青头菌多糖的结构表征及生物活性研究
发布时间：2021-06-23 17:30
青头菌为云南当地的一种常用食用菌,常被当地人用作清肝明目、理气解郁的调理品。本文优化了青头菌多糖的热水浸提法工艺,对提取的粗多糖进行分离纯化并研究其生物活性,主要研究成果如下:在单因素的基础上用响应面模型优化青头菌多糖的得率,最佳提取方案为提取温度90℃、稀释倍数30倍、提取时间100 min,实际得率为9.89%。对提取物进行浓缩、醇沉、脱色、脱蛋白后得到粗多糖RVP。RVP经过DEAE纤维素离子层析柱分离纯化后得到两种均一性多糖RVP-Ⅰ、RVP-Ⅱ和一种非均一性多糖RVP-Ⅲ。理化性质研究表明RVP-Ⅰ的重均分子量Mw为14883 Da,RVP-Ⅱ的重均分子量Mw为13301 Da,RVP-Ⅲ的洗脱曲线中有两个峰,重均分子量Mw分别为1330816 Da和15970 Da。RVP-Ⅰ,RVP-Ⅱ,RVP-Ⅲ的总糖含量分别为88.47%,87.65%,83.82%;蛋白质含量分别为1.87%,2.37%,2.40%;糖醛酸含量分别为6.72%,7.48%,9.65%;基本不含淀粉和核酸类物质。对RVP-Ⅰ、RVP-Ⅱ进行结构分析,结果表明RVP-Ⅰ、RVP-Ⅱ均不含三螺旋结构。RV...
【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：108 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
部分糖残基高碘酸氧化和Smith降解过程
华南理工大学硕士学位论文18A.(1)(2)(2)B.(1)(2)C.(1)(2)图2-3:响应面模拟结果：A.提取温度-稀释倍数；B.稀释倍数-提取时间；C.提取温度-提取时间Figure2-3:Responsesurfacesimulationresults:A.Extractiontemperature-Dilutionmultiple；B.Dilutionmultiple-Extractiontime；C.Extractiontemperature-Extractiontime根据模型分析得到最优提取方案：提取温度90.95℃，稀释30.12倍，浸提时间99.37min，理论最优得率为9.97%。根据实际情况进行调整为提取温度90℃，稀释30倍，浸提时间100min，重复3次得到最优得率9.89%。实验结果与模型得出的结果较接近，表明模型可行。采用优化后的提取条件提取青头菌多糖溶液，将提取后的溶液浓缩，并采用D354F大孔树脂进行脱色，随后使用95%乙醇按照多糖溶液：95%乙醇=1:4的比例在4℃下进行醇沉，离心弃去上清液，置于60℃烘箱中烘干得到青头菌多糖。
第四章青头菌纯化多糖的结构分析45δ5.26六个异头氢信号，δ97.64，δ97.80，δ100.43，δ101.45，δ101.84，δ102.16六个异头碳信号，氢谱中δ1.17以及碳谱中δ15.66处的信号为岩藻糖H-6和C-6的特征信号[53]，说明了RVP-Ⅰ的主要结构中有岩藻糖的存在，和单糖组成的结果一致。如图4-7、4-8，通过2DNMR（HSQC/HMBC）对RVP-Ⅰ中糖残基的信号进行分析，结合红外光谱和甲基化分析结果以及已有的文献记载，HSQC异头碳氢区域的6个H1/C1信号δ5.33/99.65、δ5.04/101.95、δ4.99/97.79、δ4.93/97.83、δ4.64/102.98、δ4.47/102.71分别归属为t-α-D-Glc[54]、t-α-D-Fuc[55]、1,2,6-α-D-Man[56]、1,3,6-α-D-Man[57]、1,4-β-D-Gal[58]、1,6-β-D-Gal[59]，H1-H5/C1-C5区域的信号归属详情见表4-8。通过HMBC分析RVP-Ⅰ的糖残基中13C和1H的远程信号关系。图4-5RVP-Ⅰ核磁共振氢谱图Figure4-5NMRhydrogenspectrumofRVP-Ⅰ
【参考文献】：
期刊论文
[1]水碱连续提取黄皮疣柄牛肝菌粗多糖的理化性质及抗氧化活性研究[J]. 郑婷婷,严亮,张文杰,王雪峰,普岳红,马莉,赵苗苗,范江平. 食品工业科技. 2020(15)
[2]5种食用菌多糖的结构特征及抗氧化活性对比[J]. 商佳琦,邹丹阳,滕翔宇,范荣,付玲,李雪晴,刘宁,邵美丽. 食品工业科技. 2020(15)
