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香菇多糖对体外诱导分化的γδT细胞杀伤肺癌A549细胞的影响

发布时间:2021-10-05 13:24
  目的将γδT细胞自健康成人外周血分离后,经多种细胞因子体外诱导分化,形成细胞体系后分组,再加入不同浓度香菇多糖(Lentinan,LNT)以确定LNT对γδT细胞抗肿瘤活性的影响,为临床如何应用LNT提高γδT细胞过继免疫治疗疗效提供理论依据。方法在无菌的前提下,通过密度梯度离心法分离健康成人外周血获取单个核细胞,用重组人IL-2(1000 IU/ml)、唑来膦酸(5uM)等细胞因子诱导扩增γδT细胞。采用直接细胞计数法,于体外培养的第0、4、7、10天计数γδT细胞。将体外培养第10天的γδT细胞分为12组,每组各设3个复孔,其中6组为实验组,分别加入1640培养液溶解的注射用香菇多糖,使其终浓度分别为0 ug/ml、5 ug/ml、10 ug/ml、25ug/ml、50 ug/ml、75 ug/ml,记为LNT-I组、LNT-II组、LNT-III组、LNT-IV组、LNT-V组、LNT-VI组,剩余6组为对照组,记为LNT-I*组、LNT-II*组、LNT-III*组、LNT-IV*组、LNT-V*组、LNT-VI*组,然后按LNT的浓度梯度接种在96孔板上,继续培养,72小时后... 

【文章来源】:内蒙古医科大学内蒙古自治区

【文章页数】:53 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

香菇多糖对体外诱导分化的γδT细胞杀伤肺癌A549细胞的影响


香菇多糖(LNT)分子式

分层图,分层图,外周血,γδT细胞


图 4 离心后外周血分层分离出来的单个核细胞来膦酸及已配好的γδ察γδT 细胞的数量和(图5),适时适量添d10计数细胞。将细胞T细胞及其细胞表面标志养第10天的γδT细胞浓度为2×106个/ml,

示意图,孔板,示意图,香菇多糖


内蒙古医科大学硕士研究生学位论文(5 与香菇多糖共培养体外培养第10天的γδT细胞分为12组,每组各设3个复孔,其中6组为实验组,入1640培养液溶解的注射用香菇多糖,使其终浓度分别为0 ug/ml、5 ug/ml、/ml、25 ug/ml、50 ug/ml、75 ug/ml,记为LNT-I组、LNT-II组、LNT-III组、组、LNT-V组、LNT-VI组,剩余6组为对照组,记为LNT-I*组、LNT-II*组、LNT、LNT-IV*组、LNT-V*组、LNT-VI*组,然后按香菇多糖的浓度梯度分别接种在上。如下图所示:1 2 3 4 5 6 7 8 9 100011 12A

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]香菇多糖对急性髓系白血病患者树突状细胞的成熟和功能影响的体内外研究[D]. 王玉虹.兰州大学 2010



本文编号:3419827

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