傅立叶变换离子回旋共振质谱分析生物样本中的溶血磷脂
发布时间：2021-06-24 04:06
溶血磷脂（LPLs）作为一种生物活性信号分子,在细胞内各种生命活动中发挥着重要作用。以往研究表明,生物体内LPLs与多种疾病的发生、发展密切相关,并可作为相关疾病潜在的生物标记物。研究生物样本中LPLs的测定方法对相关疾病的临床诊断、预防,特异性生物标记物的筛选意义重大。以LPLs作为目标物,利用傅里叶变换离子回旋共振质谱仪（FTICR-MS）,研究不同生物样品中LPLs的有效检测方法。主要实验研究如下:1.建立了FTICR-MS测定血浆样品中LPLs的方法;2.建立了基质辅助激光解吸/电离FTICR-MS（MALDI-FTICR-MS）分析血浆、肌肉样品中LPLs的方法;3.利用MALDI-FTICR质谱原位成像分析生物切片中LPLs的空间分布;4.制备特异性和生物相容性表面涂层固相微萃取（SPME）探针实现敞开式质谱下的生物活体及癌症组织中的LPLs检测。主要结论如下:（1）建立了FTICR-MS测定血浆样品中4种溶血磷脂酰胆碱（LPCs）的方法。血浆样品用甲醇-氯仿（9:1,V/V）提取,采用外标法定量分析。该方法在0.5100μg/L内线性关系良好,相关系...
【文章来源】：沈阳工业大学辽宁省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同提取溶剂对LPCs提取效率的影响
沈阳工业大学硕士学位论文16甲醇、甲醇-二氯甲烷(9:1，V/V)、甲醇-氯仿(9:1，V/V)对样品的提取效果。以血浆样品为例，由图2.1可知，甲醇对四种LPCs的提取效率最低，甲醇-氯仿(9:1，V/V)的提取效率最高，LPC15:0、LPC16:0、LPC18:0的响应值均明显增大，且杂质干扰较校为保证4种LPCs在生物样品中得到更好的提取，本文选择甲醇-氯仿(9:1，V/V)为最佳提取溶剂。图2.1不同提取溶剂对LPCs提取效率的影响Fig.2.1EffectofdifferentextractionsolventsonextractionefficiencyofLPCs2.3.2质谱条件的优化（1）检测模式的选择LPCs是一种带有正电荷的极性脂质，分子结构通式见图2.2。为确定质谱检测条件，本文首先对LPCs在质谱中的检测模式进行了优化。选取50μg/L的LPCs混合标准溶液，分别在电喷雾离子源的正离子模式和负离子模式下进行检测。结果显示，所得结果如图2.3所示。从质谱图中可以得知，4种LPCs在正离子模式下的响应均高于在负离子模式下的响应，为保证检测结果的灵敏度，本文选择正离子模式对LPCs进行检测。图2.2溶血磷脂酰胆碱(LPCs)的分子结构通式Fig.2.2Generalformulaofmolecularstructureoflysophosphatidylcholine(LPCs)
第2章FTICR-MS测定生物样品中的溶血磷脂酰胆碱17图2.3LPCs混合标准溶液(50μg/L)在正离子模式(A)和负离子模式(B)下的质谱图Fig.2.3Positive(A)andnegativeion(B)massspectraforLPCsmixedstandardsolution(50μg/L)（2）定量离子的选择为进一步确定四种LPCs的定量离子，保证分析结果的准确性，本文分别在碰撞诱导解离电压为30V的条件下对四种LPCs在混合标准溶液和血浆提取液中进行MS/MS分析，结果如图2.4所示。由该图可知，四种50μg/L的LPCs混合标准溶液(图4A)的主要二级质谱碎片为[M+Na-59]+，其主要是由于LPCs是一类含有N原子的化合物，其中氮原子上存在孤电子对容易加合钠离子，因此得到待测物的基峰离子均为[M+Na]+，进行MS/MS分析时，在碰撞能量的诱导下脱去三甲基丙胺基（59Da）,从而得到了二级碎片离子[M+Na-59]+。此外，该图中血浆提取液(图2.4B)的MS/MS质谱图中4种LPCs均能得到相应的二级碎片离子[M+Na-59]+，进一步证实了4种LPCs的定量离子为[M+Na]+。
【参考文献】：
期刊论文
[1]傅立叶变换离子回旋共振质谱法对赤灵芝的化学成分鉴定和指纹图谱研究[J]. 杨秋霞,杨运云,刘耀慧,向章敏,郭鹏然. 分析测试学报. 2019(05)
[2]溶血磷脂的制备、分离、检测及应用研究进展[J]. 李招,谷克仁,张海臣,潘丽,康世宗. 中国油脂. 2018(06)
[3]基质辅助激光解吸电离-傅里叶变换离子回旋共振质谱技术用于食用油中甘油三酯的快速分析[J]. 李卫峰,杨秋霞,林泽鹏,王李平,郭鹏然. 分析化学. 2018(03)
