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青藏高原传统发酵牦牛乳中乳酸菌的多样性及抗氧化特性研究

发布时间:2023-10-22 12:29
  青藏高原环境条件极端,具体表现为强紫外、低氧等,但在此极端条件下的发酵牦牛奶中确蕴藏着丰富的乳酸菌资源。本试验材料来源于2012年和2013年在青藏高原祁连青东高山盆地针叶林、草原区,羌塘高原湖盆高寒草原区、果洛那曲高原山地高寒灌丛草甸区,藏南高山谷地灌丛草原区和藏东高山深谷针叶林区等5个生态地理区采集的牦牛酸奶样品,共55个地区,241份牦牛酸奶样品中分离的乳酸菌。试验将2012年和2013年牦牛酸奶样品中分离的乳酸菌进行纯化、16S rRNA基因序列测定,共鉴定乳酸菌1912株,建立了青藏高原发酵牦牛乳最大的乳酸菌种质资源库之一,并对青藏高原发酵牦牛乳中乳酸菌的多样性及其抗氧化性能进行了研究。本试验利用16S rRNA基因序列测定共鉴定乳酸菌1912株,隶属于7个属,28个种或亚种。其中乳杆菌属(Lactobacillus)有1017株,占所分离菌株的53.19%;片球菌属(Pediococcus)为617株,占比32.27%;肠球菌属(Enterococcus)和明串珠菌属(Leuconostoc)分别为244和27株,占比12.76%和1.41%;链球菌属(Streptococ...

【文章页数】:63 页

【学位级别】:硕士

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中文摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 青藏高原传统发酵牦牛乳概述
    1.2 乳酸菌的多样性
        1.2.1 乳酸菌概述和分类
        1.2.2 传统发酵牦牛乳的微生物组成及多样性
    1.3 乳酸菌的抗氧化作用
        1.3.1 自由基定义及危害
        1.3.2 天然抗氧化剂
        1.3.3 乳酸菌的抗氧化活性研究现状
    1.4 立题背景与意义
    1.5 研究内容
    1.6 技术路线
第二章 传统发酵牦牛酸奶乳酸菌多样性研究
    2.1 引言
    2.2 材料与仪器
        2.2.1 试验菌株
        2.2.2 主要仪器及试剂
        2.2.3 培养基
    2.3 试验方法
        2.3.1 乳酸菌菌种的纯化与保存
        2.3.2 乳酸菌总DNA的提取
        2.3.3 乳酸菌16srRNA基因序列扩增
        2.3.4 序列比对
        2.3.5 Species-specific PCR
        2.3.6 数据统计及分析
    2.4 试验结果
        2.4.1 青藏高原传统发酵牦牛乳中菌株的纯化保存
        2.4.2 青藏高原传统发酵牦牛乳中乳酸菌的多样性
        2.4.3 不同生态区乳酸菌的多样性分析(种水平)
    2.5 讨论
    2.6 本章小结
第三章 青藏高原牦牛酸奶中高抗氧化乳酸菌的筛选
    3.1 引言
    3.2 材料与仪器
        3.2.1 试验菌株
        3.2.2 主要仪器及试剂
        3.2.3 培养基及缓冲液
    3.3 试验方法
        3.3.1 乳酸菌H2O2耐受能力的测定
        3.3.2 乳酸菌菌体细胞、无细胞提取物和发酵上清液的制备
        3.3.3 乳酸菌DPPH自由基清除能力的测定
        3.3.4 乳酸菌OH自由基清除能力的测定
        3.3.5 乳酸菌O2
-清除能力的测定
        3.3.6 乳酸菌还原能力的测定
        3.3.7 乳酸菌总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定
        3.3.8 数据统计及分析
    3.4 试验结果
        3.4.1 乳酸菌H2O2耐受能力的测定
        3.4.2 乳酸菌DPPH自由基清除能力的测定
        3.4.3 乳酸菌OH自由基清除能力的测定
        3.4.4 乳酸菌对O2
-清除能力的测定
        3.4.5 乳酸菌还原能力的测定
        3.4.6 乳酸菌发酵上清液总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定
    3.5 讨论
    3.6 本章小结
第四章 高抗氧化特性乳酸菌体外益生特性的研究
    4.1 引言
    4.2 材料与仪器
        4.2.1 试验菌株
        4.2.2 主要仪器及试剂
        4.2.3 培养基及缓冲液
    4.3 试验方法
        4.3.1 耐酸性试验
        4.3.2 疏水性试验
        4.3.3 耐胆盐试验
        4.3.4 模拟胃液试验
        4.3.5 模拟肠液试验
        4.3.6 数据统计及分析
    4.4 试验结果
        4.4.1 耐酸性试验结果
        4.4.2 疏水性试验结果
        4.4.3 耐胆盐试验结果
        4.4.4 模拟胃液试验结果
        4.4.5 模拟肠液试验结果
    4.5 讨论
    4.6 本章小结
第五章 结论与展望
参考文献
在学期间的研究成果
致谢



本文编号:3856520

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