菠菜雄性Fosmid文库构建筛选及雌雄差异片段的染色体定位
发布时间:2024-11-03 11:10
菠菜(Spinach oleracea),苋科藜亚科菠菜属一年生或2年生草本植物,是广泛栽培的蔬菜作物。同时,菠菜也是重要的雌雄异株植物,其性别决定方式为XY型,具有一对同型的性染色体,基因组很小,约为989 Mbp,所以菠菜是研究雌雄异株植物性染色体起源与早期演化非常理想的材料。目前细胞学方面已经证明菠菜的1号染色体为性染色体并且已经成功得到分离。菠菜的转录组测序也已经完成,并且已经成功的获得了一些性别连锁相关的分子标记,但是关于菠菜的性别连锁区域尚未见报道,且菠菜的性别决定分子机制以及性染色体演化分子机制尚不清楚。本研究首先构建了菠菜雄性基因组Fosmid文库,利用文献报道以及新开发的菠菜雄性特异的分子标记,筛选获得Fosmid单克隆而后将其标记探针对菠菜中期染色体分裂相进行FISH定位。另外,本研究开发了一些雌雄差异的片段,并进行了测序、半定量分析以及染色体定位。研究结果如下:1.成功构建了菠菜雄性基因组Fosmid文库,并进行了库容量、覆盖率以及质量检测;2.成功的将菠菜雄性基因组Fosmid文库PCR筛选与荧光原位杂交技术相结合,建立了克隆菠菜雄性性别控制区的技术体系;3.成功...
【文章页数】:81 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
本文编号:4011175
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图1-1pCC2FOS载体示意图
图1-2Fosmid文库构建技术原理图Fig.1-2TheprinciplediagramofFosmidlibraryconstruction
图3-1菠菜雄叶DNA电泳检测图
图3-2Fosmid文库质量检测(1)
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