梅花成花相关基因SOC1、SVP和LFY的功能分析
发布时间：2020-12-15 20:21
梅花（Prunus mume Sieb.et Zucc.）属蔷薇科李属植物,是中国的传统名花,具有很高的观赏价值和丰富的文化内涵。相对于李属其他植物,在长江流域及其以南地区,梅花开花最早,能够在早春盛开。花期不仅是影响梅花观赏性状的重要因素之一,也是重要的栽培性状。成花转变作为植物开花的第一步,是植物从营养生长向生殖生长转变的重要转折点。前人研究表明,拟南芥成花调控途径中SOC1、SVP、LFY等开花整合子基因在植物成花转变过程中具有重要的调控作用,目前已经从很多植物中分离出了这些基因,并对其进行了深入研究,而目前对梅花成花相关基因的研究很少,有关梅花成花转变的分子调控机理尚不清楚。鉴于此,本研究首先采用RT-PCR的方法从梅花品种’长蕊绿萼’中克隆了 7个成花相关基因;利用实时荧光定量PCR的方法对它们的表达模式进行了分析,采用酵母双杂交技术研究了这些基因的蛋白互作模式;结合它们在拟南芥中过表达产生的表型变化,对这些基因的功能进行了全面而系统的阐释。主要结果如下:1.采用RT-PCR的方法从梅花’长蕊绿萼’叶片中克隆了 7个控制梅花成花阶段转变的基因,其中3个SOC1同源基因,2个S...
【文章来源】：北京林业大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：119 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１拟南芥主要开花途径（ＢｌｔａｉｅｌｅｔａＬ，２０１４）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ?ｔｉｍｅ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｉｎ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?（Ｂｌｉｉ?
２０１２），将同源性高的３个序列作为候选基因。根据ＣＤＳ序列分别设计引物，以梅花??‘长蕊绿萼’叶片ｃＤＮＡ为模板，采用ＲＴ－ＰＣＲ的方法进行扩增，克隆得到了这３个基??因，分别命名为尸ｗ及９Ｃ／－７、Ｐｗ汾９Ｃ／－２和（图２－２）。３个基因的长度略??有差异，但都在６５０?ｂｐ左右，与梅花基因组中的数据一致。根据梅花基因组数据，??将ＰｗＳＯｍ?ＰｗＳ（９Ｃ／－２和ＰＷＳＯＣ７－３?３个基因分别定位在梅花第５和第７条染色??体上（图２－３）。??１２?３?４??■Ｂｍ??图２－１梅花叶片总ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳图??１－４所示为提取ＲＮＡ的４次重复??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｇｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｌｅａｆ?ｏｆ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??１?－４?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?ｆｏｕｒ?ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ?ｏｆ?ＲＮＡ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ??—??ＢＢ??图２－２梅花奶Ｃ７基因扩增ＰＣＲ产物??Ｆｉｇ．?２－２?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?．ＳＹＸＶｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??Ｍ，?ＤＬ２０００；?ＳＯＣ１－Ｉ，?ＰｍＳＯＣｌ－１；?ＳＯＣ１－２，?ＰｍＳＯＣｌ－２：?ＳＯＣ１－３，?ＰｍＳＯＣｌ－３??〇?ｃｈｒ１?ｃｈｒ２?ｃｈｒ３?ｃｈｒ４?ｃｈｒ５?ｃｈｒ６?ｃｈｒ７?ｃｈｒ８??５Ｍｂ?ｐ＾ａｍ２＾??ＰｍＯＡＭ５ｆ?ＰｍＳＯＣ１－３－??ＰｍＤＡＭ６？??＿２＿?＿＿??ＰｍＳＶＰＩ－?ＰｍＳ〇Ｃ１＇１￣??１７?３０＾?１７?３?，??ＰｍＳＯＣ１－２－?２］?１??２４?４７＾?２４?７?Ｋ??２７?７＾?２６??
２０１２），将同源性高的３个序列作为候选基因。根据ＣＤＳ序列分别设计引物，以梅花??‘长蕊绿萼’叶片ｃＤＮＡ为模板，采用ＲＴ－ＰＣＲ的方法进行扩增，克隆得到了这３个基??因，分别命名为尸ｗ及９Ｃ／－７、Ｐｗ汾９Ｃ／－２和（图２－２）。３个基因的长度略??有差异，但都在６５０?ｂｐ左右，与梅花基因组中的数据一致。根据梅花基因组数据，??将ＰｗＳＯｍ?ＰｗＳ（９Ｃ／－２和ＰＷＳＯＣ７－３?３个基因分别定位在梅花第５和第７条染色??体上（图２－３）。??１２?３?４??■Ｂｍ??图２－１梅花叶片总ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳图??１－４所示为提取ＲＮＡ的４次重复??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｇｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｌｅａｆ?ｏｆ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??１?－４?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?ｆｏｕｒ?ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ?ｏｆ?ＲＮＡ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ??—??ＢＢ??图２－２梅花奶Ｃ７基因扩增ＰＣＲ产物??Ｆｉｇ．?２－２?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?．ＳＹＸＶｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??Ｍ，?ＤＬ２０００；?ＳＯＣ１－Ｉ，?ＰｍＳＯＣｌ－１；?ＳＯＣ１－２，?ＰｍＳＯＣｌ－２：?ＳＯＣ１－３，?ＰｍＳＯＣｌ－３??〇?ｃｈｒ１?ｃｈｒ２?ｃｈｒ３?ｃｈｒ４?ｃｈｒ５?ｃｈｒ６?ｃｈｒ７?ｃｈｒ８??５Ｍｂ?ｐ＾ａｍ２＾??ＰｍＯＡＭ５ｆ?ＰｍＳＯＣ１－３－??ＰｍＤＡＭ６？??＿２＿?＿＿??ＰｍＳＶＰＩ－?ＰｍＳ〇Ｃ１＇１￣??１７?３０＾?１７?３?，??ＰｍＳＯＣ１－２－?２］?１??２４?４７＾?２４?７?Ｋ??２７?７＾?２６??
