农杆菌介导真姬菇节孢子遗传转化系统的构建与运用

发布时间：2021-08-13 02:17

　　真姬菇是一种来自北温带的大型食用真菌,属于珍稀食用菌种。自上世纪八十年代自日本引入我国以来,历经数十年的产业培养,已成为我国食用真菌产业中不可或缺的一环。当前,真姬菇遗传转化系统的构建已经初步建立,但转化系统尚存在一定缺陷,使用的受体主要为原生质体,原生质体制备过程繁琐,需要使用溶壁酶消化菌丝体细胞壁,制备成功的原生质体需要保存在高渗溶液中以保持稳定的渗透压,由于原生质体非常脆弱,在离心收集原生质体时很容易因为过高的离心力而破裂。另外,部分原生质体在制备过程中有一定概率丢失细胞核,使得建立的转化体系效率过低,因此原生质体不是进行转化的理想材料,真姬菇节孢子因其制备方法简单,细胞不似原生质体般脆弱,且计数简单,可以更直观地表现转化效率且再生率较高,优于以原生质体作为受体的转化体系,因此本实验使用农杆菌介导转化法,以真姬菇节孢子作为受体进行转化,拟构建出一套成功的真姬菇遗传转化系统。本文的研究结果如下:1.对真姬菇单核菌丝产生节孢子数量的相关因素进行了研究,包括平板培养时间、菌株类型等。通过对比,最终确定不同的菌株类型产生的节孢子数量略有差异,但通过十天以上的培养通常可以获得106-108... 

【文章来源】：上海海洋大学上海市

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

β-胡萝卜素C19+C2+C19合成路线

上海海洋大学硕士学位论文13图1-2β-胡萝卜素C20+C20合成路线Fig1-2theC20+C20syntheticrouteofβ-Carotenoids3.2.4C15+C10+C15路线C15+C10+C15最初由巴斯夫公司于1956年报道，并在此基础上加以改进，实现了β-胡萝卜素的工业化生产，并沿用至今。该方法的起点为紫罗兰酮，通过与乙炔进行加成反应，得到乙烯基-β-紫罗兰酮，再和三苯基膦氢溴酸盐反应得到C15三苯基膦盐，最后经过维悌希反应得到β-胡萝卜素。该方法原料廉价，得率相对较高，副反应较少，但副产物回收率低，需要进一步改进才可用于工业生产。Roche公司解决了该流程副产物回收的问题，将该方法用于工业化生产[64]。图1-3β-胡萝卜素C15+C10+C15合成路线

上海海洋大学硕士学位论文13图1-2β-胡萝卜素C20+C20合成路线Fig1-2theC20+C20syntheticrouteofβ-Carotenoids3.2.4C15+C10+C15路线C15+C10+C15最初由巴斯夫公司于1956年报道，并在此基础上加以改进，实现了β-胡萝卜素的工业化生产，并沿用至今。该方法的起点为紫罗兰酮，通过与乙炔进行加成反应，得到乙烯基-β-紫罗兰酮，再和三苯基膦氢溴酸盐反应得到C15三苯基膦盐，最后经过维悌希反应得到β-胡萝卜素。该方法原料廉价，得率相对较高，副反应较少，但副产物回收率低，需要进一步改进才可用于工业生产。Roche公司解决了该流程副产物回收的问题，将该方法用于工业化生产[64]。图1-3β-胡萝卜素C15+C10+C15合成路线


本文编号：3339542