高粱抗性淀粉介导肠道菌群调节绝经大鼠脂代谢
发布时间：2022-01-13 14:06
雌马酚作为大豆苷元的代谢产物,对比大豆苷元具有更高的生物活性与雌激素受体相结合,在人体中可以降低心血管疾病、骨质疏松症、乳腺癌、非酒精性脂肪肝等疾病发病率,而相关研究结果表明,食物组成极大的影响了肠道中雌马酚的形成,在可以刺激发酵的非淀粉多糖较高环境下,肠道菌能够迅速而完整的把大豆苷元转化为雌马酚,因此通过改善日粮方式来提高雌马酚产量以减轻绝经后女性肥胖具有较大的发展前景。本实验研究目的在于通过高粱（Sorghum）抗性淀粉对绝经大鼠肠道菌群结构的调节作用,进而探究抗性淀粉与豆制品协同对绝经大鼠脂代谢的影响,并探讨其调节机制。实验将高粱进行自然发酵8天,以增加高粱直链淀粉含量及回生值指标,利用碱提法提取高粱淀粉,通过压热复合酶法制备抗性淀粉,通过凝胶色谱-示差-多角度激光光散射仪、傅里叶红外光谱、X-射线衍射仪及扫描电镜等研究发酵预处理前后高粱抗性淀粉的结构变化;通过体内动物试验即利用SD（Sprague-Dawley）大鼠,建立福美司坦绝经模型,并日常灌胃抗性淀粉,以是否给予含豆粕饲料为影响因素,通过大鼠体重、肝脏重量及腹脂数,肠道菌群结构变化,血脂生化六项、肝脏脂类相关酶活性及所表...
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
直链淀粉标准曲线
材料与方法17标准曲线的回归方程为：y=0.1095x-0.1285,R2=0.9973图2-2葡萄糖标准曲线的绘制Fig2-2DrawingofglucoseStandardCurves(2)抗性淀粉含量的测定称取2.000g粗提的发酵前后高粱抗性淀粉样品于150mL三角瓶中，添加HCI-KCI缓冲溶液（pH值2.0-4.0），加入0.1mL胃蛋白酶（1g/100mL），60℃水浴1h后取出调pH至5.4；加1%耐高温α-淀粉酶2mL，90℃水浴l.5h；冷却至室温后调pH至4.1~4.3，加0.01%葡萄糖淀粉酶1mL，40℃水浴12h；加入四倍体积分数的无水乙醇进行醇沉，4000r/min条件下进行离心20min，得到沉淀用80%乙醇洗涤3-4次；利用浓度为2mol/LKOH使沉淀溶解，调pH至4.1~4.3；加0.01%葡萄糖淀粉酶1mL，40℃恒温条件下进行酶解45min，在沸水浴中进行过加热处理5min，取出后利用冷水进行冷却，在4000r/min条件下进行离心处理20min，将离心得到的上清液进行保留，沉淀利用蒸馏水进行水洗2次，离心收集并后合并上清液转移至容量为100mL的容量瓶，利用蒸馏水进行定容。按照(1)中方法进行上清液中还原糖含量的测定，得到数据乘以0.9即为抗性淀粉量[53]，得抗性淀粉的得率。%100MM%/0Y式中：Y为抗性淀粉得率；M为抗性淀粉的质量；M0为高粱发酵前后淀粉干基重量。2.2.2.3发酵对高粱抗性淀粉分子量的影响
结果与分析233结果与分析3.1自然发酵对高粱理化性质的影响3.1.1发酵对高粱直链淀粉含量的影响直链淀粉的相对百分含量直接或间接影响淀粉的理化性质[20]，即直链淀粉直接影响着淀粉的老化性质，因此将未发酵和不同发酵时期的高粱淀粉进行直链淀粉含量的测定，其结果如图3-1：淀粉中直链淀粉百分含量约15%~25%[60]，随着发酵时间的延长，发酵样品中直链淀粉的含量先降低后增加，其发生原因可能是发酵初期发酵液中的微生物进行生长，营养物质大量溶出，直链淀粉发生部分外溶现象，但随着发酵时间的延长使部分支链淀粉发生一定程度的降解、脱支，直链淀粉含量出现明显小幅度的回升趋势，且略高于未发酵样品直链淀粉含量。而袁美兰等[61]对自然发酵玉米直链淀粉含量的变化结果表明发酵使直链淀粉变化趋势不显著，两结果不同的原因可能是原料的不同或随着发酵时间的延长高粱中的脂肪、蛋白质发生一定程度的降解，使直链淀粉含量升高[50]。图3-1自然发酵对高粱直链淀粉含量的影响Fig3-1EffectofNaturalFermentationonAmyloseContentinSorghum3.1.2发酵对高粱淀粉老化指标的影响高粱在一定温度、加糖量的条件下进行自然发酵并与未发酵高粱淀粉进行对比，其RVA特征值有明显变化（表3-1），结果与袁美兰[62]等人所研究结果相似。淀粉是以葡萄糖聚合物的形式存在，高粱中的蛋白质及脂肪组织将淀粉进行包裹，使淀粉吸水膨胀受到一定程度的抑制，发酵可使蛋白质和脂肪发生一定程度的降解，淀粉吸
