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番茄病程相关蛋白NP24的功能研究

发布时间:2025-04-01 05:05
  植物病害问题是影响农作物产量和品质的一大难题。番茄作为世界上栽培最为普遍的果蔬之一,受病害影响也相当严重。传统防治措施如改善栽培措施对防治病害的能力是有限的。而化学防治带来环境污染问题,药物残留对人类健康也造成了潜在威胁。因此,通过转基因手段获得抗病能力强的番茄新品种,可以克服传统育种周期长,物种隔离等问题,为番茄选育及种质资源的优化开辟了新道路。NP24作为病程相关蛋白PR5家族中的一员,其生物学功能、植物抗病性分子机制、抗病防卫基因调控的研究较多,尤其是它们与植物抗病性的关系引起了强烈关注。因此对该基因的克隆和功能验证将对番茄选育具有重要价值。本研究中以野生型番茄为材料,克隆了NP24基因,分析了它的组织表达模式,并利用生物学软件分析及预测了它的生物学功能及进化关系。同时,构建了该基因的超表达载体和干扰载体,通过遗传转化分别获得了超表达和干扰的转基因株系。同时,首次体外真核表达纯化出有活性的NP24蛋白,进行了抑菌实验,验证了该蛋白对植物病原菌的抗性关系。本研究主要获得以下成果:(1)成功克隆NP24。NP24含有718个核苷酸的开放阅读框,编码247个氨基酸,属于PR5蛋白家族的类...

【文章页数】:66 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图2.1NP24全长片段的PCR扩增847bpFig2.1PCRAmplificationofNP24geneM:Trans2KMarker

图2.1NP24全长片段的PCR扩增847bpFig2.1PCRAmplificationofNP24geneM:Trans2KMarker

植株的鉴定均参考2.2RNA并反转录合成cD达量变化。分析长同样大小的T2超表境为:光照16h,黑暗晚温度设置在18±2℃。与野生型植株出现失水物信息学分析片段全长847bp,包含


图2.2NP24蛋白信号肽剪切位点预测结果

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硕士学位论文2NP24的克隆通过ORFFinder在线软件对NP24基因全长序列的开放阅读框有741个核苷酸并编码由247个氨基酸残基构成的蛋白。NP24蛋白理化性质ProtParam预测软件显示NP24是26kD分子量的蛋白,等电点,含有较....


图2.3蛋白跨膜结构预测

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图2.3蛋白跨膜结构预测Fig.2.3PredictionoftransmembranestructureofNP24P24进化树分析过NP24的蛋白序列进行比对找到与其同源的基因,通过ClustalXMEGA5.1NJ法建立系统进化树显示该基因与....


图2.4NP24系统进化树分析结果

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图2.3蛋白跨膜结构预测Fig.2.3PredictionoftransmembranestructureofNP242.3.2NP24进化树分析通过NP24的蛋白序列进行比对找到与其同源的基因,通过ClustalX比对序列,用MEGA5.1NJ....



本文编号:4038967

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