白酒杂醇油高效酯化酶的筛选及分子改造

发布时间：2021-04-05 05:57

　　高含量的杂醇油是影响白酒品质的主要因素之一,降低白酒中杂醇油的含量是白酒生产的技术瓶颈。筛选产杂醇油酯化酶菌株,表达和改造酯化酶,构建高效酯化杂醇油的酯化酶。酯化酶酯化杂醇油成酯,是降低酒体中杂醇油含量的有效途径之一,具有较大的应用潜力。筛选出产杂醇油酯化酶菌株,ITS rDNA序列比对鉴定为近平滑假丝酵母（Candida parapsilosis）。在杂醇油含量为6%（v/v）（正丙醇、异丁醇、异戊醇各2%）,乙酸含量2%（v/v）,粗酶液30℃酯化1 d,酯化合成乙酸正丙酯15.4661 mg/100mL,乙酸异丁酯8.7562 mg/100mL,乙酸异戊酯3.0515 mg/100mL。近平滑假丝酵母酯化酶基因Lipase1在Pichia pastoris GS11表达,酯化酶基因Lipase2在Escherichia coli BL21中表达。Pichia pastoris GS11表达酯化酶1 d酯化形成乙酸正丙酯8.6824 mg/100mL,乙酸异丁酯0.4371 mg/100mL,乙酸异戊酯0.2021 mg/100mL。Escherichia coli BL21表达的... 

【文章来源】：湖北工业大学湖北省

【文章页数】：99 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

典型的α/β水解酶的结构特征

北 工 业 大 学 硕 士 学 位 论 文在 300 左右。脂肪酶结构属于典型的 α/β 水解酶折ly（在少数情况下，甘氨酸被其他小的残基取代含有亲核催化三联体 Ser-His-Asp 或 Ser-His-Glu。段仅一螺旋结构覆盖在左上方，形成类似“盖子”状结构打开，才表现催化活性，这也与脂肪酶的

图 1.5 毕赤酵母（真核生物）表达载体 pPICZαA,B,C.5 Pichia pastoris (Eukaryote) expression vector pPICZαA表达系统是大肠杆菌克隆表达重组蛋白的功能的最强隆到 pET 载体上时，宿主菌株受 T7 强转录及翻译信号的 T7 RNA 聚合酶诱导。当充分诱导时，几乎所有的白。pET 载体上的筛选标记一般有两种：Amp（氨苄青。本实验中所用原核表达载体为 pET-28a(+)（图 1.6）

【参考文献】：
期刊论文
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[3]脂肪酶催化吉法酯的合成研究[J]. 王涛,熊峰,赵澜宁,卢晓霞.  化学研究与应用. 2018(05)
[4]海洋拟无枝酸菌酯化酶酯化杂醇油产风味酯[J]. 曾徐浩,徐健,薛栋升.  酿酒. 2018(02)
[5]顶空-气相色谱法测定环境水样中14种挥发性卤代烃[J]. 刘蓉,张永江,邓茂,宋卫华,黄晓容.  西南师范大学学报(自然科学版). 2018(03)
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[10]一株脂肪酶产生菌的筛选鉴定及其酶学性质研究[J]. 徐伟芳,黄涛杨,周敏,方翔,王飞,刘凤丹,谢洁.  西南大学学报(自然科学版). 2017(05)

博士论文
[1]具有手性选择性酯酶/脂肪酶的筛选、催化特点及应用研究[D]. 王博.浙江大学 2011

硕士论文
[1]低温脂肪酶生产菌筛选、基因克隆及其在大肠杆菌中的表达[D]. 刘元利.兰州理工大学 2016
[2]南极大磷虾脂肪酶提取纯化及其酶学性质研究[D]. 尚宪明.中国海洋大学 2014
[3]RML脂肪酶基因在毕赤酵母中的高效表达与发酵优化[D]. 张宇.华南理工大学 2011



本文编号：3119269