【参考文献】：
期刊论文
[1]自然发酵对高粱淀粉理化性质的影响[J]. 葛云飞,康子悦,沈蒙,王维浩,曹龙奎. 中国粮油学报. 2018(07)
[2]凝胶色谱-十八角激光光散射联用测定聚丙烯酰胺的相对分子质量及其分布[J]. 李方方,李先国,法芸,刘颖慧,王鑫,赵海杰,张经华. 化学世界. 2016(08)
[3]绝经后妇女激素替代治疗是否早期干预效果才好[J]. 李明洲,何青. 中国心血管杂志. 2013(04)
[4]超声波作用对小麦抗性淀粉形成影响[J]. 刘树兴,问燕梅. 粮食与油脂. 2013(07)
[5]高粱米不同溶剂提取物的抗氧化活性研究[J]. 刘禹,段江莲,李为琴,张梅庆,琚裕杰. 中国粮油学报. 2013(06)
[6]微波湿热处理对马铃薯抗性淀粉含量及性质的影响[J]. 牛黎莉,张盛贵,郭奕乔,王金鹏. 食品工业科技. 2013(14)
[7]压热法结合反复冻融制备小麦抗性淀粉及其理化性质研究[J]. 唐雪娟,刘丽斌,黄继红,王娟. 现代食品科技. 2013(03)
[8]几种薯类与豆类抗性淀粉的抗消化性及其益生效应[J]. 曾红华,谢涛,杨莉,张林奇,杨阳,张淑远. 中国粮油学报. 2012(11)
[9]甘薯抗性淀粉对高脂血症大鼠降脂利肝作用研究[J]. 于淼,邬应龙. 食品科学. 2012(01)
[10]不同直链/支链比的玉米淀粉分子质量及其构象[J]. 张攀峰,陈玲,李晓玺,李琳,刘国琴,苏健裕. 食品科学. 2010(19)
博士论文
[1]薏苡仁抗性淀粉结构特性及其对肠道菌群调节机制的研究[D]. 包辰.福建农林大学 2017
[2]鹰嘴豆抗性淀粉的制备、理化性质和肠道益生特性研究[D]. 孙永康.南京农业大学 2014
[3]猪肠道微生物产雌马酚能力与日粮乳果糖效用研究[D]. 郑卫江.南京农业大学 2013
[4]雌激素在肝脏糖脂代谢中的作用机制研究[D]. 王晓琳.上海交通大学 2012
[5]乳酸菌发酵改善米粉食用品质机理的研究[D]. 闵伟红.中国农业大学 2003
硕士论文
[1]不同方法制备的莲子抗性淀粉性质及其体外益生元作用的研究[D]. 吴小婷.福建农林大学 2015
[2]抗性淀粉对小鼠肠道菌群的影响以及作用机制的研究[D]. 方建东.浙江工商大学 2014
[3]发酵大米理化特性变化与米粉品质形成机理[D]. 陶华堂.河南工业大学 2013
[4]莲子抗性淀粉制备、性质及其对双歧杆菌增殖效应的研究[D]. 汪颖.福建农林大学 2013
[5]猪肠道大豆苷原降解菌分离及其性质研究[D]. 张逊.南京农业大学 2007
本文编号：3586568
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
直链淀粉标准曲线
材料与方法17标准曲线的回归方程为：y=0.1095x-0.1285,R2=0.9973图2-2葡萄糖标准曲线的绘制Fig2-2DrawingofglucoseStandardCurves(2)抗性淀粉含量的测定称取2.000g粗提的发酵前后高粱抗性淀粉样品于150mL三角瓶中，添加HCI-KCI缓冲溶液（pH值2.0-4.0），加入0.1mL胃蛋白酶（1g/100mL），60℃水浴1h后取出调pH至5.4；加1%耐高温α-淀粉酶2mL，90℃水浴l.5h；冷却至室温后调pH至4.1~4.3，加0.01%葡萄糖淀粉酶1mL，40℃水浴12h；加入四倍体积分数的无水乙醇进行醇沉，4000r/min条件下进行离心20min，得到沉淀用80%乙醇洗涤3-4次；利用浓度为2mol/LKOH使沉淀溶解，调pH至4.1~4.3；加0.01%葡萄糖淀粉酶1mL，40℃恒温条件下进行酶解45min，在沸水浴中进行过加热处理5min，取出后利用冷水进行冷却，在4000r/min条件下进行离心处理20min，将离心得到的上清液进行保留，沉淀利用蒸馏水进行水洗2次，离心收集并后合并上清液转移至容量为100mL的容量瓶，利用蒸馏水进行定容。按照(1)中方法进行上清液中还原糖含量的测定，得到数据乘以0.9即为抗性淀粉量[53]，得抗性淀粉的得率。%100MM%/0Y式中：Y为抗性淀粉得率；M为抗性淀粉的质量；M0为高粱发酵前后淀粉干基重量。2.2.2.3发酵对高粱抗性淀粉分子量的影响
