适配体结合量子点技术同步检测金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌O157：H7的方法研究
发布时间：2021-05-20 16:03
据我国疾病爆发监测和数据报告表明,在2009年至2019年期间由食源性致病菌引发的食源性疾病多达3170起。处于致病率首位的便是金黄色葡萄球菌,虽致死率不高,却几乎能污染所有的食物,尤其是肉类制品,从而引起机体严重的肠毒性疾病。其次造成重大危害的菌是大肠埃希氏菌O157:H7,由大肠埃希氏菌O157:H7引发的疾病,每年可导致近6亿人次患病,是致使我国居民腹泻的主要粪源性疾病,严重危害人们的身体健康,同时这两种菌还易在食品加工生产、储存运输环节中造成污染,存在着巨大的隐患。因此开展同步检测两种食源性致病菌的方法学研究对未来食品安全的保障具有重大意义。本研究基于适配体结合量子点技术,建立一种同时针对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌O157:H7两种食源性致病菌的快速高效、灵敏的检测方法。1. 利用荧光检测技术对4条同一菌种的适配体与其目标菌结合的亲和力进行分析,根据荧光光谱数据等计算解离常数,对应选取解离常数最小的一条适配体序列;对选中的两条适配体序列进行特异性检验。结合表面增强拉曼光谱技术确定适配体与其目标结合物具有较高的特异性,并且在重复性实验中结果良好。成功筛选出与目标菌结合、亲和力较...
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 文献综述
1 大肠埃希氏菌O157:H7
1.1 大肠埃希氏菌O157:H7特点及危害
1.2 大肠埃希氏菌O157:H7研究现状
2 金黄色葡萄球菌特点及危害
2.1 金黄色葡萄球菌特点及危害
2.2 金黄色葡萄球菌研究现状
3 常见食源性致病菌检测方法及其研究进展
3.1 传统微生物平板检验法
3.2 分子生物学检测方法
3.3 免疫学检测法
3.4 生物传感器
4 适配体
4.1 适配体简介
4.2 适配体技术应用进展
5 基于适配体检测技术的常用手段
5.1 表面增强拉曼光谱技术简述
5.2 表面增强拉曼光谱技术应用进展
5.3 荧光检测技术简述及应用
5.4 流式分析技术简述及应用
6 量子点
6.1 量子点简介
6.2 基于量子点检测技术应用进展
7 研究目的与意义
8 创新点
第二章 目标菌最佳适配体筛选
1 材料和方法
1.1 实验材料
1.2 实验试剂及主要溶剂
1.3 实验主要仪器
1.4 实验方法
1.5 数据整理与分析
2 结果与分析
2.1 金黄色葡萄球菌适配体亲和力分析结果
2.2 大肠埃希氏菌O157:H7适配体亲和力分析结果
2.3 适配体特异性分析
3 讨论
4 本章小结
第三章 建立同步检测两种目标菌的“三明治结构”
1 材料和方法
1.1 实验材料
1.2 实验试剂及主要溶剂
1.3 实验主要仪器
1.4 实验方法
1.5 数据整理与分析
2 结果与分析
2.1 适配体功能化磁珠制备及结构表征
2.2 量子点显微成像及其功能化表征
2.3 “三明治结构”表征
2.4 对“三明治结构”捕获条件优化
2.5 同步检测两种目标菌并确定其最低检测限
3 讨论
4 小结
第四章 食品样品加标回收实验
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验试剂及主要溶剂
1.3 实验主要仪器
1.4 实验方法
2 结果与分析
2.1 牛奶样品中金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏菌O157:H7加标回收实验
2.2 生猪肉肉糜样品中金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏菌O157:H7加标回收实验
2.3 生牛肉肉糜样品中金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏菌O157:H7加标回收实验
2.4 袋装袋装黄豆酱中金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏菌O157:H7加标回收实验
3 讨论
4 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]美国多州发生大肠杆菌感染事件[J]. 中国食品学报. 2019(11)
[2]快速检测技术在食品检测领域中的应用[J]. 王青,徐美蓉,黄铮,寇向龙. 食品安全导刊. 2019(30)
[3]鉴定大肠埃希菌O157:H7的表型特征探讨[J]. 马爽,何冬梅,林铿,马翔. 国际检验医学杂志. 2019(15)
[4]免疫磁分离法高效富集牛奶中大肠杆菌O157:H7[J]. 黄震,罗梅霞,汪泽祥,王素花,刘劲涛,袁美芳,黎丹红,赖卫华. 食品安全质量检测学报. 2019(14)
