白酒糟中ACE抑制肽的鉴定与活性探究

发布时间：2023-06-13 22:26

　　白酒糟是高粱等农作物蒸煮加曲后经固态发酵、蒸馏后的残渣,含有较丰富的营养成分,是一种非常具有利用价值的资源。早期的研究大都集中在白酒糟的理化指标以及基本营养成分,而对其多肽组分尤其是血管紧张素转换酶(angiotensin-I-converting enzyme,ACE)抑制肽成分的研究却未见报道。世界卫生组织(world health organization,WHO)认定高血压是心血管疾病重要来源,ACE抑制肽由于其对ACE的抑制能力因而对降血压有一定效果。近年来已有在酒醅和白酒中发现ACE抑制肽的报道,故白酒糟中很可能存在较多的ACE抑制肽。因此,本课题以三大香型之一的中国浓香型白酒糟为研究对象,以ACE抑制活性为导向采用超滤、大孔树脂吸附层析和反相高效液相色谱法(reversed phase performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离制备白酒糟中的多肽组分,并结合超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(ultra-performance liquid chromatography-quadrupole-time-of-fligh...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语中英文对照表
第一章 绪论
    1.1 立题背景和依据
    1.2 白酒糟成分及其综合化利用研究进展
        1.2.1 白酒糟的常规成分
        1.2.2 白酒糟的综合化利用
    1.3 ACE抑制肽
        1.3.1 ACE与 ACE抑制剂的作用机制
        1.3.2 ACE抑制肽的产生
        1.3.3 评价ACE抑制肽活性的方法
        1.3.4 ACE抑制肽的分离纯化、结构鉴定的方法
    1.4 国内外关于酒糟ACE抑制肽的研究进展
    1.5 课题研究的主要目标和内容
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 浓香型白酒糟样品
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 游离态多肽的提取
        2.2.2 游离态多肽的超滤分离
        2.2.3 大孔吸附树脂对游离态多肽的分级洗脱与除杂
        2.2.4 UPLC-Q-TOF-MS鉴定游离态多肽结构
        2.2.5 多肽的微生物溯源分析
        2.2.6 体外ACE抑制活性及其IC₅₀的测定
        2.2.7 DDSG-PI的制备
        2.2.8 蛋白含量及其氨基酸组成分析
        2.2.9 酶解液的制备
        2.2.10 酶解液DH的测定
        2.2.11 酶解液的超滤分离
        2.2.12 半制备RP-HPLC分离
        2.2.13 UPLC-Q-TOF-MS鉴定结合态多肽结构
        2.2.14 UPLC-QQQ-MS定量ACE抑制肽及其条件优化
        2.2.15 多肽的抑制模式研究
        2.2.16 多肽与ACE的分子对接
第三章 结果与讨论
    3.1 白酒糟游离态ACE抑制肽分析
        3.1.1 大孔吸附树脂的选择
        3.1.2 不同洗脱组分ACE抑制活性分析
        3.1.3 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS手动鉴定酒糟游离态多肽
        3.1.4 ACE抑制肽的微生物溯源分析
    3.2 白酒糟结合态ACE抑制肽分析
        3.2.1 蛋白含量及其氨基酸组成
        3.2.2 不同酶制剂酶解液DH及其与ACE抑制活性分析
        3.2.3 半制备RP-HPLC不同洗脱组分与ACE抑制活性分析
        3.2.4 ACE抑制肽的定性分析
        3.2.5 ACE抑制肽的IC₅₀值和定量分析
    3.3 多肽的ACE抑制模式分析
    3.4 分子对接结果分析
主要结论与展望
    主要结论
    展望
致谢
参考文献
附录:作者在硕士期间发表的论文



本文编号：3833417