三角褐指藻遗传转化及高产油转化株的研究

发布时间：2021-07-09 02:05

　　三角褐指藻是一种具有重要经济价值和生态学意义的多形态单细胞硅藻。该藻生长在海洋或盐湖中,可以合成和累积岩藻黄质,金藻昆布糖,多不饱和脂肪酸等高价值化合物。此外,由于三角褐指藻生长速度快、不占用淡水资源、能够积累自身干重20%-30%的油脂,该藻已经成为潜在的生物柴油资源藻种。近年来,由于核基因组、叶绿体基因组、线粒体基因组、蛋白质组研究成果的积累和完善,三角褐指藻已经成为研究硅藻遗传学、生理学以及生化过程的―模型生物‖。在本文中,作者研究了三角褐指藻的无菌化培养;对基因枪转化以及转化子筛选方法进行了优化;敲低了内源Pt PEPC1和Pt PEPC2基因转录;将At LEC1和At LEC1-LIKE（At L1L）转录因子密码子优化后进行异源表达,最终获得了油脂含量显著提高的转化藻株。经系统的研究,形成了三角褐指藻遗传转化的高效实验研究体系。具体研究结果如下:1、建立了三角褐指藻的无菌纯化方法采用不同浓度的四种抗生素处理含有伴生菌的三角褐指藻藻液。Ampicillin（Amp）组对三角褐指藻细胞的生长以及相关生理生化指标没有显著性影响。在除菌方面,Amp的效价较低,在浓度400mg/L... 

【文章来源】：辽宁师范大学辽宁省

【文章页数】：145 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

微藻三酰甘油生物合成示意图

四种抗生素对藻细胞Fv/Fm值的影响

辽宁师范大学博士学位论文-16-图2.2四种抗生素对藻细胞Y(Ⅱ)值的影响Fig.2.2VariationineffectivephotochemicalefficiencyofP.tricornutumunderdifferentantibiotictreatments.PSII光合放氧复合体的效率可以用Fo/Fv来表示，如图2.3所示，在7d的培养时间里，对照组Fo/Fv呈现上升趋势。50~200mg/LAmp组与Kan组与对照组相比没有显著性差异，而400mg/LAmp组与Kan组加药处理藻细胞3天后，Fo/Fv值低于对照组。100mg/L~400mg/LCmp处理藻细胞1d后，Fo/Fv达到最大值（其中400mg/LCmp组Fv/Fm升高到26.5），随后立即下降。50mg/LCmp组Fo/Fv值相对变化平缓，但始终高于对照组。与100mg/L~400mg/LCmp组相似，50mg/L~400mg/LTet组处理藻细胞1d后，Fo/Fv同样达到最大值后下降。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3272790