[5]2009—2017年大肠埃希菌临床分布及耐药性分析[J]. 朱德永,袁雕,何祥,汪华丽,王建琼,樊晓东,秦华,杨文勇. 微生物学免疫学进展. 2019(04)
[6]一种玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒的研制[J]. 刘玉梅,王兆芹,贾芳芳,万宇平,杜美红,张瑜,冯月君,张颖,何方洋. 山东畜牧兽医. 2019(02)
[7]我国乳品质量安全问题频发的原因及对策[J]. 佟晓林,岳忠岩. 食品安全导刊. 2019(03)
[8]3种食源性细菌免疫磁珠联合ATP发光检测技术研究[J]. 寇晓晶,高峰,谢春. 中国动物检疫. 2019(01)
[9]金黄色葡萄球菌快速检测测试片培养基的优化[J]. 李春梅,王丹,侯典朋,魏丽娜. 中国乳品工业. 2018(12)
[10]某院336例医院获得性肺炎患者金黄色葡萄球菌感染情况及耐药性研究[J]. 卓安山,官振标,李奕,徐世林,童皖宁,孙星,赵红霞,李雷. 海军医学杂志. 2017(06)
博士论文
[1]基于核酸适体的多功能上转换纳米探针的研究[D]. 吴园.湖南大学 2018
[2]基于核酸适配体的液晶传感器检测生物分子[D]. 王颖.重庆医科大学 2018
[3]牛奶中主要有害污染物的表面增强拉曼光谱检测方法研究[D]. 李欢欢.江苏大学 2018
[4]金/银壳磁珠及其复合基底的可控制备与SERS检测关键技术研究[D]. 王俊峰.国防科学技术大学 2016
[5]基于量子点的荧光生物与化学传感器及其食品安全快速检测应用[D]. 徐李舟.浙江大学 2016
[6]食品中三种致病菌的快速检测方法研究[D]. 王勇.吉林大学 2014
[7]功能化量子点的合成及其在重金属分析中的应用研究[D]. 赵勤.苏州大学 2014
[8]食源性致病菌适配体的筛选及分析应用研究[D]. 段诺.江南大学 2013
[9]基于上转换荧光纳米探针的高灵敏微生物毒素检测方法研究[D]. 吴世嘉.江南大学 2013
[10]基于聚甲基丙烯酸酯多孔材料的表面增强拉曼光谱检测方法研究[D]. 李青青.华东理工大学 2013
硕士论文
[1]非标记功能性核酸荧光传感器检测水及食品中汞离子和铅离子残留的研究[D]. 孙宏靖.吉林大学 2019
[2]表面增强拉曼光谱在肝和肺肿瘤诊断中的应用研究[D]. 张琨.山东师范大学 2019
[3]非标记核酸适配体荧光传感器检测牛奶中的土霉素与三聚氰胺[D]. 别佳昕.吉林大学 2018
[4]大肠杆菌O157:H7在不同土地利用类型的土壤中的存活行为及其影响因素[D]. 丁美月.吉林大学 2018
[5]量子点的表面修饰及其在肿瘤核酸标志物检测中的应用[D]. 杨向荣.南京邮电大学 2016
[6]基于核酸适配体的多种抗生素同时检测方法的研究[D]. 薛璟珂.江南大学 2016
[7]乳制品中三聚氰胺快速检测方法的研究[D]. 黄婷婷.仲恺农业工程学院 2016
[8]基于适配体的农兽药残留快速检测技术研究[D]. 白文荟.中国农业科学院 2016
[9]适配体化磁纳米富集及生物发光检测金葡菌[D]. 陈文玲.江南大学 2015
[10]ISET联合细胞免疫荧光检测循环肿瘤细胞技术体系的建立及其临床研究[D]. 王振丹.济南大学 2015
本文编号：3198042
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 文献综述
1 大肠埃希氏菌O157:H7
1.1 大肠埃希氏菌O157:H7特点及危害
1.2 大肠埃希氏菌O157:H7研究现状
2 金黄色葡萄球菌特点及危害
2.1 金黄色葡萄球菌特点及危害
2.2 金黄色葡萄球菌研究现状
3 常见食源性致病菌检测方法及其研究进展
3.1 传统微生物平板检验法
3.2 分子生物学检测方法
3.3 免疫学检测法
3.4 生物传感器
4 适配体
4.1 适配体简介
4.2 适配体技术应用进展
5 基于适配体检测技术的常用手段
5.1 表面增强拉曼光谱技术简述
5.2 表面增强拉曼光谱技术应用进展
5.3 荧光检测技术简述及应用
5.4 流式分析技术简述及应用
6 量子点
6.1 量子点简介
6.2 基于量子点检测技术应用进展
7 研究目的与意义
8 创新点
第二章 目标菌最佳适配体筛选
1 材料和方法
1.1 实验材料
1.2 实验试剂及主要溶剂
1.3 实验主要仪器
1.4 实验方法
1.5 数据整理与分析
2 结果与分析
2.1 金黄色葡萄球菌适配体亲和力分析结果
2.2 大肠埃希氏菌O157:H7适配体亲和力分析结果
2.3 适配体特异性分析
3 讨论
4 本章小结
第三章 建立同步检测两种目标菌的“三明治结构”
1 材料和方法
1.1 实验材料
1.2 实验试剂及主要溶剂
1.3 实验主要仪器
1.4 实验方法
1.5 数据整理与分析
2 结果与分析
2.1 适配体功能化磁珠制备及结构表征
2.2 量子点显微成像及其功能化表征
2.3 “三明治结构”表征
2.4 对“三明治结构”捕获条件优化
2.5 同步检测两种目标菌并确定其最低检测限
3 讨论
4 小结
第四章 食品样品加标回收实验
