短黄杆菌3J2MO降解黄曲霉毒素研究

发布时间：2020-10-14 14:37

　　 黄曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)是由黄曲霉、寄生曲霉和特曲霉等曲霉属真菌产生的次生代谢产物,是对人类健康和社会经济发展危害程度排在第一位的真菌毒素。生物降解黄曲霉毒素方法具有高效性、安全性、环境友好性等一系列优势,成为近年来研究人员关注的热点。为探寻可用于实际生产的黄曲霉毒素生物脱毒剂,本研究选择一株短黄杆菌3J2MO,对其降解黄曲霉毒素的能力进行研究:1.研究探明短黄杆菌3J2MO具降解多种黄曲霉毒素的能力。将菌株3J2MO与系列浓度的不同种类黄曲霉毒素及其前体杂色曲霉毒素混合培养5 d,测定并计算毒素降解率。结果显示,在菌株3J2MO处理下,黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1和杂色曲霉毒素均发生了降解,每毫升菌液对五种黄曲霉毒素的降解量均可达500 ng以上,研究及文献比对结果表明,短黄杆菌3J2MO是目前能高效降解黄曲霉毒素种类最多的菌株,为农产品黄曲霉毒素污染减控提供了新的材料。2.研究明确了短黄杆菌3J2MO及其降解黄曲霉毒素B1产物发酵液的安全性。通过小鼠急性腹腔注射致病性试验,测定了菌株3J2MO及其降解黄曲霉毒素B1产物发酵液的致病性,结果显示二者无致病性;通过大鼠急性经口毒性试验测定二者的急性经口毒性,结果表明二者急性经口毒性属微毒级别;通过大鼠急性经皮毒性试验测定菌株3J2MO及其降解黄曲霉毒素B1产物发酵液的急性经皮毒性,结果显示二者急性经皮毒性水平属低毒级别。研究结果表明,短黄杆菌3J2MO降解农产品黄曲霉毒素具有高效、安全的特点,具有重要开发价值。3.研究建立了花生粕中黄曲霉毒素短黄杆菌3J2MO固态发酵法安全降解技术。通过单因素研究,探明菌液培养时间、样品培养时间、菌液接种量三个因素是菌株3J2MO降解花生粕中黄曲霉毒素的主要影响因素。通过响应面试验分析法,最终确定花生粕中黄曲霉毒素短黄杆菌3J2MO固态发酵法安全降解技术,即菌液培养时间29.04 h,样品培养时间78.72 h,菌液接种量4.12 mL(菌浓度为2.39*10~9 cfu/mL)。应用建立的黄曲霉毒素短黄杆菌3J2MO安全降解技术,花生粕中黄曲霉毒素降解率可达71.95%。本研究为农产品中黄曲霉毒素污染减控提供了高效、安全的新方法。4.测定了短黄杆菌3J2MO全基因组序列并探寻候选降解酶。对菌株3I2MO进行全基因组测序并组装,测序结果表明该菌株基因组由一条环化的染色体组成,没有质粒,基因组大小约3.99Mbp,对功能基因进行注释并分析,初步定位了一种可能的黄曲霉毒素降解酶,为降解机理的揭示提供了科学依据。本文研究结果表明,短黄杆菌3J2MO为开发农产品黄曲霉毒素脱毒剂提供了新途径。
【学位单位】：中国农业科学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：TS201.3
【部分图文】：

解率随时间和毒素含量变化的趋势 为例，研究短黄杆菌 3J2MO 降解黄曲霉毒素效率随时间和毒素含量FB1 标准溶液与供试菌株短黄杆菌 3J2MO 发酵液于 10 mL LB 液体终质量浓度设置为 50、100、200、500、1000 ng/mL，菌液终浓度为（28oC，200 r/min）中培养，分别于第 0、6、12、24、48、72、96、，其余条件同 2.3.2.1。分析rosoft Excel 2010 和 SAS 9.2 软件进行数据分析，结果以均值和标准差差分析法和 Duncan 多重比较法对均值进行分析比较，当 P<0.05，认、b、c、d 来表示不同的显著性水平。本章研究中以实验室保存的一得大肠杆菌对黄曲霉毒素的降解率范围是-0.4%~0.96%。菌 3J2MO 降解毒素的种类范围研究菌 3J2MO 对 AFB1 降解能力的探究

硕士学位论文 第二章 短黄杆菌3J2MO对不同种类黄曲霉毒素及杂色曲霉素黄杆菌 3J2MO 对黄曲霉毒素 B1 的作用效果，将菌株发酵液与黄曲培养基中混合后置于恒温摇床中（28oC，200 r/min）共培养（初始毒素浓度为 100 ng/mL），5 d 后测得黄曲霉毒素 B1 含量变为 6.18 ng1 含量具有显著性差异，降解率高达 93.82%，足以证明该菌株具有菌 3J2MO 对 AFB2 降解能力的探究

图 2.2AFB2 降解前后毒素含量变化Figure 2.2 Changes of AFB2 concentration before and after degradation黄杆菌 3J2MO 对黄曲霉毒素 B2 的作用效果，将菌株发酵液与黄曲 LB 培养基中混合后置于恒温摇床中（28oC，200 r/min）共培养（初始素浓度为 100 ng/mL），5 d 后黄曲霉毒素 B2 含量发生了显著变化，变以应用于黄曲霉毒素 B2 的降解，且降解效率达到 90%以上。菌 3J2MO 对 AFG1 降解能力的探究
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本文编号：2840797