硝化抑制剂对‘库尔勒香梨’果实品质影响的机理
发布时间：2020-08-03 17:39
【摘要】：[目的]通过实验阐述硝化抑制剂对‘库尔勒香梨’果实品质的影响,探究硝化抑制剂对‘库尔勒香梨’果实品质影响的生理机制和分子机制,为‘库尔勒香梨’果实品质调控提供理论依据。[方法]该试验以30年生‘库尔勒香梨’为试验材料,在‘库尔勒香梨’开花前,在土壤施尿素时添加施用尿素用量的0.3%的硝化抑制剂,以不添加硝化抑制剂为对照。对照与处理各选5个重复。测定施肥前1 d与施肥后第3 d土壤中铵态氮与硝态氮含量,于开花初期及花后15 d测定叶片铵态氮、硝态氮及游离氨基酸含量,同时采用高效液相色谱法测定开花初期及花后15 d幼果中IAA,ABA,ZT,GA3含量。采用高通量测序技术筛选花后15 d左右幼果中与激素合成相关的差异表达基因。在花后60 d调查果实脱萼率,在果实成熟期测定分析果实外观品质及果实内在品质。[结果]研究结果表明:(1)施肥前1d,对照组与处理组铵态氮和硝态氮含量均差异不显著,在施用肥后第3 d,对照组铵态氮含量显著低于处理组,而对照组硝态氮含量显著高于处理组。(2)在开花初期,对照组与处理组的叶片中铵态氮、硝态氮及游离氨基酸含量均无显著差异。在花后15 d,对照与处理的叶片中铵态氮、游离氨基酸含量无显著差异,而对照组硝态氮的含量显著高于处理组。(3)在花后60 d,对照组‘库尔勒香梨’果实脱萼率显著低于处理组。对照组果实平均单果重、纵横径、果形指数显著均低于处理组;对照与处理的果实可溶性固形物含量、总酸含量无显著差异。对照组果实中石细胞含量、果实硬度显著高于处理组,果实中Vc含量也显著低于处理。(4)在‘库尔勒香梨’开花初期,对照组与处理组ZT、GA3、IAA含量均无显著差异,对照组ABA含量显著高于处理组。而在花后15 d,对照组的‘库尔勒香梨’幼果中IAA和ZT含量显著高于处理组,ABA含量显著低于处理组,对照组与处理组GA3含量无显著差异。(5)对花后15 d‘库尔勒香梨’幼果进行转录组测序分析后,根据处理组幼果中差异表达基因注释信息,筛选出2条差异表达基因与脱落酸合成相关基因上调表达、筛选出1条与生长素合成相关差异表达基因下调表达。[结论]综上所述,硝化抑制剂通过降低土壤硝态氮含量,使‘库尔勒香梨’叶片硝态氮含量下降,低硝态氮浓度影响了‘库尔勒香梨’幼果中与内源激素合成代谢相关基因的表达,影响了‘库尔勒香梨’花期内源激素的合成与代谢,从而提升‘库尔勒香梨’脱萼率,改善了果实品质。
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S661.2
【图文】：
分别以纯甲醇，80%甲醇，纯水，乙酸溶液（pH=3.5）作为提取溶剂。检测甲醇作为提取溶剂，不仅在后续脱色，萃取等步骤中较其他溶剂效果明显，为提取试剂，表现出了较高的提取效率，杂峰较少。提取时间分别设置 12h 至明激素提取效率随着浸提时间的增加而增加，但是提取时间超过 16h 后提升显，因此浸提时间设置为 16h。色谱条件的筛选1 检测波长的选择 4 种激素标准溶液，采用紫外可见光光度计在 190nm-400nm 进行光谱扫描植物激素的最佳吸收波长以确定后续实验检测波长。结果表明，4 种激素的长分别为 ABA 为 237nm，IAA 为 235nm，GA3为 215 和 253 nm，ZT 为 25析，由于四种激素在 254nm 波长条件下均有良好吸收，因此设置紫外检测器 254 nm。2 流动相的比例的选择aB
3.2.3 分析方法评价3.2.3.1 4 种激素的定性分析采用优化后的色谱条件，对混合激素标准液溶液进行HPLC分析,结果如图3-2所示，ZT，GA3, IAA 和 ABA 的保留时间分别为（4.525±0.408）min、（5.433±0.50）min、（9.761±0.929）和（15.063±1.346）min。图 3-2 在 254nm 波长检测的混合激素标准品色谱图：1.玉米素、2.赤霉素、3.生长素、4-脱落酸Fig.3-2 Chromatogram of the mixture of hormones standards under 254nm：1.zeatin（ZT）, 2.gibberellicacid（GA3）, 3.indole-3-acetic acid（IAA）, 4.abscisic acid(ABA)