结果与分析233结果与分析3.1自然发酵对高粱理化性质的影响3.1.1发酵对高粱直链淀粉含量的影响直链淀粉的相对百分含量直接或间接影响淀粉的理化性质[20]，即直链淀粉直接影响着淀粉的老化性质，因此将未发酵和不同发酵时期的高粱淀粉进行直链淀粉含量的测定，其结果如图3-1：淀粉中直链淀粉百分含量约15%~25%[60]，随着发酵时间的延长，发酵样品中直链淀粉的含量先降低后增加，其发生原因可能是发酵初期发酵液中的微生物进行生长，营养物质大量溶出，直链淀粉发生部分外溶现象，但随着发酵时间的延长使部分支链淀粉发生一定程度的降解、脱支，直链淀粉含量出现明显小幅度的回升趋势，且略高于未发酵样品直链淀粉含量。而袁美兰等[61]对自然发酵玉米直链淀粉含量的变化结果表明发酵使直链淀粉变化趋势不显著，两结果不同的原因可能是原料的不同或随着发酵时间的延长高粱中的脂肪、蛋白质发生一定程度的降解，使直链淀粉含量升高[50]。图3-1自然发酵对高粱直链淀粉含量的影响Fig3-1EffectofNaturalFermentationonAmyloseContentinSorghum3.1.2发酵对高粱淀粉老化指标的影响高粱在一定温度、加糖量的条件下进行自然发酵并与未发酵高粱淀粉进行对比，其RVA特征值有明显变化（表3-1），结果与袁美兰[62]等人所研究结果相似。淀粉是以葡萄糖聚合物的形式存在，高粱中的蛋白质及脂肪组织将淀粉进行包裹，使淀粉吸水膨胀受到一定程度的抑制，发酵可使蛋白质和脂肪发生一定程度的降解，淀粉吸
【参考文献】：
期刊论文
[1]自然发酵对高粱淀粉理化性质的影响[J]. 葛云飞,康子悦,沈蒙,王维浩,曹龙奎. 中国粮油学报. 2018(07)
[2]凝胶色谱-十八角激光光散射联用测定聚丙烯酰胺的相对分子质量及其分布[J]. 李方方,李先国,法芸,刘颖慧,王鑫,赵海杰,张经华. 化学世界. 2016(08)
[3]绝经后妇女激素替代治疗是否早期干预效果才好[J]. 李明洲,何青. 中国心血管杂志. 2013(04)
[4]超声波作用对小麦抗性淀粉形成影响[J]. 刘树兴,问燕梅. 粮食与油脂. 2013(07)
[5]高粱米不同溶剂提取物的抗氧化活性研究[J]. 刘禹,段江莲,李为琴,张梅庆,琚裕杰. 中国粮油学报. 2013(06)
[6]微波湿热处理对马铃薯抗性淀粉含量及性质的影响[J]. 牛黎莉,张盛贵,郭奕乔,王金鹏. 食品工业科技. 2013(14)
[7]压热法结合反复冻融制备小麦抗性淀粉及其理化性质研究[J]. 唐雪娟,刘丽斌,黄继红,王娟. 现代食品科技. 2013(03)
[8]几种薯类与豆类抗性淀粉的抗消化性及其益生效应[J]. 曾红华,谢涛,杨莉,张林奇,杨阳,张淑远. 中国粮油学报. 2012(11)
[9]甘薯抗性淀粉对高脂血症大鼠降脂利肝作用研究[J]. 于淼,邬应龙. 食品科学. 2012(01)
[10]不同直链/支链比的玉米淀粉分子质量及其构象[J]. 张攀峰,陈玲,李晓玺,李琳,刘国琴,苏健裕. 食品科学. 2010(19)
博士论文
[1]薏苡仁抗性淀粉结构特性及其对肠道菌群调节机制的研究[D]. 包辰.福建农林大学 2017
[2]鹰嘴豆抗性淀粉的制备、理化性质和肠道益生特性研究[D]. 孙永康.南京农业大学 2014
[3]猪肠道微生物产雌马酚能力与日粮乳果糖效用研究[D]. 郑卫江.南京农业大学 2013
[4]雌激素在肝脏糖脂代谢中的作用机制研究[D]. 王晓琳.上海交通大学 2012
[5]乳酸菌发酵改善米粉食用品质机理的研究[D]. 闵伟红.中国农业大学 2003
硕士论文
[1]不同方法制备的莲子抗性淀粉性质及其体外益生元作用的研究[D]. 吴小婷.福建农林大学 2015
[2]抗性淀粉对小鼠肠道菌群的影响以及作用机制的研究[D]. 方建东.浙江工商大学 2014
[3]发酵大米理化特性变化与米粉品质形成机理[D]. 陶华堂.河南工业大学 2013
[4]莲子抗性淀粉制备、性质及其对双歧杆菌增殖效应的研究[D]. 汪颖.福建农林大学 2013
[5]猪肠道大豆苷原降解菌分离及其性质研究[D]. 张逊.南京农业大学 2007
本文编号：3586568
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