牦牛酥油中脂肪酸纯化及其功能特性研究
发布时间：2021-06-20 09:30
结合地方特色,进一步明确牦牛酥油支链脂肪酸的功能特性。本文利用尿素络合及过氧化原理纯化牦牛酥油中的功能性脂肪酸,探讨从牦牛酥油中纯化的支链脂肪酸（branched chain fatty acid,BCFA）在乳腺癌细胞株（SK-BR-3）中的转录组学研究,并进行流式细胞计数、DAPI染色（DAPI即4’,6-二脒基-2-苯基吲哚,4’,6-diamidino-2-phenylindole）、MTT比色法（MTT即噻唑蓝,Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide）及荧光定量验证。明确牦牛酥油中的BCFA对乳腺癌细胞的抑制作用。本研究主要结论:（1）采取尿素络合结晶工艺,络合温度4℃,络合时间8 h,尿素/脂肪酸（w/w）比例为6.5:1时,可获得纯度最高为16.29%的支链脂肪酸,得率为3.28%。（2）对牦牛酥油进行过氧化反应,获得中链脂肪酸（medium-chain fatty acid,MCFA）纯度为67.70%,得率850%。脂肪酸/过氧乙酸比值1:3时获得纯度为15.91%的BCFA,得率21.57%,同时获得环氧脂肪酸甲酯,纯...
【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校
【文章页数】：105 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
尿素/脂肪酸（w/w）对络合纯化BCFA的影响
图 2.2 络合温度对络合纯化 BCFA 的影响 2.2 Effect of complexation temperature on complexation and purification of B温条件耗能大，高温下脂肪酸易氧化，并综合考虑其纯度和提取FA 的络合温度应设在 4℃左右为宜。络合时间对络合工艺的影响置尿素/脂肪酸（w/w）为 2:1、络合温度为 4℃，在络合时间分别4 h、20 h、26 h、32 h 的条件下络合，获得富集相的游离脂肪酸。表 2.7 络合时间对络合工艺的影响-纯度（%）Table 2.7 Effect of complexation time on complexation process - purity (%)FA 酥油络合时间/h2 8 14 20
3.3.2 脂肪酸甲酯的制备取适量（20 g）游离脂肪酸。再加入质量分数为 1%的硫酸-甲醇溶液 100 mL到锥形瓶中，用锡箔纸封口，60℃水浴 30 min。冷却后，加入 50 mL 的正己烷及 50 ml 的饱和 NaCl 溶液，萃取取正己烷层。水洗至中性后，干燥并过滤。用旋转蒸发器（40℃）获得游离脂肪酸甲酯，并回收正己烷。脂肪酸甲酯低温-20℃保存备用。3.3.3 脂肪酸甲酯的过氧化脂肪酸甲酯的过氧化目的是使不饱和脂肪酸的双键氧化生成饱和脂肪酸。加入过氧乙酸（过氧化氢与乙酸 1:1 配置），设定三个单因素脂肪酸与过氧乙酸比值为 1:1、1:2、1:3 反应以判断过氧化程度[93]。再加入正己烷进行萃取，水洗至中性，干燥并过滤。用旋转蒸发器（40℃）获得游离脂肪酸甲酯，并回收正己烷。脂肪酸甲酯低温（-20℃）保存备用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]阿托伐他汀调控MMP-9、Cleaved Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达对胃癌细胞增殖、周期和凋亡的影响[J]. 王玲,周巧直,王晓燕,吴云娜,樊爱平. 胃肠病学和肝病学杂志. 2018(11)
[2]GB/T 16886.5-2017中MTT细胞毒性试验方法解读[J]. 胡煜雯,高静贤. 中国医疗器械信息. 2018(21)
[3]白藜芦醇通过激活Caspase-3和PARP-1影响前列腺癌细胞侵袭和凋亡[J]. 袁逾喆,张忠泉,孙庆红,聂建军. 实用药物与临床. 2018(07)
[4]含锌指和BTB结构域7B（ZBTB7B/ThPOK）及其相关因子在T细胞分化及功能中的作用[J]. 黄丽芳,李启睿,李国华. 细胞与分子免疫学杂志. 2017(11)
[5]介导细胞凋亡的caspase-3在卵巢癌中的表达和放疗敏感性的关联性研究[J]. 张春年,王建中. 东南大学学报(医学版). 2017(02)