[3]冬荪及其蛋托的成分分析和抗氧化活性研究[J]. 首坤秀,王山立,林灵,杨小生,杨娟. 食品科技. 2020(02)
[4]4种浒苔多糖的体外抗禽流感病毒活性研究[J]. 于超,杜恒裔,谭子超,刘晓龙,王述柏. 黑龙江畜牧兽医. 2020(01)
[5]食用真菌多糖抗肿瘤活性研究进展[J]. 张聪,詹雪,赵丹丹. 科学技术创新. 2019(35)
[6]胭脂果多糖提取工艺优化及其抗氧化活性分析[J]. 高定烽,张言,李思敏,石峰,熊华斌,杨志,刘满红. 食品工业科技. 2020(04)
[7]剑叶耳草多糖对乙型肝炎病毒的抑制作用及其机制研究[J]. 蒙明瑜,黄仁彬,梁红. 中药药理与临床. 2019(04)
[8]三种蓝莓抗氧化及抗Hep G2细胞增殖活性的比较分析[J]. 梁泽明,陈春,伍惠仪,胡心怡,王睿飞,余以刚. 现代食品科技. 2019(06)
[9]植物多糖抗病毒机制研究[J]. 侯子驰,王依彤,李天怡,张晓娜,尹凡,靖会. 生物化工. 2019(02)
[10]复合真菌多糖调节免疫活性研究[J]. 周建湘. 食品安全导刊. 2019(12)
博士论文
[1]十种食用真菌多糖的结构分析及其比较研究[D]. 闫晶敏.东北师范大学 2018
[2]杏鲍菇菌丝体多糖的分离纯化及抗衰老、抗糖尿病活性分析[D]. 张晨.山东农业大学 2018
[3]猴头菇多糖的结构表征、免疫调节活性及其机理研究[D]. 伍芳芳.华南理工大学 2018
[4]巨大革耳、青头菌和铜绿菌阿魏酸酯酶的分离纯化及其理化性质研究[D]. 王丽.中国农业大学 2014
硕士论文
[1]香菇多糖和黄芪多糖对感染GPV雏鹅免疫及小肠炎性损伤的作用[D]. 李天琦.东北农业大学 2019
[2]三种食用菌子实体的营养成分及抗氧化性分析[D]. 景彦萍.山西大学 2019
[3]白簕多糖的组成分析及其降血糖作用机制研究[D]. 郑诗嘉.广东药科大学 2019
[4]黑木耳多糖的降血脂作用及相关机制的初步探讨[D]. 何嘉烽.广东药科大学 2019
[5]烟色烟管菌胞外多糖的纯化、性质及生物活性研究[D]. 徐静.东北师范大学 2019
[6]六妹羊肚菌子实体多糖提取工艺优化及结构表征、抗氧化活性研究[D]. 王珍珍.吉林农业大学 2019
[7]多汁乳菇多糖结构分析及生物活性研究[D]. 耿佳欢.华南理工大学 2019
[8]羊肚菌多糖（ME-X）结构鉴定、生物活性及抗肿瘤机制的研究[D]. 黄瑶.西华师范大学 2019
[9]皱盖疣柄牛肝菌多糖结构分析及生物活性研究[D]. 董芳.华南理工大学 2018
[10]青钱柳多糖提取工艺优化及其体外抗氧化、降血糖活性研究[D]. 邹荣灿.贵州师范大学 2018
本文编号：3245361
【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：108 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
部分糖残基高碘酸氧化和Smith降解过程
华南理工大学硕士学位论文18A.(1)(2)(2)B.(1)(2)C.(1)(2)图2-3:响应面模拟结果：A.提取温度-稀释倍数；B.稀释倍数-提取时间；C.提取温度-提取时间Figure2-3:Responsesurfacesimulationresults:A.Extractiontemperature-Dilutionmultiple；B.Dilutionmultiple-Extractiontime；C.Extractiontemperature-Extractiontime根据模型分析得到最优提取方案：提取温度90.95℃，稀释30.12倍，浸提时间99.37min，理论最优得率为9.97%。根据实际情况进行调整为提取温度90℃，稀释30倍，浸提时间100min，重复3次得到最优得率9.89%。实验结果与模型得出的结果较接近，表明模型可行。采用优化后的提取条件提取青头菌多糖溶液，将提取后的溶液浓缩，并采用D354F大孔树脂进行脱色，随后使用95%乙醇按照多糖溶液：95%乙醇=1:4的比例在4℃下进行醇沉，离心弃去上清液，置于60℃烘箱中烘干得到青头菌多糖。
