纳豆芽胞杆菌中MenA的异源过表达
【图文】:
维生素E、紫草素和异戊烯类黄酮等的生物合成PI,该种类型的蛋白酶一级结构逡逑中均含有一段与异戊烯结合有关的天冬氨酸结构域序列(N/D)DXXD,空间结构逡逑一般为a螺旋组成的多个跨膜结构域,见图1-2邋(a),催化反应需要二价金属离逡逑子Mg2+或Mn2+等参与[22],将疏水性的异戊烯侧链转移到芳香族化合物主链上,逡逑发生傅克-院基化反应,且仅催化C-异戊烯基化反应,其中UbiA酶的晶体结构逡逑己经被报道,空间结构为由9个跨膜螺旋组成一个催化活性有关的活性中心腔,逡逑并穿插在细胞膜的胞质膜上[23]。尽管膜结合型芳香族异戊烯转移酶具有重要的逡逑生物学意义,但由于难以实现高产量的过表达以及不易用生物化学方法处理这些逡逑3逡逑I逡逑
来源于真菌和细菌,该类蛋白酶是可溶性的,氨基酸的一级结构不包含天冬氨酸逡逑模体,空间结构为特殊的a-p-p-a组成的PT桶状结构,其中a螺旋包围p桶状逡逑结构,并且由十个反向平行的P折叠片层构成的全新构象,见图1-2邋(b),另外逡逑P桶状结构中含有底物结合口袋[25,26],部分酶催化反应时并不需要Mg2+等离子逡逑的参与,而且催化形成C-C键,C-0键,(:以键[21,27],近年来,水溶性异戊烯逡逑转移酶相比较膜结合型异戊烯转移酶,易于异源过表达,所以研究较为普遍[23]。逡逑大肠杆菌中EcMenA由Shineberg和Young等人发现,,在法尼焦磷酸和镁离逡逑子存在条件下,该酶可以将大肠杆菌粗膜中DHNA转换成MK或DMK[28]。随逡逑后K.邋SUVARNA等通过分子生物学技术,鉴定了邋EcMenA是一段含有308密码逡逑子开放阅读框,定位于基因组和g//成之间的2.0kb区域[29]。文献研究表明,逡逑MenA属于膜结合型芳香族异戊烯转移酶UbiA超家族成员[1
【学位授予单位】:安徽工程大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:Q78
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本文编号:2611498
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