[4]脂质组学及其分析方法[J]. 刘虎威,白玉. 色谱. 2017(01)
[5]薄层色谱法检查脂肪乳注射液及卵磷脂中的溶血磷脂酰胆碱[J]. 黄媛,杨柳,王雪彦,晁若冰. 药物分析杂志. 2010(12)
[6]脂质组学研究方法及其应用[J]. 王涛,梅旭荣,钟秀丽,李玉中. 植物学报. 2010(02)
[7]GC／MS内标法测定蛋黄磷脂中花生四烯酸和二十二碳六烯酸含量[J]. 沈晓京,赖炳森,汪聪慧,董风霞. 药学学报. 1996(05)
本文编号：3246331
【文章来源】：沈阳工业大学辽宁省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同提取溶剂对LPCs提取效率的影响
沈阳工业大学硕士学位论文16甲醇、甲醇-二氯甲烷(9:1，V/V)、甲醇-氯仿(9:1，V/V)对样品的提取效果。以血浆样品为例，由图2.1可知，甲醇对四种LPCs的提取效率最低，甲醇-氯仿(9:1，V/V)的提取效率最高，LPC15:0、LPC16:0、LPC18:0的响应值均明显增大，且杂质干扰较校为保证4种LPCs在生物样品中得到更好的提取，本文选择甲醇-氯仿(9:1，V/V)为最佳提取溶剂。图2.1不同提取溶剂对LPCs提取效率的影响Fig.2.1EffectofdifferentextractionsolventsonextractionefficiencyofLPCs2.3.2质谱条件的优化（1）检测模式的选择LPCs是一种带有正电荷的极性脂质，分子结构通式见图2.2。为确定质谱检测条件，本文首先对LPCs在质谱中的检测模式进行了优化。选取50μg/L的LPCs混合标准溶液，分别在电喷雾离子源的正离子模式和负离子模式下进行检测。结果显示，所得结果如图2.3所示。从质谱图中可以得知，4种LPCs在正离子模式下的响应均高于在负离子模式下的响应，为保证检测结果的灵敏度，本文选择正离子模式对LPCs进行检测。图2.2溶血磷脂酰胆碱(LPCs)的分子结构通式Fig.2.2Generalformulaofmolecularstructureoflysophosphatidylcholine(LPCs)
第2章FTICR-MS测定生物样品中的溶血磷脂酰胆碱17图2.3LPCs混合标准溶液(50μg/L)在正离子模式(A)和负离子模式(B)下的质谱图Fig.2.3Positive(A)andnegativeion(B)massspectraforLPCsmixedstandardsolution(50μg/L)（2）定量离子的选择为进一步确定四种LPCs的定量离子，保证分析结果的准确性，本文分别在碰撞诱导解离电压为30V的条件下对四种LPCs在混合标准溶液和血浆提取液中进行MS/MS分析，结果如图2.4所示。由该图可知，四种50μg/L的LPCs混合标准溶液(图4A)的主要二级质谱碎片为[M+Na-59]+，其主要是由于LPCs是一类含有N原子的化合物，其中氮原子上存在孤电子对容易加合钠离子，因此得到待测物的基峰离子均为[M+Na]+，进行MS/MS分析时，在碰撞能量的诱导下脱去三甲基丙胺基（59Da）,从而得到了二级碎片离子[M+Na-59]+。此外，该图中血浆提取液(图2.4B)的MS/MS质谱图中4种LPCs均能得到相应的二级碎片离子[M+Na-59]+，进一步证实了4种LPCs的定量离子为[M+Na]+。
【参考文献】：
期刊论文
[1]傅立叶变换离子回旋共振质谱法对赤灵芝的化学成分鉴定和指纹图谱研究[J]. 杨秋霞,杨运云,刘耀慧,向章敏,郭鹏然. 分析测试学报. 2019(05)
[2]溶血磷脂的制备、分离、检测及应用研究进展[J]. 李招,谷克仁,张海臣,潘丽,康世宗. 中国油脂. 2018(06)
[3]基质辅助激光解吸电离-傅里叶变换离子回旋共振质谱技术用于食用油中甘油三酯的快速分析[J]. 李卫峰,杨秋霞,林泽鹏,王李平,郭鹏然. 分析化学. 2018(03)
[4]脂质组学及其分析方法[J]. 刘虎威,白玉. 色谱. 2017(01)
[5]薄层色谱法检查脂肪乳注射液及卵磷脂中的溶血磷脂酰胆碱[J]. 黄媛,杨柳,王雪彦,晁若冰. 药物分析杂志. 2010(12)
[6]脂质组学研究方法及其应用[J]. 王涛,梅旭荣,钟秀丽,李玉中. 植物学报. 2010(02)
[7]GC／MS内标法测定蛋黄磷脂中花生四烯酸和二十二碳六烯酸含量[J]. 沈晓京,赖炳森,汪聪慧,董风霞. 药学学报. 1996(05)
本文编号：3246331
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