[6]槐定碱通过Caspase-3介导的人胰腺癌细胞株capan-1凋亡机制研究[J]. 任丽平,李先佳,金少举. 河南科技大学学报(医学版). 2017(01)
[7]苦参碱促进胃癌细胞凋亡及对STAT3、Cleaved-caspase3、MMP-2蛋白表达的影响[J]. 梁辰,戴静,周福祥,张俊红,於海军. 肿瘤药学. 2017(01)
[8]miR-330抑制乳腺癌细胞增殖及其临床病理学意义[J]. 丁克硕,吴正升. 临床与实验病理学杂志. 2016(09)
[9]利用TCGA及GEO数据集分析claudin11在胃癌中的表达及临床意义[J]. 王硕,李智,郑春雷,曲秀娟,刘静,曲晶磊,车晓芳,刘云鹏. 武警后勤学院学报(医学版). 2016(06)
[10]牦牛酥油理化性质研究[J]. 孙美青,马莺,程金菊. 中国乳品工业. 2016(03)
博士论文
[1]LncRNA-AK123483的靶向基因PARP、caspase-3在心肌缺血再灌注损伤中的调控机制[D]. 郑诚飞.浙江大学 2018
[2]乳脂支链脂肪酸的微量分离、结构分布与抗炎作用[D]. 闫媛媛.江南大学 2018
[3]记忆性CD8+T细胞在同种器官移植急性排斥反应中的作用及机制研究[D]. 杜刚.广西医科大学 2014
[4]前列腺癌的PSA分子诊断及NFKBIA/SREBP2的表达与意义[D]. 江先汉.南方医科大学 2011
[5]呋喃喹啉类生物碱白鲜碱体外抗真菌活性及作用机制研究[D]. 郭娜.吉林大学 2009
硕士论文
[1]基于转录组数据的癌症凋亡机理的研究[D]. 杨柏楠.吉林大学 2018
[2]芥子气及其代谢产物对皮肤细胞DNA损伤效应的研究[D]. 束玉磊.中国人民解放军军事医学科学院 2017
[3]FADS2基因在食管鳞状细胞癌中的表达及其生物学功能的初步探究[D]. 王玲玲.郑州大学 2017
[4]基于蛋白质组学分析的良、恶性胸腔积液分子标志物搜寻[D]. 李志斌.安徽医科大学 2017
[5]转录组学和药物基因组学在人类复杂疾病研究中的应用[D]. 吕文文.安徽大学 2016
[6]添加不同组合支链氨基酸对绵羊整体消化代谢及瘤胃微生物多样性的影响[D]. 李晴.新疆农业大学 2015
[7]食品中氧化锌纳米颗粒与其他食品添加剂的复合毒性研究[D]. 袁露露.上海大学 2015
[8]2型糖尿病视网膜病变患者外周血miR-155与调节性T细胞的相关性研究[D]. 杨婷婷.滨州医学院 2015
[9]红景天苷抗肝癌作用及其机制的实验研究[D]. 何小喜.广西医科大学 2014
[10]前哨淋巴结微转移检测在早期非小细胞肺癌中的应用研究[D]. 李广旭.济南大学 2014
本文编号：3238936
【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校
【文章页数】：105 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
尿素/脂肪酸（w/w）对络合纯化BCFA的影响
图 2.2 络合温度对络合纯化 BCFA 的影响 2.2 Effect of complexation temperature on complexation and purification of B温条件耗能大，高温下脂肪酸易氧化，并综合考虑其纯度和提取FA 的络合温度应设在 4℃左右为宜。络合时间对络合工艺的影响置尿素/脂肪酸（w/w）为 2:1、络合温度为 4℃，在络合时间分别4 h、20 h、26 h、32 h 的条件下络合，获得富集相的游离脂肪酸。表 2.7 络合时间对络合工艺的影响-纯度（%）Table 2.7 Effect of complexation time on complexation process - purity (%)FA 酥油络合时间/h2 8 14 20
