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IL-17A对成骨细胞系MC3T3-E1细胞中明胶酶表达的影响及其作用机制

发布时间:2021-05-06 15:53
  目的检测IL-17A对MC3T3-E1细胞中明胶酶表达的影响,并探讨其作用机制。方法采用小鼠重组细胞因子IL-17A作用于MC3T3-E1细胞,通过Real-time PCR和ELISA分别检测MMP-2及MMP-9在mRNA水平及蛋白水平上的表达情况;通过免疫荧光和Western Blot检测NF-κB的磷酸化水平的变化,并通过使用NF-κB阻断剂检测其在MMP-9表达中的影响。结果 IL-17A在mRNA水平及蛋白水平上均上调MMP-9的表达(P <0. 01),然而对MMP-2的表达无明显影响; IL-17A促进转录因子NF-κB的磷酸化水平(P <0. 01);阻断NFκB的活性可减弱IL-17A对MMP-9的上调作用(P <0. 05); IL-17A对MC3T3-E1细胞中TIMP-1及TIMP-2的表达没有影响。结论 IL-17A可以通过激活NF-κB促进MC3T3-E1细胞分泌MMP-9。 

【文章来源】:滨州医学院学报. 2020,43(03)

【文章页数】:5 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 试剂
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 MC3T3-E1细胞毒性检测
        1.2.3 Real-time PCR检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的mRNA表达
        1.2.4 酶联免疫吸附实验检测MMP-2和MMP-9的蛋白表达
        1.2.5 细胞免疫荧光检测NF-κB入核情况
        1.2.6 Western Blot检测NF-κB磷酸化
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 IL-17A对MC3T3-E1细胞毒性的影响
    2.2 IL-17A上调MC3T3-E1细胞中MMP-9的表达
    2.3 IL-17A激活MC3T3-E1细胞NF-κB的活性
    2.4 阻断NF-κB的活性减弱IL-17A诱导的MMP-9的表达
    2.5 IL-17A对MC3T3-E1细胞中TIMP-1和TIMP-2的mRNA表达的影响
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
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本文编号:3172201

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