罗非鱼皮明胶源血管紧张素转换酶抑制肽的制备及活性分析
发布时间：2022-01-12 20:32
高血压是脑中风、冠心病、心肌梗塞和糖尿病等心血管疾病的风险因子,该疾病已经成为最常见的危险性疾病之一。目前,临床上常用的一些降血压药物虽然具有很强的降血压作用,但同时也会产生一定的副作用,比如过敏、皮疹、咳嗽、味觉异常、白细胞减少以及具有药物依赖性等。然而,食源性ACEI肽是一种极具开发潜力的多肽类物质,它不仅具有降血压活性,而且安全性高、无其他毒副作用,已经成为生物活性肽领域研究的热点之一。罗非鱼皮明胶经蛋白酶水解后即可获得安全性高、低毒副作用的具有降低血压的小分子多肽。本文以罗非鱼的副产物罗非鱼皮为研究对象,利用蛋白酶水解鱼皮明胶制备ACEI肽,并对明胶水解产物进行了初步分离纯化、结构鉴定,获得了ACEI活性较高的小分子多肽。主要研究结果如下:1.以罗非鱼皮为原料,利用两种蛋白酶对其进行水解,将水解得到的明胶水解产物再经过连续模拟胃肠消化,并测定各个消化阶段产物的水解度及ACEI活性。同时,考虑体外肠吸收的影响,采用Caco-2细胞单层模型制备得到ACEI肽。再通过Sephadex G-25凝胶过滤柱、反向高效液相色谱对其进行分离纯化,经过高分辨质谱鉴定得到VGLPNSR和QAGL...
【文章来源】：昆明理工大学云南省
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ACE在血压调节中的作用机制Fig1-1MechanismofactionofACEinbloodpressureregulation
昆明理工大学硕士学位论文242.3数据处理与分析每个实验至少做三个平行，采用MicrosoftOfficeExcel2010进行数据处理，数据结果表示为平均值±标准偏差；使用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析，统计学差异显著，p<0.05。2.4结果与讨论2.4.1ACE酶活力的测定以马尿酸的浓度(μg/mL)为横坐标，以其在228nm处的特征吸收峰的吸光度值为纵坐标绘制得到马尿酸标准曲线，如图2.1所示。经过测定，本实验所用ACE酶的活为1U/mg。图2.1马尿酸标准曲线Fig2.1Thestandardcurveofhippuricacid2.4.2TSG水解产物水解度（DH）的变化在本研究中，通过连续模拟GI消化制备TSG水解产物，测定了不同阶段水解产物的DH值，包括：SG-1，SGI-1，SG-2、SGI-2。如图2.2所示，经过第一次模拟胃消化后得到SG-1的DH值为5.23％；而第一次模拟肠消化的过程中，SG-1经过胰酶的进一步消化得到的SGI-1，其DH
昆明理工大学硕士学位论文26胞单层膜吸收之前就已经被裂解成其他的小分子肽段[83]。由前面的研究结果可知小分子肽的DH值较高，因此，SGI-2BL的DH值高于SGI-2。还有研究发现，ACEI肽的疏水性可以增强其在Caco-2细胞中的转运，同时，肽的疏水性也可以增加其ACEI活性[82]。我们的实验结果也符合这一特点。图2.2鱼皮明胶不同消化阶段的水解度和ACEI活性变化Fig2.2Fig.1ThehydrolysisdegreeandACEinhibitoryactivitychangesofdifferentstagesofdigestionfromskincollagen注：图中小写字母表示差异显著性，相同字母表示差异不显著（p>0.05），不同字母表示差异显著(p<0.05)。SG-1：第一次模拟胃消化；SGI-1：第一次模拟肠道消化；SG-2：第二次模拟胃消化；SGI-2：第二次模拟肠道消化。d
【参考文献】：
期刊论文
[1]罗非鱼各个部位研究应用进展[J]. 李雪,白新鹏,曹君,张芳芳. 食品工业. 2018(11)
[2]我国高血压流行新特征——中国高血压调查的亮点和启示[J]. 王增武,杨瑛,王文,高润霖. 中国循环杂志. 2018(10)