第四章青头菌纯化多糖的结构分析45δ5.26六个异头氢信号，δ97.64，δ97.80，δ100.43，δ101.45，δ101.84，δ102.16六个异头碳信号，氢谱中δ1.17以及碳谱中δ15.66处的信号为岩藻糖H-6和C-6的特征信号[53]，说明了RVP-Ⅰ的主要结构中有岩藻糖的存在，和单糖组成的结果一致。如图4-7、4-8，通过2DNMR（HSQC/HMBC）对RVP-Ⅰ中糖残基的信号进行分析，结合红外光谱和甲基化分析结果以及已有的文献记载，HSQC异头碳氢区域的6个H1/C1信号δ5.33/99.65、δ5.04/101.95、δ4.99/97.79、δ4.93/97.83、δ4.64/102.98、δ4.47/102.71分别归属为t-α-D-Glc[54]、t-α-D-Fuc[55]、1,2,6-α-D-Man[56]、1,3,6-α-D-Man[57]、1,4-β-D-Gal[58]、1,6-β-D-Gal[59]，H1-H5/C1-C5区域的信号归属详情见表4-8。通过HMBC分析RVP-Ⅰ的糖残基中13C和1H的远程信号关系。图4-5RVP-Ⅰ核磁共振氢谱图Figure4-5NMRhydrogenspectrumofRVP-Ⅰ
【参考文献】：
期刊论文
[1]水碱连续提取黄皮疣柄牛肝菌粗多糖的理化性质及抗氧化活性研究[J]. 郑婷婷,严亮,张文杰,王雪峰,普岳红,马莉,赵苗苗,范江平. 食品工业科技. 2020(15)
[2]5种食用菌多糖的结构特征及抗氧化活性对比[J]. 商佳琦,邹丹阳,滕翔宇,范荣,付玲,李雪晴,刘宁,邵美丽. 食品工业科技. 2020(15)
[3]冬荪及其蛋托的成分分析和抗氧化活性研究[J]. 首坤秀,王山立,林灵,杨小生,杨娟. 食品科技. 2020(02)
[4]4种浒苔多糖的体外抗禽流感病毒活性研究[J]. 于超,杜恒裔,谭子超,刘晓龙,王述柏. 黑龙江畜牧兽医. 2020(01)
[5]食用真菌多糖抗肿瘤活性研究进展[J]. 张聪,詹雪,赵丹丹. 科学技术创新. 2019(35)
[6]胭脂果多糖提取工艺优化及其抗氧化活性分析[J]. 高定烽,张言,李思敏,石峰,熊华斌,杨志,刘满红. 食品工业科技. 2020(04)
[7]剑叶耳草多糖对乙型肝炎病毒的抑制作用及其机制研究[J]. 蒙明瑜,黄仁彬,梁红. 中药药理与临床. 2019(04)
[8]三种蓝莓抗氧化及抗Hep G2细胞增殖活性的比较分析[J]. 梁泽明,陈春,伍惠仪,胡心怡,王睿飞,余以刚. 现代食品科技. 2019(06)
[9]植物多糖抗病毒机制研究[J]. 侯子驰,王依彤,李天怡,张晓娜,尹凡,靖会. 生物化工. 2019(02)
[10]复合真菌多糖调节免疫活性研究[J]. 周建湘. 食品安全导刊. 2019(12)
博士论文
[1]十种食用真菌多糖的结构分析及其比较研究[D]. 闫晶敏.东北师范大学 2018
[2]杏鲍菇菌丝体多糖的分离纯化及抗衰老、抗糖尿病活性分析[D]. 张晨.山东农业大学 2018
[3]猴头菇多糖的结构表征、免疫调节活性及其机理研究[D]. 伍芳芳.华南理工大学 2018
[4]巨大革耳、青头菌和铜绿菌阿魏酸酯酶的分离纯化及其理化性质研究[D]. 王丽.中国农业大学 2014
硕士论文
[1]香菇多糖和黄芪多糖对感染GPV雏鹅免疫及小肠炎性损伤的作用[D]. 李天琦.东北农业大学 2019
[2]三种食用菌子实体的营养成分及抗氧化性分析[D]. 景彦萍.山西大学 2019
[3]白簕多糖的组成分析及其降血糖作用机制研究[D]. 郑诗嘉.广东药科大学 2019
[4]黑木耳多糖的降血脂作用及相关机制的初步探讨[D]. 何嘉烽.广东药科大学 2019
[5]烟色烟管菌胞外多糖的纯化、性质及生物活性研究[D]. 徐静.东北师范大学 2019
[6]六妹羊肚菌子实体多糖提取工艺优化及结构表征、抗氧化活性研究[D]. 王珍珍.吉林农业大学 2019
[7]多汁乳菇多糖结构分析及生物活性研究[D]. 耿佳欢.华南理工大学 2019
[8]羊肚菌多糖（ME-X）结构鉴定、生物活性及抗肿瘤机制的研究[D]. 黄瑶.西华师范大学 2019
[9]皱盖疣柄牛肝菌多糖结构分析及生物活性研究[D]. 董芳.华南理工大学 2018
[10]青钱柳多糖提取工艺优化及其体外抗氧化、降血糖活性研究[D]. 邹荣灿.贵州师范大学 2018
本文编号：3245361
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