大肠杆菌L-色氨酸生产菌株基因工程改造及代谢调控研究

发布时间：2024-11-03 14:06

　　L-色氨酸（L-tryptophan,L-Trp）是人类和动物体内需要的必需氨基酸之一,广泛应用于食品添加剂、饲料以及医药等行业。利用微生物进行发酵来生产L-Trp的方法鉴于其操作过程简单、原材料廉价、终产物L-Trp易提取纯化等诸多优点而越来越受到青睐。近些年来,国外研究者采用化学诱变结合基因工程的手段,逐步选育出大量的具有较高L-Trp生产能力的工程菌株,但其在发酵生产过程中仍然存在一些问题,比如副产物积累,产物得率低等,这限制了L-Trp工业化生产水平的进一步提高。本论文在实验室前期工作的基础之上,以已构建的色氨酸生产菌株E.coli FB-04为出发菌株,通过进一步的基因操作进行该菌株的改造。此外,通过代谢组学的研究方法对菌体胞内物质进行主成分分析,探究基因工程改造对胞内物质主成分的影响,进而分析由基因工程改造所引起的L-Trp合成过程中代谢流的变化,为菌株的进一步优化与改良提供理论依据。主要的研究内容及结果如下:（1）以L-色氨酸生产菌株E.coli FB-04为出发菌株,采用Red同源重组技术分别对全局调控蛋白FruR、Crp、FlhD及TyrR编码基因fruR,flhD,c...

【文章页数】：118 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

即D,L-α-氨基-β-吲哚基丙酸见图1-1，相对分子质量为204.2，其中左旋光体即L-Trp，具有生末，无味，熔点为289℃，常温下，在碱性溶液中比较稳定[1]。

江南大学博士学位论文4图1-2大肠杆菌中L-Trp的合成途径及反馈调控Fig.1-2Metabolicpathwaysandfeedback-regulationforbiosynthesisofL-TrpinE.coli1.3.2微生物合成L-色氨....

[54]。图1-3大肠杆菌乙酸的合成途径Fig.1-3AcetatebiosynthesispathwayinE.coli

图2-1Red重组系统进行基因敲除的框架图Fig.2-1SchematicdiagramofRedrecombinationmethodforgenedeletion2-1的方法，利用Red重组系统分别进行大肠杆菌crp、fruR、单敲除....

本文编号：4011393