斑节对虾细胞周期蛋白Y和E基因的克隆及相关表达分析

发布时间：2024-03-09 14:04

　　斑节对虾属于甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)、游泳亚目(Natantia)、对虾科(penaeidae)、对虾属(penaeus),是对虾属中较大一种,具有很高的经济和营养价值[1]。但是,在斑节对虾养殖过程中,亲虾繁育技术一直是一个非常重要的限制因素[2,3]。随着分子生物学技术的发展,人们越来越关注甲壳类动物尤其是对虾中细胞周期蛋白基因的功能,对细胞周期蛋白的分子调控机制已有所研究。细胞周期蛋白是参与细胞周期调控的重要因子,细胞周期中,细胞周期蛋白家族的变化决定着细胞周期中的一系列过程[4],如DNA复制、染色体加倍、时相转换、细胞周期的起始与结束等等。有研究报道,在斑节对虾性腺发育的相关功能基因中,细胞周期素对其正常的生长、繁殖、发育和遗传具有决定性作用[5]。因此,在对斑节对虾亲虾繁育的探寻和研究中[6,7],与斑节对虾卵巢发育相关的细胞周期蛋白家族基因成为研究热点。在本研究中,从分子水平和蛋白水平层面,我们对斑节对虾的细胞周期蛋白Y(Pm-cyclin Y)基因进行了研究,探索Pm-cyclin Y与斑节对虾卵巢发育的相关性,以期为斑节对虾卵巢发育的分...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1.细周期进程及重要细周期蛋白的调控路图

上海海洋大学硕士学位论文表达趋势[36-38]，周期蛋白E则与M期晚期及G1期早期开始表达并一直持续到G期的末期（如图1-1）。

图1-4.实验技术路图

图1-4.实验技术路图Fig.1-4Experimentaltechnologyroadmap

图2-1斑节对虾卵巢组织总RNA电泳图谱

28S和18S两条条带（常用于衡量RNA质量指标）清晰，表明提取的总RNA可以用于进行后续实验。（如图2-1）

图2-2逆转录产物质量检测意图

得到单一且清亮的目的条带，证明逆转录得到的cDNA可以作为，用于后续实验（如图2-2）。将逆转录得到的cDNA分装，并将分装的一部即近期实验会用到的部分，放置在-20℃冰箱；将剩余的分装产物，标号放在℃冰箱。

本文编号：3923528