类弹性蛋白的设计、制备与性能研究

发布时间：2020-12-04 14:08

　　类弹性蛋白（Elastin-Like Polypeptides,ELPs）是一种参照弹性蛋白中高度重复序列、通过基因工程技术构建的由五肽重复序列Val-Pro-Gly-Xaa-Gly（VPGXG）n串联重复而成的多肽,其中Xaa称为客座残基,是除了Pro以外的任意一种氨基酸,Xaa和重复次数n不同,则ELPs不同。ELPs与天然弹性蛋白相似,具有良好的细胞相容性,在体内可降解为天然氨基酸,免疫排斥反应低。当外界温度低于相变温度时,ELPs处于溶解状态,当外界温度高于相变温度（Transition temperature,Tt）时,ELPs自动聚集,从溶液中析出形成沉淀,该特性被称为相转变特性,已被广泛用于组织工程材料、药物靶向递送和蛋白纯化研究。课题组的前期工作已经构建了多种序列组成ELPs,但是其相转变温度较高,用作药物递送载体或组织工程材料的潜力不大,也难以实现廉价的相变循环纯化。因此,本课题的目的是在文献资料基础上,设计、构建、筛选相转变温度较低、生物相容性较好的ELPs,为研制药物靶向递送载体、组织工程材料分子奠定基础。目的:筛选出相变温度接近体温、生物活性较好的ELPs。方法... 

【文章来源】：西北大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

BglⅠ酶切检测结果

2 Nco Ⅰ& Xho Ⅰ双酶切检测结果未酶切的 pUC18; 2-7: Nco Ⅰ& Xho Ⅰ对突变的 pUC18 质粒进行检测，电粒未被切开，泳道中只出现一条pUC18 载体中的 Bgl Ⅰ酶切位点18 质粒被切开，泳道中出现两条 pUC18 载体中成功引入 Nco Ⅰ酶切的 pUC18 质粒被切开，泳道0bp，说明多克隆位点起始处的 酶切的 pUC18 质粒被切开，泳道bp~3000bp，引入的 Nco Ⅰ酶切位ar Ⅰ之后，因此 pUC18 载体可以

图 3 多种限制性内切酶酶切检测结果AMarker Ⅲ; 1: 未酶切的 pUC18; 2: Bgl Ⅰ单酶切; 3: Nco Ⅰ& Xho Ⅰo Ⅰ双酶切; 5: Nco Ⅰ& Nar Ⅰ双酶切; 6: BamH Ⅰ& Hind Ⅲ双酶切;Ⅰ双酶切; 8: Nco Ⅰ& Pst Ⅰ双酶切; 9: Nco Ⅰ& Kpn Ⅰ双酶切隆载体突变测序结果功的 pUC18 载体质粒送至上海生工生物工程有限公司进行示，突变后的 pUC18 载体全长为 2689bp，引入的 Nco Ⅰ、gl Ⅰ酶切位点与预期结果完全相同。经过 DNAMAN 软件的 次突变，但不影响这种 pUC18 克隆载体的正常拷贝。

【参考文献】：
期刊论文
[1]类弹性蛋白多肽的分子动力学研究[J]. 张光亚,陈智山,李红春,黄凯宗.  计算机与应用化学. 2011(04)
[2]类弹性蛋白多肽及其在生物医学材料的应用[J]. 黄凯宗,王文研,张光亚.  中国生物工程杂志. 2010(05)

硕士论文
[1]类弹性蛋白融合止血肽RADA-16的止血性能研究[D]. 杨莎莎.西北大学 2018
[2]类弹性蛋白—碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白的制备及活性研究[D]. 魏琪.西北大学 2016
[3]类人弹性蛋白—碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白的原核表达、分离纯化和生物性能研究[D]. 赵轶君.西北大学 2014



本文编号：2897739