宽叶独行菜总黄酮的提取纯化及指纹图谱研究

发布时间：2020-04-15 16:33

【摘要】：宽叶独行菜中黄酮类化合物含量较高,黄酮类化合物具有多种生物活性。以传统提取方法提取宽叶独行菜黄酮粗提取物中其黄酮含量较低,严重影响其黄酮化合物的深层次的研究。本研究选取青海省地区的宽叶独行菜,对其中的黄酮类化合物进行提取、分离纯化,并对青海省不同地区的宽叶独行菜指纹图谱进行研究,以期为宽叶独行菜的开发与综合利用提供部分参考依据。实验结果如下:(1)使用超声波辅助提取法,以乙醇为提取溶剂,通过单因素试验和响应面试验考察乙醇浓度、液料比、提取温度和提取时间对提取含量的影响。优化后的提取工艺条件为:乙醇浓度75%,提取时间89 min,液料比22.5 mL/g,提取温度79℃时,宽叶独行菜总黄酮含量达最高36.5 mg/g。(2)通过比较D 301、D 201、D-101-1、X-5、AB-8五种型号大孔树脂的静态吸附、解析参数,部分动态吸附参数,最终确定AB-8大孔树脂较适合宽叶独行菜总黄酮的纯化。通过对宽叶独行菜总黄酮纯化静态单因素试验,确定供试液最适吸附浓度为4.34 mg/mL,最佳pH为6,最佳的洗脱浓度为70%乙醇,静态解吸平衡时间为2 h。通过对宽叶独行菜总黄酮纯化动态单因素试验,确定上样液70 mL浓度4.34 mg/mL的总黄酮原液为最佳上样量,选择洗脱体积为80 mL。在最佳提取纯化工艺条件下,宽叶独行菜总黄酮纯度可达到38.9%。(3)通过10批宽叶独行菜样本建立不同产地宽叶独行菜的HPLC指纹图谱,确认了12个共有峰,标定12号峰为芦丁,从相对峰面积、相似度等方面进行指纹图谱分析,10批宽叶独行菜HPLC指纹图谱共有色谱峰相似度大于0.90,具有较强的特征性和专属性。(4)对比青海省海东市平安区,海南州贵德县,海西州都兰县、柯柯镇、怀头他拉镇,5个不同地区宽叶独行菜挥发油中化学成分存在一定差异,但主要成分都以异硫氰酸酯类为主,其中尤以异硫氰酸烯丙酯含量最高。
【图文】：

标准曲线,芦丁,标准曲线,溶液

独行菜供试品溶液的制备独行菜样品粉碎，过 15 目筛，取 2 g 样品加入 100 mL 锥形瓶中0 mL 密封后超声提取 60 min，超声波辅助提取功率为 360 W，超曲线的绘制取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL 于 10 mL0%乙醇溶液至 6 mL，分别加入 5%亚硝酸钠溶液 0.3 mL，震荡摇加入 10%AgNO3 硝酸铝溶液 0.3 mL，摇匀后放置 6 min，加入 H 溶液，用 30%乙醇定容至 10 mL，摇匀后放置 15 min，从中吸入比色皿，检测芦丁标准液 510 nm 波长的吸光度，并以 0 mL 管芦丁标准液的不同浓度值，纵轴为不同浓度值对应的吸光度值，）。

总黄酮,分析因素,实验结果

宽叶独行菜总黄酮的提取纯化及指纹图谱研究结果与分析因素实验结果同乙醇浓度对宽叶独行菜总黄酮提取量的影响2-2 看出，当乙醇浓度在 30%-70%时，宽叶独行菜中总黄酮提而增大；当达到 80%-90%时，总黄酮提取量反而下降，，可能即宽叶独行菜的总黄酮在高浓度乙醇中不易溶解，进而导致量减少；因此 70%的乙醇浓度为提取宽叶独行菜中总黄酮的
【学位授予单位】：青海师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：O657.72;TQ28

【参考文献】