[3]《中国心血管病报告2017》概要[J]. 陈伟伟,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,蒋立新,胡盛寿. 中国循环杂志. 2018(01)
[4]大孔吸附树脂分离魔芋飞粉中ACE抑制肽工艺研究[J]. 毛跟年,贺磊,周亚丽,李彦军. 粮食与油脂. 2017(10)
[5]Studies on the Conformations and Hydrogen Bonding of ACE Inhibitory Tripeptide VEF by All-atom Molecular Dynamics Simulations and Molecular Docking[J]. 齐春艳,张荣,黄国栋,吴文娟. 结构化学. 2017(02)
[6]远东拟沙丁鱼酶解产物的降血压效果评价及其ACE抑制肽的分离纯化与鉴定[J]. 王晶晶,吉薇,吉宏武,苏伟明,李亚会,刘书成. 食品与发酵工业. 2016(04)
[7]酶法提取罗非鱼内脏鱼油及脂肪酸组成分析[J]. 王倩倩,吕顺,陆剑锋,姜绍通,林琳. 中国粮油学报. 2015(09)
[8]血管紧张素转化酶抑制二肽抑制ACE作用的柔性分子对接[J]. 管骁,刘静,苏淅娜,韩飞,王文高,申瑞玲,李景军,廖丽丽. 食品科学. 2015(05)
[9]类蛋白反应修饰海地瓜酶解物及ACE抑制肽的制备[J]. 沈晴晴,曾名湧,赵元晖. 高等学校化学学报. 2014(05)
[10]罗非鱼鱼皮抗氧化肽的制备及分离纯化[J]. 庄永亮,张玉锋. 昆明理工大学学报(自然科学版). 2014(01)
博士论文
[1]泥鳅蛋白源ACE抑制肽的酶法制备及其降压活性研究[D]. 李莹.南京农业大学 2012
[2]螺旋藻活性肽的纯化、鉴定及降压、护肝机制研究[D]. 鲁军.北京林业大学 2010
[3]超声对酶法制备小麦胚芽ACE抑制肽的影响及其作用机理[D]. 贾俊强.江苏大学 2009
硕士论文
[1]醋豆降压肽的制备及其降压活性研究[D]. 张月圆.北京中医药大学 2018
[2]罗非鱼皮胶原蛋白降尿酸活性肽的研究[D]. 盛周煌.华南理工大学 2018
[3]沙丁鱼血管紧张素转化酶抑制肽的制备、分离纯化及功效研究[D]. 黄嘉成.暨南大学 2016
[4]鲢鱼蛋白制备ACE抑制肽的酶解工艺及其活性研究[D]. 尹歆.湖南农业大学 2012
[5]甘薯ACE抑制肽的制备及其降血压活性研究[D]. 王硕.中国农业科学院 2011
[6]鲢鱼蛋白酶解物的功能性质、抗氧化活性及其ACE抑制肽的制备[D]. 郭浩楠.浙江工商大学 2011
本文编号：3585417
【文章来源】：昆明理工大学云南省
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ACE在血压调节中的作用机制Fig1-1MechanismofactionofACEinbloodpressureregulation
昆明理工大学硕士学位论文242.3数据处理与分析每个实验至少做三个平行，采用MicrosoftOfficeExcel2010进行数据处理，数据结果表示为平均值±标准偏差；使用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析，统计学差异显著，p<0.05。2.4结果与讨论2.4.1ACE酶活力的测定以马尿酸的浓度(μg/mL)为横坐标，以其在228nm处的特征吸收峰的吸光度值为纵坐标绘制得到马尿酸标准曲线，如图2.1所示。经过测定，本实验所用ACE酶的活为1U/mg。图2.1马尿酸标准曲线Fig2.1Thestandardcurveofhippuricacid2.4.2TSG水解产物水解度（DH）的变化在本研究中，通过连续模拟GI消化制备TSG水解产物，测定了不同阶段水解产物的DH值，包括：SG-1，SGI-1，SG-2、SGI-2。如图2.2所示，经过第一次模拟胃消化后得到SG-1的DH值为5.23％；而第一次模拟肠消化的过程中，SG-1经过胰酶的进一步消化得到的SGI-1，其DH