【参考文献】：
期刊论文
[1]雷竹和拟南芥SOC1多聚体差异性分析[J]. 施泉,陈晓沛,林新春,徐永汉,徐英武. 浙江农林大学学报. 2016(02)
[2]水曲柳SOC1基因表达载体的构建及生物信息学分析[J]. 付德山,朱珠,崔丽婷,詹亚光,齐凤慧. 西南林业大学学报. 2015(06)
[3]茶树LEAFY基因的克隆和表达分析[J]. 韩兴杰,徐玲玲,廖亮,李同建,邓辉胜,樊启水. 园艺学报. 2015(08)
[4]芒果MSOC1基因的克隆与表达分析[J]. 魏军亚,唐杰,刘国银,刘德兵,陈业渊. 西北植物学报. 2015(06)
[5]中国水仙中SVP类似基因NSVP2可促进拟南芥的花序分枝[J]. 李小方,李瑞,张雪平,杨雪,邱艳,张伟,孙越,王洋. 植物生理学报. 2014(12)
[6]牡丹开花调控转录因子基因PrSOC1的克隆与表达分析[J]. 刘传娇,王顺利,薛璟祺,朱富勇,任秀霞,李名扬,张秀新. 园艺学报. 2014(11)
[7]葡萄SVP类MADS-box基因的克隆及表达分析[J]. 杨堃,张朝红,李树秀,张旭彤,王跃进. 西北林学院学报. 2012(04)
[8]草莓LFY同源基因的克隆及其表达分析[J]. 刘月学,邹冬梅,李贺,张志宏,马跃,代红艳. 园艺学报. 2012(05)
[9]白桦BpSOC1基因的克隆及时序表达分析[J]. 刘菲菲,李慧玉,王姗,刘桂丰. 东北林业大学学报. 2011(04)
[10]枣树ZjLFY基因cDNA片段的克隆与表达分析[J]. 孟玉平,曹秋芬,孙海峰. 果树学报. 2010(05)
硕士论文
[1]梅花花器官cDNA文库的构建及其PmAP3、PmPI、PmAG基因的克隆[D]. 骆江伟.华中农业大学 2009
本文编号：2918852
【文章来源】：北京林业大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：119 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１拟南芥主要开花途径（ＢｌｔａｉｅｌｅｔａＬ，２０１４）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ?ｔｉｍｅ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｉｎ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?（Ｂｌｉｉ?
２０１２），将同源性高的３个序列作为候选基因。根据ＣＤＳ序列分别设计引物，以梅花??‘长蕊绿萼’叶片ｃＤＮＡ为模板，采用ＲＴ－ＰＣＲ的方法进行扩增，克隆得到了这３个基??因，分别命名为尸ｗ及９Ｃ／－７、Ｐｗ汾９Ｃ／－２和（图２－２）。３个基因的长度略??有差异，但都在６５０?ｂｐ左右，与梅花基因组中的数据一致。根据梅花基因组数据，??将ＰｗＳＯｍ?ＰｗＳ（９Ｃ／－２和ＰＷＳＯＣ７－３?３个基因分别定位在梅花第５和第７条染色??体上（图２－３）。??１２?３?４??■Ｂｍ??图２－１梅花叶片总ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳图??１－４所示为提取ＲＮＡ的４次重复??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｇｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｌｅａｆ?ｏｆ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??１?－４?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?ｆｏｕｒ?ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ?ｏｆ?ＲＮＡ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ??—??ＢＢ??图２－２梅花奶Ｃ７基因扩增ＰＣＲ产物??Ｆｉｇ．?２－２?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?．ＳＹＸＶｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??Ｍ，?ＤＬ２０００；?ＳＯＣ１－Ｉ，?ＰｍＳＯＣｌ－１；?ＳＯＣ１－２，?ＰｍＳＯＣｌ－２：?ＳＯＣ１－３，?ＰｍＳＯＣｌ－３??〇?ｃｈｒ１?ｃｈｒ２?ｃｈｒ３?ｃｈｒ４?ｃｈｒ５?ｃｈｒ６?ｃｈｒ７?ｃｈｒ８??５Ｍｂ?ｐ＾ａｍ２＾??ＰｍＯＡＭ５ｆ?ＰｍＳＯＣ１－３－??ＰｍＤＡＭ６？??＿２＿?＿＿??ＰｍＳＶＰＩ－?ＰｍＳ〇Ｃ１＇１￣??１７?３０＾?１７?３?，??ＰｍＳＯＣ１－２－?２］?１??２４?４７＾?２４?７?Ｋ??２７?７＾?２６??