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验试剂及主要溶剂
1.3 实验主要仪器
1.4 实验方法
2 结果与分析
2.1 牛奶样品中金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏菌O157:H7加标回收实验
2.2 生猪肉肉糜样品中金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏菌O157:H7加标回收实验
2.3 生牛肉肉糜样品中金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏菌O157:H7加标回收实验
2.4 袋装袋装黄豆酱中金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏菌O157:H7加标回收实验
3 讨论
4 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]美国多州发生大肠杆菌感染事件[J]. 中国食品学报. 2019(11)
[2]快速检测技术在食品检测领域中的应用[J]. 王青,徐美蓉,黄铮,寇向龙. 食品安全导刊. 2019(30)
[3]鉴定大肠埃希菌O157:H7的表型特征探讨[J]. 马爽,何冬梅,林铿,马翔. 国际检验医学杂志. 2019(15)
[4]免疫磁分离法高效富集牛奶中大肠杆菌O157:H7[J]. 黄震,罗梅霞,汪泽祥,王素花,刘劲涛,袁美芳,黎丹红,赖卫华. 食品安全质量检测学报. 2019(14)
[5]2009—2017年大肠埃希菌临床分布及耐药性分析[J]. 朱德永,袁雕,何祥,汪华丽,王建琼,樊晓东,秦华,杨文勇. 微生物学免疫学进展. 2019(04)
[6]一种玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒的研制[J]. 刘玉梅,王兆芹,贾芳芳,万宇平,杜美红,张瑜,冯月君,张颖,何方洋. 山东畜牧兽医. 2019(02)
[7]我国乳品质量安全问题频发的原因及对策[J]. 佟晓林,岳忠岩. 食品安全导刊. 2019(03)
[8]3种食源性细菌免疫磁珠联合ATP发光检测技术研究[J]. 寇晓晶,高峰,谢春. 中国动物检疫. 2019(01)
[9]金黄色葡萄球菌快速检测测试片培养基的优化[J]. 李春梅,王丹,侯典朋,魏丽娜. 中国乳品工业. 2018(12)
[10]某院336例医院获得性肺炎患者金黄色葡萄球菌感染情况及耐药性研究[J]. 卓安山,官振标,李奕,徐世林,童皖宁,孙星,赵红霞,李雷. 海军医学杂志. 2017(06)
博士论文
[1]基于核酸适体的多功能上转换纳米探针的研究[D]. 吴园.湖南大学 2018
[2]基于核酸适配体的液晶传感器检测生物分子[D]. 王颖.重庆医科大学 2018
[3]牛奶中主要有害污染物的表面增强拉曼光谱检测方法研究[D]. 李欢欢.江苏大学 2018
[4]金/银壳磁珠及其复合基底的可控制备与SERS检测关键技术研究[D]. 王俊峰.国防科学技术大学 2016
[5]基于量子点的荧光生物与化学传感器及其食品安全快速检测应用[D]. 徐李舟.浙江大学 2016
[6]食品中三种致病菌的快速检测方法研究[D]. 王勇.吉林大学 2014
[7]功能化量子点的合成及其在重金属分析中的应用研究[D]. 赵勤.苏州大学 2014
[8]食源性致病菌适配体的筛选及分析应用研究[D]. 段诺.江南大学 2013
[9]基于上转换荧光纳米探针的高灵敏微生物毒素检测方法研究[D]. 吴世嘉.江南大学 2013
[10]基于聚甲基丙烯酸酯多孔材料的表面增强拉曼光谱检测方法研究[D]. 李青青.华东理工大学 2013
硕士论文
[1]非标记功能性核酸荧光传感器检测水及食品中汞离子和铅离子残留的研究[D]. 孙宏靖.吉林大学 2019
[2]表面增强拉曼光谱在肝和肺肿瘤诊断中的应用研究[D]. 张琨.山东师范大学 2019
[3]非标记核酸适配体荧光传感器检测牛奶中的土霉素与三聚氰胺[D]. 别佳昕.吉林大学 2018
[4]大肠杆菌O157:H7在不同土地利用类型的土壤中的存活行为及其影响因素[D]. 丁美月.吉林大学 2018
[5]量子点的表面修饰及其在肿瘤核酸标志物检测中的应用[D]. 杨向荣.南京邮电大学 2016
[6]基于核酸适配体的多种抗生素同时检测方法的研究[D]. 薛璟珂.江南大学 2016
[7]乳制品中三聚氰胺快速检测方法的研究[D]. 黄婷婷.仲恺农业工程学院 2016
[8]基于适配体的农兽药残留快速检测技术研究[D]. 白文荟.中国农业科学院 2016
[9]适配体化磁纳米富集及生物发光检测金葡菌[D]. 陈文玲.江南大学 2015
[10]ISET联合细胞免疫荧光检测循环肿瘤细胞技术体系的建立及其临床研究[D]. 王振丹.济南大学 2015
本文编号：3198042
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