昆明理工大学硕士学位论文26胞单层膜吸收之前就已经被裂解成其他的小分子肽段[83]。由前面的研究结果可知小分子肽的DH值较高，因此，SGI-2BL的DH值高于SGI-2。还有研究发现，ACEI肽的疏水性可以增强其在Caco-2细胞中的转运，同时，肽的疏水性也可以增加其ACEI活性[82]。我们的实验结果也符合这一特点。图2.2鱼皮明胶不同消化阶段的水解度和ACEI活性变化Fig2.2Fig.1ThehydrolysisdegreeandACEinhibitoryactivitychangesofdifferentstagesofdigestionfromskincollagen注：图中小写字母表示差异显著性，相同字母表示差异不显著（p>0.05），不同字母表示差异显著(p<0.05)。SG-1：第一次模拟胃消化；SGI-1：第一次模拟肠道消化；SG-2：第二次模拟胃消化；SGI-2：第二次模拟肠道消化。d
【参考文献】：
期刊论文
[1]罗非鱼各个部位研究应用进展[J]. 李雪,白新鹏,曹君,张芳芳. 食品工业. 2018(11)
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[3]《中国心血管病报告2017》概要[J]. 陈伟伟,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,蒋立新,胡盛寿. 中国循环杂志. 2018(01)
[4]大孔吸附树脂分离魔芋飞粉中ACE抑制肽工艺研究[J]. 毛跟年,贺磊,周亚丽,李彦军. 粮食与油脂. 2017(10)
[5]Studies on the Conformations and Hydrogen Bonding of ACE Inhibitory Tripeptide VEF by All-atom Molecular Dynamics Simulations and Molecular Docking[J]. 齐春艳,张荣,黄国栋,吴文娟. 结构化学. 2017(02)
[6]远东拟沙丁鱼酶解产物的降血压效果评价及其ACE抑制肽的分离纯化与鉴定[J]. 王晶晶,吉薇,吉宏武,苏伟明,李亚会,刘书成. 食品与发酵工业. 2016(04)
[7]酶法提取罗非鱼内脏鱼油及脂肪酸组成分析[J]. 王倩倩,吕顺,陆剑锋,姜绍通,林琳. 中国粮油学报. 2015(09)
[8]血管紧张素转化酶抑制二肽抑制ACE作用的柔性分子对接[J]. 管骁,刘静,苏淅娜,韩飞,王文高,申瑞玲,李景军,廖丽丽. 食品科学. 2015(05)
[9]类蛋白反应修饰海地瓜酶解物及ACE抑制肽的制备[J]. 沈晴晴,曾名湧,赵元晖. 高等学校化学学报. 2014(05)
[10]罗非鱼鱼皮抗氧化肽的制备及分离纯化[J]. 庄永亮,张玉锋. 昆明理工大学学报(自然科学版). 2014(01)
博士论文
[1]泥鳅蛋白源ACE抑制肽的酶法制备及其降压活性研究[D]. 李莹.南京农业大学 2012
[2]螺旋藻活性肽的纯化、鉴定及降压、护肝机制研究[D]. 鲁军.北京林业大学 2010
[3]超声对酶法制备小麦胚芽ACE抑制肽的影响及其作用机理[D]. 贾俊强.江苏大学 2009
硕士论文
[1]醋豆降压肽的制备及其降压活性研究[D]. 张月圆.北京中医药大学 2018
[2]罗非鱼皮胶原蛋白降尿酸活性肽的研究[D]. 盛周煌.华南理工大学 2018
[3]沙丁鱼血管紧张素转化酶抑制肽的制备、分离纯化及功效研究[D]. 黄嘉成.暨南大学 2016
[4]鲢鱼蛋白制备ACE抑制肽的酶解工艺及其活性研究[D]. 尹歆.湖南农业大学 2012
[5]甘薯ACE抑制肽的制备及其降血压活性研究[D]. 王硕.中国农业科学院 2011
[6]鲢鱼蛋白酶解物的功能性质、抗氧化活性及其ACE抑制肽的制备[D]. 郭浩楠.浙江工商大学 2011
本文编号：3585417
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