２０１２），将同源性高的３个序列作为候选基因。根据ＣＤＳ序列分别设计引物，以梅花??‘长蕊绿萼’叶片ｃＤＮＡ为模板，采用ＲＴ－ＰＣＲ的方法进行扩增，克隆得到了这３个基??因，分别命名为尸ｗ及９Ｃ／－７、Ｐｗ汾９Ｃ／－２和（图２－２）。３个基因的长度略??有差异，但都在６５０?ｂｐ左右，与梅花基因组中的数据一致。根据梅花基因组数据，??将ＰｗＳＯｍ?ＰｗＳ（９Ｃ／－２和ＰＷＳＯＣ７－３?３个基因分别定位在梅花第５和第７条染色??体上（图２－３）。??１２?３?４??■Ｂｍ??图２－１梅花叶片总ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳图??１－４所示为提取ＲＮＡ的４次重复??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｇｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｌｅａｆ?ｏｆ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??１?－４?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?ｆｏｕｒ?ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ?ｏｆ?ＲＮＡ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ??—??ＢＢ??图２－２梅花奶Ｃ７基因扩增ＰＣＲ产物??Ｆｉｇ．?２－２?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?．ＳＹＸＶｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??Ｍ，?ＤＬ２０００；?ＳＯＣ１－Ｉ，?ＰｍＳＯＣｌ－１；?ＳＯＣ１－２，?ＰｍＳＯＣｌ－２：?ＳＯＣ１－３，?ＰｍＳＯＣｌ－３??〇?ｃｈｒ１?ｃｈｒ２?ｃｈｒ３?ｃｈｒ４?ｃｈｒ５?ｃｈｒ６?ｃｈｒ７?ｃｈｒ８??５Ｍｂ?ｐ＾ａｍ２＾??ＰｍＯＡＭ５ｆ?ＰｍＳＯＣ１－３－??ＰｍＤＡＭ６？??＿２＿?＿＿??ＰｍＳＶＰＩ－?ＰｍＳ〇Ｃ１＇１￣??１７?３０＾?１７?３?，??ＰｍＳＯＣ１－２－?２］?１??２４?４７＾?２４?７?Ｋ??２７?７＾?２６??
【参考文献】：
期刊论文
[1]雷竹和拟南芥SOC1多聚体差异性分析[J]. 施泉,陈晓沛,林新春,徐永汉,徐英武. 浙江农林大学学报. 2016(02)
[2]水曲柳SOC1基因表达载体的构建及生物信息学分析[J]. 付德山,朱珠,崔丽婷,詹亚光,齐凤慧. 西南林业大学学报. 2015(06)
[3]茶树LEAFY基因的克隆和表达分析[J]. 韩兴杰,徐玲玲,廖亮,李同建,邓辉胜,樊启水. 园艺学报. 2015(08)
[4]芒果MSOC1基因的克隆与表达分析[J]. 魏军亚,唐杰,刘国银,刘德兵,陈业渊. 西北植物学报. 2015(06)
[5]中国水仙中SVP类似基因NSVP2可促进拟南芥的花序分枝[J]. 李小方,李瑞,张雪平,杨雪,邱艳,张伟,孙越,王洋. 植物生理学报. 2014(12)
[6]牡丹开花调控转录因子基因PrSOC1的克隆与表达分析[J]. 刘传娇,王顺利,薛璟祺,朱富勇,任秀霞,李名扬,张秀新. 园艺学报. 2014(11)
[7]葡萄SVP类MADS-box基因的克隆及表达分析[J]. 杨堃,张朝红,李树秀,张旭彤,王跃进. 西北林学院学报. 2012(04)
[8]草莓LFY同源基因的克隆及其表达分析[J]. 刘月学,邹冬梅,李贺,张志宏,马跃,代红艳. 园艺学报. 2012(05)
[9]白桦BpSOC1基因的克隆及时序表达分析[J]. 刘菲菲,李慧玉,王姗,刘桂丰. 东北林业大学学报. 2011(04)
[10]枣树ZjLFY基因cDNA片段的克隆与表达分析[J]. 孟玉平,曹秋芬,孙海峰. 果树学报. 2010(05)
硕士论文
[1]梅花花器官cDNA文库的构建及其PmAP3、PmPI、PmAG基因的克隆[D]. 骆江伟.华中农业大学 2009
本文编号：2918852
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