富含咖啡酸衍生物的紫锥菊榨汁液研制

发布时间：2020-06-11 09:28

【摘要】：新鲜紫锥菊富含丰富的咖啡酸衍生物(Caffeic acid derivatives,CADs),但紫锥菊中的多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO)易把CADs降解掉,降低其增强免疫力功效。本论文通过对紫锥菊不同部位PPO酶学性质研究,确定各部位适宜的钝酶方法以最大限度保留CADs,并研发出富含CADs的紫锥菊保健汁。具体研究结果如下:(1)传统热处理均可钝化紫锥菊鲜花中PPO,同时CADs保留量得以提高;采用相同的高温蒸汽处理紫锥菊根、茎、叶、花,其CADs保留量并不相同。以紫锥菊鲜花为例,采用传统的热处理方式(漂烫、高温蒸汽、中温干燥)对其PPO钝化处理后,紫锥菊花中绿原酸和菊苣酸保留量与未钝化处理相比均有明显增加,以高温蒸汽处理的CADs保留效果最突出。留茬期鲜花经过100℃高温蒸汽处理15 min后,PPO活力降低至12.74%,绿原酸和菊苣酸含量与未钝化处理者分别提高7.85、46.29倍。采用高温蒸汽(100℃,15 min)处理紫锥菊根、茎、叶、花四个部位,其绿原酸、菊苣酸含量较未钝化处理均有所增加(1.84-2.75倍),但呈现出区域特征,推测其与不同部位PPO酶构型或性质不同有关。(2)紫锥菊花、叶、根部位PPO酶学性质存在差异,鲜花宜采用高温蒸汽方式钝酶,紫锥菊叶采用柠檬酸协同高温蒸汽处理钝酶效果较优。紫锥菊花、叶、根中PPO粗酶,在100℃下放置,随着时间的延长,PPO活力逐步降低;紫锥菊花、根中pH反应出现多个不同的最适区间;紫锥菊叶中粗酶液最适PPO反应在pH为7.5时最高,但在酸性条件下PPO表现较低的活力。根据PPO酶学性质差异,分别选择高温蒸汽钝酶处理或有机酸协同高温蒸汽处理,结果表明,紫锥菊花采用高温蒸汽处理25 min时PPO相对酶活力可降至6.82%,此时总CADs含量最高为6.96 mg/g,是未经处理的2.61倍;紫锥菊叶采用pH 3.5的柠檬酸溶液协同高温蒸汽处理15 min时PPO相对酶活力可降至10.94%,此时总CADs含量保留量为6.65 mg/g,是未经处理的2.26倍。(3)制备出富含CADs的紫锥菊保健汁。富含CADs的紫锥菊花汁、叶汁制备方法为:花经高温蒸汽处理25 min后加水榨汁,250 W超声处理5 min,离心去除滤渣,巴氏杀菌后装袋。CADs溶出量为1.10 mg/mL,溶出率为78.01%;叶经高温蒸汽处理15 min后,加pH为3.5的柠檬酸溶液榨汁,300 W超声处理5 min,离心去除滤渣,巴氏杀菌后装袋。CADs溶出量为0.92 mg/mL,溶出率为69.70%。(4)紫锥菊汁对小鼠迟发型变态反应有显著性影响,可提高小鼠的免疫功能。以小鼠迟发型变态反应为例验证紫锥菊汁的免疫增强作用,其中,高剂量组叶汁(给药量6.25 mg/kg)、高剂量组花汁(给药量6.25 mg/kg)对DTH的免疫刺激作用优于阳性对照组(p0.05),其小鼠耳差分别为(13.97±2.02)mg和(14.85±1.97)mg,比阳性组(7.19±2.15)mg分别增加94.30%和106.54%。
【图文】：

对比图,紫锥菊,菊苣酸,绿原酸

合肥工业大学硕士学位论文绿原酸和菊苣酸有较好地分离，绿原酸保留时间 3.6 min，菊苣酸保留时间 11.6min。定量检测标准曲线：绿原酸 Y=15914 x +194.39 R2=0.9911，线性范围 0.005-0.100 mg/mL；菊苣酸 Y=23967 x + 199.12 R2=0.9972，线性范围 0.005-0.100mg/mL。

紫锥菊,蒸汽处理,酶活力,漂烫

图 2.8 紫锥菊花不同处理方法的 HPLC 图Fig 2.8 HPLC diagrams of different treatment methods for Echinacea flowers注：1：绿原酸 2：菊苣酸2.3.3.2 不同热处理方式对紫锥菊花中 PPO 酶活力的影响不同热处理方式处理留茬期鲜花对 PPO 酶活力的影响结果列于表 2.5，由表2.5 可知，经不同高温方式处理后，检测酶活力结果发现，随着蒸汽处理时间的增加，酶活力呈降低趋势，其中蒸汽处理 15min 后，相对酶活力为 12.74%。蒸汽处理 10 min 与漂烫处理 10 min 相比，蒸汽处理后酶活力低于漂烫处理（15.83 U/mLvs 22.5 U/mL），同时，蒸汽处理后 CADs 含量高于漂烫处理（4.06 mg/g vs 3.63 mg/g），由此可知，蒸汽与漂烫处理相同时间，蒸汽处理能更好的降低 PPO 活力，增加有效成分含量的保留。蒸汽处理 15 min 后，再进行干燥处理，酶活力为 7.5 U/mL，酶活力低于其他热处理方式。虽然酶活力低，但是 CADs 含量与只经过蒸汽处理15 min 相比，含量出现降低（3.73 mg/g vs 4.26 mg/g）与得到的酶活力降低，CADs含量增加结果不同，因此，，推测再经过干燥处理虽能降低酶活力但不能使 CADs
【学位授予单位】：合肥工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TS275.4

【参考文献】