车前草在高尿酸血症方面的开发利用
发布时间:2021-11-05 14:41
目的:本研究主要目的是为了明确车前草在肠道中降尿酸的作用,进而研究其作用机制以及主要的有效成分,为医治高尿酸血症提供新的方向。研究方法:车前草的提取工艺及其优化:在85摄氏度的水浴条件下用10倍药材量的70%的乙醇水浴回流,1h/次,共回流2次,回流后用纱布过滤取滤液,将两次的滤液集中在一起;将滤液旋蒸成浸膏,用蒸馏水来溶解浸膏后配制成100mL的水溶液;对水溶液先用石油醚萃取,萃取两次,每次100mL,将两次萃取的石油醚溶液收集在一起后回收重复利用;再将水层溶液用乙酸乙酯萃取两次,每次100mL,收集两次萃取的乙酸乙酯层的溶液,水层溶液再用正丁醇萃取两次,每次100mL,收集两次萃取的正丁醇层的溶液,分别将正丁醇层以及乙酸乙酯层的溶液旋蒸成浸膏,再用甲醇溶液溶解后水浴挥干,烘干。对其提取时间、溶剂浓度、溶剂用量以及提取次数进行条件优化然后正交实验出最佳提取工艺。构建高尿酸血症的细胞模型:本实验先用不同浓度的酒精去刺激IEC-6细胞,再用液相检测细胞上清液中尿酸的含量,筛选出最佳的造模浓度和孵育时间以达到最佳的造模条件。车前草的药效及其作用机制的研究:将车前草按照优化后的提取工艺提取分...
【文章来源】:华侨大学福建省
【文章页数】:79 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
黄酮及其苷类化合物的结构式
第2章车前草的提娶分离以及工艺的优化192.2.2.2供试品溶液的制备分别将乙酸乙酯层以及正丁醇层提取好的样品用1ml的甲醇溶解,再将其置于10ml容量瓶中,加甲醇约8ml,超声使其溶解,并用甲醇定容至刻度,做为供试品溶液。2.2.2.3对照品溶液的制备用百万分之一的电子天平称取芦丁标准品1.0mg,放入10ml的容量瓶中,加入甲醇溶液8ml,超声使其溶解,并用甲醇定容至刻度线,作为芦丁贮备液。2.2.2.4线性关系考察芦丁:用百万分之一的电子天平精确的称量芦丁标准品5mg,放入50ml容量瓶中,先向其加入甲醇约40ml,超声使其溶解,并用甲醇定容至刻度,做为芦丁储备液。精密吸取0.5、1、2、4、6、8、10ml芦丁储备液至10ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得浓度分别为5、10、20、40、60、80、100μg/ml的芦丁溶液。按色谱条件,进样10μl,以芦丁溶液的浓度为横坐标(μg/ml),峰面积为纵坐标绘制标准曲线,其回归方程为:y=19.163x-14.896,R2=0.9992。表明芦丁对照品在5-100ug/mL的范围内浓度与峰面积具有良好的线性关系。图2.1HPLC检测芦丁对照品的标准曲线2.2.2.5精密度实验取浓度为100μg/ml的芦丁溶液,按2.2.2.1的色谱条件,连续进样5次,
华侨大学硕士学位论文222.3实验结果与分析2.3.1单因素试验结果分析2.3.1.1单因素考察提取时间对车前草提取工艺的影响在85℃的水浴条件下,10倍药材量的70%的乙醇回流提取两次,其它因素不变,分别按照表2.3中的提取时间水平进行试验,试验结果如图2.2所示。由图2.2可知,在乙酸乙酯层以及正丁醇层中可以看出,在随着提取时间的增加芦丁的提取量出现先增加后下降的趋势,可以看出在每次的提取时间为120min时,其芦丁的提取量达到最值,效果最好,所以正交设计时以提取时间为2h每次作为中心值。图2.2提取时间对车前草提取工艺的影响2.3.1.2单因素考察提取次数对车前草提取工艺的影响选在85℃的水浴条件下,10倍药材量的70%的乙醇回流提取,每次提取时间为2h,其它因素不变,分别按照表2.3中的提取次数水平进行试验,试验结果如图2.3所示。从图2.3中可以看出在乙酸乙酯层中芦丁的提取量在提取2次时达到最值,而正丁醇层出现一直上升的趋势,但是可以发现提取,两次与提取三次的芦丁含量差别并不是很大,如果从工艺的角度上看提取两次的效果最佳。所以正交设计时以提取次数为2次为中心值。
本文编号:3477992
【文章来源】:华侨大学福建省
【文章页数】:79 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
黄酮及其苷类化合物的结构式
第2章车前草的提娶分离以及工艺的优化192.2.2.2供试品溶液的制备分别将乙酸乙酯层以及正丁醇层提取好的样品用1ml的甲醇溶解,再将其置于10ml容量瓶中,加甲醇约8ml,超声使其溶解,并用甲醇定容至刻度,做为供试品溶液。2.2.2.3对照品溶液的制备用百万分之一的电子天平称取芦丁标准品1.0mg,放入10ml的容量瓶中,加入甲醇溶液8ml,超声使其溶解,并用甲醇定容至刻度线,作为芦丁贮备液。2.2.2.4线性关系考察芦丁:用百万分之一的电子天平精确的称量芦丁标准品5mg,放入50ml容量瓶中,先向其加入甲醇约40ml,超声使其溶解,并用甲醇定容至刻度,做为芦丁储备液。精密吸取0.5、1、2、4、6、8、10ml芦丁储备液至10ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得浓度分别为5、10、20、40、60、80、100μg/ml的芦丁溶液。按色谱条件,进样10μl,以芦丁溶液的浓度为横坐标(μg/ml),峰面积为纵坐标绘制标准曲线,其回归方程为:y=19.163x-14.896,R2=0.9992。表明芦丁对照品在5-100ug/mL的范围内浓度与峰面积具有良好的线性关系。图2.1HPLC检测芦丁对照品的标准曲线2.2.2.5精密度实验取浓度为100μg/ml的芦丁溶液,按2.2.2.1的色谱条件,连续进样5次,
华侨大学硕士学位论文222.3实验结果与分析2.3.1单因素试验结果分析2.3.1.1单因素考察提取时间对车前草提取工艺的影响在85℃的水浴条件下,10倍药材量的70%的乙醇回流提取两次,其它因素不变,分别按照表2.3中的提取时间水平进行试验,试验结果如图2.2所示。由图2.2可知,在乙酸乙酯层以及正丁醇层中可以看出,在随着提取时间的增加芦丁的提取量出现先增加后下降的趋势,可以看出在每次的提取时间为120min时,其芦丁的提取量达到最值,效果最好,所以正交设计时以提取时间为2h每次作为中心值。图2.2提取时间对车前草提取工艺的影响2.3.1.2单因素考察提取次数对车前草提取工艺的影响选在85℃的水浴条件下,10倍药材量的70%的乙醇回流提取,每次提取时间为2h,其它因素不变,分别按照表2.3中的提取次数水平进行试验,试验结果如图2.3所示。从图2.3中可以看出在乙酸乙酯层中芦丁的提取量在提取2次时达到最值,而正丁醇层出现一直上升的趋势,但是可以发现提取,两次与提取三次的芦丁含量差别并不是很大,如果从工艺的角度上看提取两次的效果最佳。所以正交设计时以提取次数为2次为中心值。
本文编号:3477992
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