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产蛋白酶菌株的筛选及酶学性质的研究

发布时间:2021-03-26 20:13
  蛋白酶在食品、医药、洗涤、制革等行业有着广泛的应用。本论文从南昌大学食堂污水中分离筛选出一株产蛋白酶的野生菌CL-10,并进行菌种鉴定、发酵工艺优化、诱变、分离纯化、酶学性质的研究,结果如下:从南昌大学食堂污水样品中,通过菌株的富集、平板初筛和摇瓶复筛测定蛋白酶酶活,得到一株产蛋白酶酶活较高的菌株,命名为CL-10。通过形态学观察、扫描电镜、革兰氏染色、生理生化试验、分子生物学试验,并命名为解淀粉芽孢杆菌 CL-10(Bacillus amyloliquefaciens CL-10)。通过单因素试验和响应面优化培养基成分,探究出最佳发酵培养基条件为:菜籽粕含量6.1%、玉米粉含量4.4%、麸皮含量3.2%、ZnSO4·7H2O浓度为0.2%、吐温20浓度为0.7%;优化发酵条件为:培养温度37℃、初始pH 7.0、装液量50 mL、接种量4%、发酵时间54 h,相较于未优化前,在最优条件下,酶活从2715 U/mL 提高到 6648.4 U/mL。进行紫外—硫酸二乙酯复合诱变,紫外线的最佳诱变条件为功率15 W,照射距离30 cm,照射时间为150 s;硫酸二乙酯的最佳诱变条件为浓度0... 

【文章来源】:南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】:81 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

产蛋白酶菌株的筛选及酶学性质的研究


图2.2?L-赖氨酸标准曲线??Fig.2.2?L-lysine?standard?curve??

电泳图,菌株,电泳,产物


?第2章产蛋白酶菌株的筛选及鉴定???llOOObp??B750bp???;r^?!?B500bp??■lOObp??图2.4菌株CL-10的PCR产物电泳检测图??Figure?2.4?PCR?product?electrophoresis?detection?diagram?of?strain?CL-10??GAGCGGACAGATGGGAGCTTGCTCCCTGATGTTAGCGGCGGACGGGTGAG??TAACACGTGGGTAACCTGCCTGTAAGACTGGGATAACTCCGGGAAACCGG??GGCTAATACCGGATGCTTGTTTGAACCGCATGGTTCAGACATAAAAGGTGG??CTTCGGCTACCACTTACAGATGGACCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAG??GTAACGGCTCACCAAGGCGACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCG??GCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGT??AGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAG??TGATGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTGC??CGTTCAAATAGGGCGGCACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCT??AACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGG??AATTATTGGGCGTAAAGGGCTCGCAGGCGGTTTCTTAAG

碱基序列,菌株,碱基序列,蛋白酶


?第2章产蛋白酶菌株的筛选及鉴定???ACCGCGAGGTTAAGCCAATCCCACAAATCTGTTCTCAGTTCGGATCGCAGT??CTGCAACTCGACTGCGTGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAT??GCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCAC??GAGAGTTTGTAACACCCGAAGTCGGTGAGGT??图2.5菌株CL-10的16SrRNA的部分碱基序列图??Figure?2.5?Partial?base?sequence?of?16S?rRNA?of?strain?CL-10??CL-10??Badliys?amyioliquefadens?shain?MPA?1034?|?NR?117946.1??64???Badlfus?amyioliquefadens?strain?NBRG?15535?|?NR?041455.1??Bacillus?amytoiiquefadens?strain?NBRC?15535?i?NR?112685.1??66????Bacillus?amyioliquefadens?strain?BCRC?11601?|?NR?116022?1???Bacillus?nakamurai?strain?NRRL?B-41091?|?NR?151897.1??^?I?Stilus?valSsmortis?strain?DSM?11031?|?NR?024696.!??— ̄Bacilfus?valltsmorlisstrainNBRC?101236\?NR?113994.1??


本文编号:3102181

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