‘苹果梨’果实花青苷合成调控基因PyMYB的克隆与表达分析

发布时间：2024-04-10 03:09

　　’苹果梨’(Pyrus bretchneideri Rehd.’Pingguoli’)是延边地区特色的果品之一,是吉林省特产,同时也是北方寒温带地区的名贵果品之一。’苹果梨’不仅具有较强的抗寒性,而且果实较大,是能够着红色的优良梨品种。红梨的外观品质好,商品价值高,市场需求量大,因此选育优良的红梨品种是促进梨产业经济发展,同时也是梨树育种的重要方向;由于红梨品种稀少,选育优良的红梨品种成为梨树资源研究领域丞待解决的问题。近年来,国内外关于梨果皮着色机理有一定的研究突破,在’苹果梨’果皮着色机制中的相关结构基因已有深入的研究,但对其调控基因的研究报道较少。本试验以延边的’苹果梨’果皮作为材料,克隆其花青苷生物合成过程中的调控基因MYB10、MYB114,并测定套袋与不套袋果实着色期间果皮的花青苷含量变化,同时采用实时荧光定量PCR分析MYB10与MYB114的表达特性。主要研究结果如下:1本实验成功获得了’苹果梨’果皮花青苷合成过程中的相关调节基因PyMYB1 0a和PyMYB114全长cDNA序列。序列分析结果显示两基因cDNA全长分别为736 bp和744 bp。PyMYB10a的O...

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摘要
Abstract
缩略词（Abbreviation)
前言
1 材料与方法
    1.1 试验材料
        1.1.1 植物材料
        1.1.2 酶和生化试剂以及试剂盒
        1.1.3 试验仪器与设备
        1.1.4 溶液及培养基配制
    1.2 试验处理及方法
        1.2.1 套袋处理
        1.2.2 取样及处理
        1.2.3 花青苷的提取与测定
        1.2.4 ‘苹果梨’果皮PyMYB10a和PyMYB114全长cDNA的克隆
        1.2.5 生物信息学分析
        1.2.6 实时荧光定量PCR分析
2 结果与分析
    2.1 ‘苹果梨’果皮花青苷含量的测定
    2.2 ‘苹果梨’果皮PyMYB10a和PyMYB114全长cDNA的克隆及序列分析
        2.2.1 果皮总RNA的提取及检测
        2.2.2 PyMYB10a和PyMYB114的克隆
        2.2.3 PyMYB10a和PyMYB114全长cDNA序列分析
    2.3 ‘苹果梨'果实着色过程中花青苷合成相关PyMYB10a相PyMYB114的表达分析
        2.3.1 样品果皮总RNA的提取
        2.3.2 目的基因片段的常规PCR扩增与鉴定
        2.3.3 引物的扩增效率与标准曲线的制备
        2.3.4 PyMYB10a和PyMYB114的实时荧光定量PCR分析
3 讨论
4 结论
参考文献
致谢



本文编号：3950049