硝化抑制剂对‘库尔勒香梨’果实品质影响的机理表 4-2 ‘库尔勒香梨’各样品 RNA 提取检测结果Table 4-2 The RNA extraction results of "Korla fragrant pear" fruit样品编号Samplecode浓度（ng/ul）总量（ug）RIN 值 28S/18S OD260/280T01 429.3 11.6 8.4 2.15 2.16T02 405.3 10.5 7.9 2.14 1.61T03 278.6 7.2 7.8 2.14 2.13T04 528.1 14.3 8.6 2.12 2.16T05 425.2 11.1 8.7 2.14 2.15T06 393.5 10.2 8.1 2.14 2.01
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S661.2
【图文】：
分别以纯甲醇，80%甲醇，纯水，乙酸溶液（pH=3.5）作为提取溶剂。检测甲醇作为提取溶剂，不仅在后续脱色，萃取等步骤中较其他溶剂效果明显，为提取试剂，表现出了较高的提取效率，杂峰较少。提取时间分别设置 12h 至明激素提取效率随着浸提时间的增加而增加，但是提取时间超过 16h 后提升显，因此浸提时间设置为 16h。色谱条件的筛选1 检测波长的选择 4 种激素标准溶液，采用紫外可见光光度计在 190nm-400nm 进行光谱扫描植物激素的最佳吸收波长以确定后续实验检测波长。结果表明，4 种激素的长分别为 ABA 为 237nm，IAA 为 235nm，GA3为 215 和 253 nm，ZT 为 25析，由于四种激素在 254nm 波长条件下均有良好吸收，因此设置紫外检测器 254 nm。2 流动相的比例的选择aB
3.2.3 分析方法评价3.2.3.1 4 种激素的定性分析采用优化后的色谱条件，对混合激素标准液溶液进行HPLC分析,结果如图3-2所示，ZT，GA3, IAA 和 ABA 的保留时间分别为（4.525±0.408）min、（5.433±0.50）min、（9.761±0.929）和（15.063±1.346）min。图 3-2 在 254nm 波长检测的混合激素标准品色谱图：1.玉米素、2.赤霉素、3.生长素、4-脱落酸Fig.3-2 Chromatogram of the mixture of hormones standards under 254nm：1.zeatin（ZT）, 2.gibberellicacid（GA3）, 3.indole-3-acetic acid（IAA）, 4.abscisic acid(ABA)
硝化抑制剂对‘库尔勒香梨’果实品质影响的机理表 4-2 ‘库尔勒香梨’各样品 RNA 提取检测结果Table 4-2 The RNA extraction results of "Korla fragrant pear" fruit样品编号Samplecode浓度（ng/ul）总量（ug）RIN 值 28S/18S OD260/280T01 429.3 11.6 8.4 2.15 2.16T02 405.3 10.5 7.9 2.14 1.61T03 278.6 7.2 7.8 2.14 2.13T04 528.1 14.3 8.6 2.12 2.16T05 425.2 11.1 8.7 2.14 2.15T06 393.5 10.2 8.1 2.14 2.01
【参考文献】
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本文编号：2779973
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