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苹果MdTFL1-2启动子序列变异特征及其对花芽生理分化期基因表达的影响

发布时间:2025-03-20 02:49
  苹果Md TFL1可抑制成花、推迟营养生长向生殖生长的转变,且前人研究表明不同苹果属资源成花特性与Md TFL1表达水平显著相关,但原因和相关调控机制有待解析。本研究以不同负载量‘长富2号’为材料(负载量高为大年树,负载量低为小年树),结合外源GA3处理,检测花芽生理分化期GAs含量和Md TFL1的表达模式,同时克隆不同成花特性苹果属资源Md TFL1-2启动子序列,分析其变异特征。本研究有助于解析不同苹果属资源Md TFL1-2的表达特征及其与成花能力的关系,对改善苹果成花特性和改良成花调控技术均具有重要的理论和实践意义。1. 以不同负载量的9年生‘长富2号’为材料,结合外源GA3处理,检测了花芽生理分化期短枝顶芽中内源GAs含量和Md TFL1的表达模式。结果发现,小年树花芽的长、宽、鲜重以及翌年成花率显著高于大年树,GA1+3、GA4+7含量显著低于大年树,Md TFL1-1、Md TFL1-2的表达水平均呈先上升后下降的趋势,且盛花期后70 d大年树中Md TFL1-2的表达量再次高于小年树...

【文章页数】:71 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 研究背景
    1.2 植物成花途径
    1.3 苹果花芽分化研究进展
        1.3.1 苹果花芽分化过程
        1.3.2 苹果花芽分化生理和分子研究进展
    1.4 TFL1研究进展
    1.5 研究目的与意义
第二章 不同负载量和GA3处理对花芽生理分化期Md TFL1-2 基因表达的影响
    2.1 试验材料
    2.2 试验方法
        2.2.1 树体生长发育指标、内源激素含量和成花率测定
        2.2.2 试验材料RNA提取、反转录和实时荧光定量分析
        2.2.3 数据处理及图表制作
    2.3 试验结果与分析
        2.3.1 不同果实负载量的‘长富2号’树体生长、内源激素含量和成花相关指标的统计
        2.3.2 不同果实负载量对Md TFL1-2、成花相关基因和GA合成代谢相关基因表达量的影响
        2.3.3 GA3处理对‘长富2号’树体生长、内源激素含量和成花相关指标的影响
        2.3.4 GA3 处理对Md TFL1-2、成花相关基因和GA合成代谢相关基因表达量的影响
    2.4 讨论
第三章 苹果属MdTFL1-2基因编码区和启动子序列变异特征分析
    3.1 材料
    3.2 试验方法
        3.2.1 不同苹果属资源DNA、RNA的提取、反转录和实时荧光定量分析
        3.2.2 不同苹果属资源MdTFL1-2编码区和启动子的克隆与序列分析
    3.3 试验结果
        3.3.1 不同苹果属资源MdTFL1-2基因编码区克隆及序列分析
        3.3.2 不同苹果属资源MdTFL1-2基因启动子区克隆及序列分析
    3.4 讨论
第四章 苹果属MdTFL1-2启动子序列变异对其表达水平的影响
    4.1 材料
    4.2 试验方法
        4.2.1 启动子活性分析
        4.2.2 不同变异类型的MdTFL1-2的表达分析
        4.2.3 拟南芥遗传株系的转化
        4.2.4 酵母单杂筛库
        4.2.5 转录因子的分离与验证
    4.3 试验结果
        4.3.1 启动子活性分析
        4.3.2 MdTFL1-2启动子变异类型对其表达水平的影响
        4.3.3 不同转基因拟南芥阳性株系的统计
        4.3.4 MdTFL1-2候选上游转录因子的筛选
        4.3.5 MdTFL1-2与候选上游转录因子的初步验证
    4.4 讨论
第五章 MdTFL1-2与互作蛋白的验证
    5.1 材料
    5.2 试验方法
        5.2.1 酵母双杂交试验
        5.2.2 双分子荧光互补试验
        5.2.3 亚细胞定位试验
        5.2.4 MdNAC090的表达特性分析
    5.3 结果与分析
        5.3.1 Md TFL1-2与Md NAC090、Md PP2C12和Md PATL6 蛋白互作的初步验证
        5.3.2 双分子荧光互补试验验证Md TFL1-2与Md NAC090 的蛋白互作
        5.3.3 MdNAC090的亚细胞定位分析
        5.3.4 MdNAC090的表达特性分析
    5.4 讨论
第六章 结论
参考文献
附录
致谢
个人简历



本文编号:4037264

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