【摘要】：研究目的:人体红细胞极易受到氧自由基的攻击而出现氧化损伤以及能量代谢功能发生紊乱,进而影响红细胞的寿命加速其衰老。蔓越莓果汁是一种含有多酚、花色苷等多种具有抗氧化生物活性的越橘类水果,本文将采用蔓越莓果汁进行人群服用干预试验,观察其对人体红细胞衰老及能量代谢、氧化应激水平的影响,初步探讨蔓越莓果汁改善红细胞衰老的作用机制,以及红细胞衰老与氧化应激间的关系,为深入了解越橘类水果的食用价值及应用提供参考。研究方法:本研究采用随机双盲对照的研究方法,严格按照纳入和排出标准筛选研究对象,年龄为18~65岁,共纳入研究对象202名,其中男性111名,女性91名。根据随机数字表将研究对象分为蔓越莓高剂量组(27%浓度,2瓶/480ml)73名,中剂量组(1瓶27%蔓越莓果汁+1瓶安慰剂,2瓶/480ml)69名,安慰剂组(2瓶安慰剂,2瓶/480ml)60名,进行为期28天的双盲干预。干预前和干预28天分别进行体格检查,包括身高、体重、血压、腰臀围等;血常规、血生化检查等;留取空腹静脉血10ml,分离血浆和红细胞,再将新鲜红细胞采用密度梯度分离的方法分别获得青龄、中龄和老龄红细胞,并由此计算红细胞衰老率;将血浆和剩余红细胞在-80℃冰箱冻存,待红细胞能量代谢及氧化应激指标的检测,其中包括血浆总抗氧化能力(T-AOC)、血浆8-异前列腺素(8-iso-PG)、红细胞丙二醛(MDA)、Na~+-K~+-ATP酶、超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、丙酮酸激酶(PK)等。采用单因素方差分析、配对t检验、卡方检验、多元线性回归分析等统计学方法,分析蔓越莓果汁对人体红细胞衰老、能量代谢及氧化应激水平的影响以及红细胞衰老与能量代谢、氧化应激指标间相关性。结果:本研究202名研究对象均按照要求完成了干预研究,红细胞衰老率分析结果显示,干预前红细胞衰老率为12.83%,经28天蔓越莓果汁干预后显著降低为11.04%(P0.05);其中,高剂量组干预前红细胞衰老率为12.90%,经干预28天后红细胞衰老率为10.34%,降低了2.56%(P0.05),而中剂量组干预前红细胞衰老率为12.78%,干预后降低了1.7%(P0.05)。不同性别分层分析显示,干预前男性红细胞衰老率为13.39%,显著高于女性(11.98%),经28天干预后高剂量组和中剂量组红细胞衰老率均显著性降低(P均0.05)。年龄分组结果显示,中年组和老年组红细胞衰老率均显著高于青年组,其中青年组、中年组和老年组红细胞衰老率分别为11.25%、13.09%、13.94%(P0.05),且蔓越莓果汁对中年组和老年组人群红细胞衰老改善效果好于青年组人群。机体抗氧化功能分析结果显示,经28天蔓越莓果汁干预后,高剂量组和中剂量组血浆总抗氧化水平均较干预前分别升高了1.29IU/ml和0.63IU/ml(P均0.05);而高剂量组、中剂量组和安慰剂组三组人群血浆8-异前列腺素平均含量较干预前分别降低了33.26 pg/ml、32.89 pg/ml和29.23pg/ml(P均0.05)。红细胞能量代谢分析结果显示,高剂量组和中剂量组Na~+-K~+-ATP酶活性经蔓越莓果汁干预28天后,较干预前分别升高了0.31 U/gHb和0.36U/gHb(P均0.05);而高剂量组、中剂量组和安慰剂组三组人群红细胞丙酮酸激酶(PK)活性较干预前均显著性升高,分别升高了0.03U/gHb、0.01U/gHb、0.03U/gHb(P均0.05)。机体氧化应激水平变化分析显示,高剂量组和中剂量组红细胞超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均显著性升高,丙二醛(MDA)含量显著性降低;T-SOD在高剂量组和中剂量组分别升高了6.92U/mgprot、7.2 U/mgprot;CAT分别升高了1.35U/mgprot、1.14U/mgprot(P均0.05);MDA分别降低了7.39nmol/mg和6.22 nmol/mg,但红细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)三组间干预前后均未发现有统计学差异(P均0.05)。多元线性回归分析发现,红细胞衰老率与8-异前列腺素呈正相关(r=0.223,P=0.000),青年组红细胞衰老率与T-SOD呈正相关(r=0.289,P=0.039),中年组红细胞衰老率与T-SOD呈负相关(r=-0.176,P=0.036)。结论:蔓越莓果汁有效地改善机体抗氧化能力和能量代谢水平,显著降低了人体红细胞衰老率,可能与果汁中含量丰富的多种抗氧化生物活性物的综合作用有关,但其剂量反应关系及其可能的作用机制尚需进一步深入研究。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TS201.4
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2690661
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