灵芝子实体多糖的提取及复合冲调粉的研制

发布时间：2020-06-23 03:58

【摘要】：灵芝(Ganoderma lucidum)是担子菌门伞菌纲多孔菌目灵芝科灵芝属真菌,研究发现灵芝子实体、孢子粉都具有调节免疫、抗肿瘤、保肝解毒、降三高等功效。常见的灵芝产品大多为灵芝孢子粉及其加工品,而产量较大的灵芝子实体却难以被充分利用,造成灵芝资源的浪费。本课题以山东省内的灵芝子实体和破壁孢子粉为研究对象,对其进行了基本理化性质的测定,通过各种参数比较确定合适的灵芝原料。然后,采用热水浸提法提取灵芝子实体的多糖,通过DEAE-52纤维素柱及葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱进行分离纯化。将纯化获得的三种多糖进行了分子量大小、单糖组成以及红外光谱的测定。然后将灵芝子实体多糖粗提物进行喷雾干燥,通过单因素实验来确定灵芝多糖粗提物的喷雾干燥工艺,并制备了灵芝多糖粗提粉。将粗提粉与孢子粉按照“全灵芝”的概念进行复配,制备了复合冲调粉,并对其进行了理化特性测定。主要研究结果如下:(1)采集了两种灵芝子实体样品(GL-F1~F2)和六种灵芝孢子粉样品(GL-S1~S6)。经测定,不同来源的灵芝子实体和孢子粉之间含水率差异显著,而含油率无显著差异。孢子粉含油率约为子实体的10倍。孢子粉总糖、多糖含量高于子实体,子实体还原糖含量高于孢子粉。其中孢子粉中GL-S4多糖含量最高,子实体中GL-F1多糖含量最高。孢子粉中未检出灵芝酸a、b,而灵芝子实体中检出了灵芝酸a、b。子实体GL-F1灵芝酸a、b含量最高。6种灵芝孢子粉中镉、铅、砷重金属含量均低于GB16740-2014和GB2762-2012中的含量限值。经粒径分布分析得出孢子粉GL-S4的D_([4,3])和D_(50)相差值最小,说明其粉的一致性好,即粒度分布均匀,使用性能好。孢子粉的扫描电镜观察结果表明碾压式破壁方式较撞击式破壁方式破壁更完全,其中孢子粉GL-S4为碾压式破壁,其破壁效果最好。综合分析,选出孢子粉GL-S4及子实体GL-F1用于下步研究。(2)采用热水浸提法提取灵芝子实体GL-F1粗多糖,得率为1.32%。将GL-F1粗多糖通过DEAE-52纤维素阴离子交换柱进行分离纯化,得到3种多糖组分,分别是GP-1、GP-2、GP-3。其中,GP-1是中性多糖,而GP-2、GP-3是酸性多糖。将分离得到的三种多糖组分过Sephadex G-100柱子,得到三种对应单一多糖。(3)通过高效凝胶色谱法测定三种多糖的分子量。GP-1分子量为3.215×10~4Da,GP-2和GP-3的平均分子量分别为4.483×10~4Da和1.146×10~5Da。采用柱前衍生化高效液相色谱法测定灵芝多糖的单糖组成,测得GP-1的单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖和木糖,摩尔比为12.66:2.01:41.73:43.60。GP-2的单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖,摩尔比为16.65:0.65:55.44:10.55:16.72。GP-3的单糖组成为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖,摩尔比为2.37:0.88:1.12:78.96:11.45:5.22。三种组分的红外光谱分析结果显示GP-1,GP-2和GP-3均具有多糖的特征链带,基于数据推断,GP-1,GP-2和GP-3均为以吡喃糖为主链的多糖。(4)通过单因素实验得到灵芝子实体多糖粗提粉的喷雾干燥最佳工艺参数,即麦芽糊精的适宜添加量为10%,进风温度为170℃,空气流量700L/h,进料量10mL/min。(5)结合“全灵芝”灵芝冲调粉的理念,将子实体多糖提取物和孢子粉进行复配(每10g孢子粉中加入由40g子实体中提取的粗提物),制成复合冲调粉。为解决复合冲调粉的溶解性和氧化性问题,在冲调剂中添加1%乳清蛋白和0.02%的TBHQ。对复合冲调粉进行理化特性的测定,结果显示产品的复水性、分散性、稳定性、溶解性等理化特性较好。
【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TS218
【图文】：

曲线,总糖,曲线,蒸馏水

图 2-1 总糖的标准曲线Fig. 2-1 Standard Curve of Total Sugar定液制备品 0.500g，置于 50mL 离心管中，沸水浴提取 2h，冷却至室上清液即测定液。定品上清各 2mL 于玻璃试管中，空白对照为 2mL 蒸馏水，分迅速加入 5mL 的浓硫酸，迅速震荡摇匀，沸水浴 15min0nm 检测。原糖的测定线的制定葡萄糖标准液（1mg/mL）0、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.用蒸馏水补足至 1.0mL，分别准备加入 DNS 试剂 2mL，

曲线,还原糖,曲线,试管

图 2-2 还原糖的标准曲线Fig. 2-2 Standard curve of reducing sugar清各 2mL，分别加入 2mL DNS 试剂，于 25mL 具塞试管，迅速震荡摇匀，沸水浴 5min，冷水冷却至室温，定容0nm 检测。测定70-2008 食用菌中粗多糖含量的测定。的制定的制定同总糖标准曲线的制定。液制备品 1.000g，置于 50mL 具塞试管中，分别加入 5mL 水浸润醇，使用旋涡振荡器振荡，使溶液混合均匀，放入超声波

【参考文献】