进MDA5与RNA病毒的结合,这可能与RIG-I和MDA5对不同dsRNA的亲和力不同造成的(Pippigetal.2009)。RIG-I和MDA5基因蛋白以不活跃的形式存在于细胞质中,病毒入侵后,R....


图1-2RLRs/IPS-1介导的信号通路(RamosandGale2011)

图1-2RLRs/IPS-1介导的信号通路(RamosandGale2011)

图1-2RLRs/IPS-1介导的信号通路(RamosandGale2011)Fig.1-2IPS-1mediatedsignalingpathwaythroughRLRs(RamosandGale2011)-1基因介导的先天性免疫信号通路S-....


图2-1pCMV-EGFP-CMV-SV40质粒图

图2-1pCMV-EGFP-CMV-SV40质粒图

Forwardprimer,10mM)0.8Reserveprimer,10mM)0.8TP(10mM)0.8Buffer2Cl2(25mM)2Taq聚合酶0.22O11.8总体积20(1循环),94oC,3min;热循环(30循环),设计引物预测温....


图2-3CiIPS-1全长及其结构域的过表达载体质粒图

图2-3CiIPS-1全长及其结构域的过表达载体质粒图

通过EcoRI和ApaI双酶切,将CiIPS-1全长基因及其结构域片段引入过表达载体pCMV(图2-1),成功构建好CiIPS的六个表达载体,质粒图如下图2-3所示:pIPS-1(图2-3A)、pΔPRO(图2-3B)、pCARD(图2-3C)、pΔCARD(图2-3D)、pΔT....



本文编号:3912562

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