灵芝孢子总三萜酸提取工艺研究及其抗动脉粥样硬化作用和机制探索

发布时间：2021-02-21 04:59

　　目的:本文首先研究了灵芝孢子粉总三萜酸的最佳超声提取工艺,在此基础上探索了总三萜酸提取物对高脂饮食诱导的高脂血症家兔的调脂与抗动脉粥样硬化作用及其作用机制。方法:1.提取工艺研究:采用正交实验的方法研究了提取时间、料液比和乙醇浓度3个条件对总三萜酸提取率的影响,并确定了最优提取工艺。2.总三萜酸提取物药效学研究:实验动物日本大耳兔分为高、中、低三个剂量组、阳性对照组（阿托伐他汀）、高脂模型组和正常组。除正常组动物给予普通饲料外,其余各组给予高脂饲料喂养,并于第4周末静脉注射牛血清白蛋白形成动脉粥样硬化模型。各组动物分别于实验开始前及实验开始后的预设检测时间点采血,分别测定血清甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）的水平以及血清转氨酶谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（as... 

【文章来源】：西华大学四川省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 灵芝概述
        1.1.1 灵芝及灵芝孢子介绍
        1.1.2 灵芝三萜及其活性介绍
    1.2 动脉粥样硬化概述
        1.2.1 动脉粥样硬化疾病介绍
        1.2.2 动脉粥样硬化的治疗
    1.3 本文的研究目的与意义
    1.4 本文研究内容及技术路线
        1.4.1 研究内容
        1.4.2 技术路线
2 灵芝孢子三萜酸提取工艺研究
    2.1 材料与仪器
        2.1.1 材料与试剂
        2.1.2 主要仪器
    2.2 齐墩果酸标准曲线的绘制
    2.3 单因素实验
        2.3.1 提取时间
        2.3.2 料液比
        2.3.3 乙醇浓度
    2.4 正交试验
        2.4.1 正交实验设计
        2.4.2 正交实验结果
    2.5 灵芝总三萜制备
3 动物实验
    3.1 材料与仪器
        3.1.1 动物
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要仪器与设备
    3.2 实验方法
        3.2.1 动物造模与实验
        3.2.2 血脂检查
        3.2.3 组织脂质检查
        3.2.4 粪便胆汁酸测定
        3.2.5 血清转氨酶和肌酸激酶测定
        3.2.6 组织病理学检查
        3.2.7 数据分析
    3.3 实验结果
        3.3.1 EEG改善血清脂质水平
        3.3.2 EEG改善组织脂质水平
        3.3.3 EEG对粪便胆汁酸含量影响
        3.3.4 EEG改善血清转氨酶和肌酸激酶水平
        3.3.5 EEG对动脉斑块与组织病理学作用
    3.4 讨论
4 体外实验
    4.1 材料与仪器
        4.1.1 实验试剂
        4.1.2 实验仪器与设备
    4.2 实验方法
        4.2.1 细胞培养及活力测定
        4.2.2 泡沫细胞形成
        4.2.3 siRNA转染巨噬细胞
        4.2.4 测定肝脏中CYP7A1活性和表达
        4.2.5 Western Blotting测定组织及细胞中相关蛋白表达
        4.2.6 数据分析
    4.3 实验结果
        4.3.1 CYP7A1活性和表达
        4.3.2 EEG对泡沫细胞形成的影响
        4.3.3 Western blotting
    4.4 讨论
5.结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表论文及科研成果
致谢



本文编号：3043873