含磺胺取代嘌呤核苷类衍生物的设计合成和抗植物病毒活性及其作用机制研究

发布时间：2020-10-08 15:27

　　本论文以嘌呤核苷为母体结构引入磺胺结构单元,设计合成了25个含磺胺取代的嘌呤核苷类衍生物。并采用~1H NMR、~(13)C NMR、HRMS对目标化合物1-25结构进行了表征,并以黄瓜花叶病毒(CMV)与烟草花叶病毒(TMV)马铃薯Y病毒(PVY)为研究对象,采用半叶枯斑法对其进行活体抗植物病毒活性测试。并基于目标化合物抗TMV钝化活性初步探究其与TMV CP之间的相互作;基于对CMV的保护活性对目标化合物5进行了蛋白组学相关研究本论文的工作总结概括如下:1.设计合成了25个新型含磺胺取代的嘌呤核苷衍生物1-25,目标化合物的结构均通过相应的核磁共振氢谱(~1H NMR)、核磁共振碳谱(~(13)C NMR)和高分辨质谱(HRMS)结构表征。2.采用半叶枯斑法对合成的25个目标化合物进行抗PVY、CMV和TMV活性测试。结果表明:含磺胺取代的嘌呤核苷类衍生物对PVY、CMV和TMV具有较好的抑制效果。在对TMV钝化活性方面,化合物4(EC_(50)=67.30μg/mL)和5(EC_(50)=48.85μg/mL)表现出较好的钝化活性,分别优于宁南霉素(EC_(50)=84.78μg/mL)、病毒唑(EC_(50)=150.45μg/mL)和氨基寡糖(EC_(50)=521.30μg/mL)。在对CMV保护活性方面,其中化合物1(EC_(50)=363.79μg/mL)、2(EC_(50)=383.02μg/mL)和5(EC_(50)=237.55μg/mL)、对CMV的保护活性优于宁南霉素(EC_(50)=511.82μg/mL)病毒唑(EC_(50)=584.53μg/mL)和氨基寡糖(EC_(50)=550.80μg/mL)。3.基于目标化合物具有良好的抗TMV钝化活性。通过荧光光谱检测法和微量热涌动法探究部分目标化合物与TMV CP之间的相互作用,结果发现高活性化合物5与TMV CP之间具有较强亲和力。4.测定对CMV保护活性较好的化合物5对植株叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)等防御酶生物活性的影响发现其能增强防御酶活性,从而增强烟草的抗病性;采用质谱技术分析不同条件植株之间的差异蛋白表达,并利用各种生物信息学手段对差异表达蛋白质进行注释,分类和功能分析找出化合物调节植物生理生化的光合作用关键通路。
【学位单位】：贵州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：TQ450.1
【部分图文】：

化合物,荧光强度,荧光光谱仪,相互作用

物 5 与 TMV-CP 的相互作用。[46-48]采用荧光光谱仪器:HORIBA FluoroMax-4 进行实L 浓度的待测化合物 4、5、9 和对照药，然后采用 SECuffer 中：2.922 g (NaCl) + 0.5 mL β-Me + 50 mL 0.2 m P制成浓度为 16mmol/L。然后启动荧光光谱仪及计算机激发狭缝均为 5 nm，设置激发波长为 278 nm，发射此条件下测定蛋白样品与不同浓度化合物的相互作用果与分析谱法测定目标化合物在不同浓度下与 TMV CP 之间

线性关系,化合物,碰撞速率,猝灭常数

TMVCP 的淬灭方式（其中 Ksv为猝灭常数，Kq为猝散碰撞速率常数，τ0=10－8s，Cq为待测化合物的浓度）lg Cq方程式计算出化合物的结合常数(Ka)，化合物 l。如图 5-4 所示

荧光强度,宁南霉素,病毒唑

图 5-7 宁南霉素对 TMV CP 荧光强度的影响Figure 5-7 Ningnanmycin influence on fluorescence intensity of TMV

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