3.3.2 脂肪酸甲酯的制备取适量（20 g）游离脂肪酸。再加入质量分数为 1%的硫酸-甲醇溶液 100 mL到锥形瓶中，用锡箔纸封口，60℃水浴 30 min。冷却后，加入 50 mL 的正己烷及 50 ml 的饱和 NaCl 溶液，萃取取正己烷层。水洗至中性后，干燥并过滤。用旋转蒸发器（40℃）获得游离脂肪酸甲酯，并回收正己烷。脂肪酸甲酯低温-20℃保存备用。3.3.3 脂肪酸甲酯的过氧化脂肪酸甲酯的过氧化目的是使不饱和脂肪酸的双键氧化生成饱和脂肪酸。加入过氧乙酸（过氧化氢与乙酸 1:1 配置），设定三个单因素脂肪酸与过氧乙酸比值为 1:1、1:2、1:3 反应以判断过氧化程度[93]。再加入正己烷进行萃取，水洗至中性，干燥并过滤。用旋转蒸发器（40℃）获得游离脂肪酸甲酯，并回收正己烷。脂肪酸甲酯低温（-20℃）保存备用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]阿托伐他汀调控MMP-9、Cleaved Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达对胃癌细胞增殖、周期和凋亡的影响[J]. 王玲,周巧直,王晓燕,吴云娜,樊爱平. 胃肠病学和肝病学杂志. 2018(11)
[2]GB/T 16886.5-2017中MTT细胞毒性试验方法解读[J]. 胡煜雯,高静贤. 中国医疗器械信息. 2018(21)
[3]白藜芦醇通过激活Caspase-3和PARP-1影响前列腺癌细胞侵袭和凋亡[J]. 袁逾喆,张忠泉,孙庆红,聂建军. 实用药物与临床. 2018(07)
[4]含锌指和BTB结构域7B（ZBTB7B/ThPOK）及其相关因子在T细胞分化及功能中的作用[J]. 黄丽芳,李启睿,李国华. 细胞与分子免疫学杂志. 2017(11)
[5]介导细胞凋亡的caspase-3在卵巢癌中的表达和放疗敏感性的关联性研究[J]. 张春年,王建中. 东南大学学报(医学版). 2017(02)
[6]槐定碱通过Caspase-3介导的人胰腺癌细胞株capan-1凋亡机制研究[J]. 任丽平,李先佳,金少举. 河南科技大学学报(医学版). 2017(01)
[7]苦参碱促进胃癌细胞凋亡及对STAT3、Cleaved-caspase3、MMP-2蛋白表达的影响[J]. 梁辰,戴静,周福祥,张俊红,於海军. 肿瘤药学. 2017(01)
[8]miR-330抑制乳腺癌细胞增殖及其临床病理学意义[J]. 丁克硕,吴正升. 临床与实验病理学杂志. 2016(09)
[9]利用TCGA及GEO数据集分析claudin11在胃癌中的表达及临床意义[J]. 王硕,李智,郑春雷,曲秀娟,刘静,曲晶磊,车晓芳,刘云鹏. 武警后勤学院学报(医学版). 2016(06)
[10]牦牛酥油理化性质研究[J]. 孙美青,马莺,程金菊. 中国乳品工业. 2016(03)
博士论文
[1]LncRNA-AK123483的靶向基因PARP、caspase-3在心肌缺血再灌注损伤中的调控机制[D]. 郑诚飞.浙江大学 2018
[2]乳脂支链脂肪酸的微量分离、结构分布与抗炎作用[D]. 闫媛媛.江南大学 2018
[3]记忆性CD8+T细胞在同种器官移植急性排斥反应中的作用及机制研究[D]. 杜刚.广西医科大学 2014
[4]前列腺癌的PSA分子诊断及NFKBIA/SREBP2的表达与意义[D]. 江先汉.南方医科大学 2011
[5]呋喃喹啉类生物碱白鲜碱体外抗真菌活性及作用机制研究[D]. 郭娜.吉林大学 2009
硕士论文
[1]基于转录组数据的癌症凋亡机理的研究[D]. 杨柏楠.吉林大学 2018
[2]芥子气及其代谢产物对皮肤细胞DNA损伤效应的研究[D]. 束玉磊.中国人民解放军军事医学科学院 2017
[3]FADS2基因在食管鳞状细胞癌中的表达及其生物学功能的初步探究[D]. 王玲玲.郑州大学 2017
[4]基于蛋白质组学分析的良、恶性胸腔积液分子标志物搜寻[D]. 李志斌.安徽医科大学 2017
[5]转录组学和药物基因组学在人类复杂疾病研究中的应用[D]. 吕文文.安徽大学 2016
[6]添加不同组合支链氨基酸对绵羊整体消化代谢及瘤胃微生物多样性的影响[D]. 李晴.新疆农业大学 2015
[7]食品中氧化锌纳米颗粒与其他食品添加剂的复合毒性研究[D]. 袁露露.上海大学 2015
[8]2型糖尿病视网膜病变患者外周血miR-155与调节性T细胞的相关性研究[D]. 杨婷婷.滨州医学院 2015
[9]红景天苷抗肝癌作用及其机制的实验研究[D]. 何小喜.广西医科大学 2014
[10]前哨淋巴结微转移检测在早期非小细胞肺癌中的应用研究[D]. 李广旭.济南大学 2014
本文编号：3238936
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