木姜子FATB基因的克隆和功能分析

发布时间：2022-01-16 04:05

　　中短链脂肪酸（Medium-chain fatty acids,MCFAs）包括辛酸（8:0）、癸酸（10:0）、月桂酸（12:0）、肉豆蔻酸（14:0）,是工业生产洗涤剂、肥皂、化妆品、表面活性剂和润滑剂重要原料。目前中短链脂肪酸的生产不能满足我们日益增长的需求。通过基因工程手段把其他植物尤其是萼距花属植物中调控中短链脂肪酸的关键酶转化到作物中在国外已经取得了一定的成果,然而在我国这些研究还处于起步阶段。我国许多樟科植物种子中都含有中短链脂肪酸,具有丰富的遗传资源。在我国樟科植物木姜子种仁中,富含约50%的月桂酸和20%的癸酸,是发掘提高中短链脂肪酸关键酶很好的材料。在脂肪酸从头合成过程中,FATB酰基-ACP硫酯酶FATB是控制脂肪酸碳链长短的关键酶。通过同源克隆的方法,我们从木姜子种仁中克隆得到了FATB。通过构建木姜子的FATB基因表达载体,转化拟南芥植株中,在拟南芥转化株系中对上述克隆的基因进行功能分析。为进一步探讨木姜子种子中月桂酸积累的机理,我们对发育中后期种胚的转录组进行了分析。本研究获得如下主要结果:1)从木姜子中克隆得到了一个FATB基因,基因的全长为1257bp。... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1.文献综述
    1.1 中短链脂肪酸用途
    1.2 植物特殊脂肪酸与木姜子
    1.3 植物脂肪酸合成与和装配
        1.3.1 植物脂肪酸合成
        1.3.2 植物脂肪酸的装配
    1.4 酰基-ACP硫酯酶基因的研究进展
        1.4.1 酰基-ACP硫酯酶基因的分类和功能研究
        1.4.2 酰基-ACP硫酯酶蛋白结构的研究
        1.4.3 FATB研究进展
    1.5 植物脂肪酸基因工程的研究进展
    1.6 本研究的目的以及意义
2.材料与方法
    2.1 实验所需材料
    2.2 拟南芥种子脂肪酸组分分析
    2.3 木姜子种子脂肪酸成分分析
    2.4 总RNA提取与c DNA单链合成
    2.5 异源表达FATB植物表达载体的构建及拟南芥转基因植株的获得
        2.5.1 同源克隆引物设计与基因的克隆
        2.5.2 表达载体的改造
        2.5.3 构建LpFATB表达载体
    2.6 拟南芥转基因植株的获得
    2.7 RNA-Seq转录组数据分析
3.结果与分析
    3.1 木姜子种仁不同发育阶段的脂肪酸分析
    3.2 木姜子LpFATB基因的全长克隆及相应的生物信息学分析
        3.2.1 木姜子LpFATB基因的全长克隆
        3.2.2 木姜子LpFATB的初步生物信息学分析
    3.3 木姜子LpFATB基因转化拟南芥T3代株系脂肪酸组分的分析
    3.4 木姜子种仁转录组分析
    3.5 改造FATB N端没能在拟南芥中得到月桂酸
4.讨论
    4.1 木姜子LpFATB基因的功能分析
    4.2 木姜子FATB不能产生中短链脂肪酸的原因分析
    4.3 木姜子LpFATB基因的氨基酸位点与功能分析
5.结论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]种子特异表达二酰甘油酰基转移酶基因（VgDGAT1）提高亚麻荠种子油脂积累[J]. 苑丽霞,毛雪,高昌勇,张莉,薛金爱,杨致荣,李润植.  植物生理学报. 2015(05)
[2]中国种子植物物种多样性及其分布格局[J]. 应俊生.  生物多样性. 2001(04)
[3]木姜子属三种植物油的脂肪酸成分[J]. 王静平,孟绍江,李京民.  Journal of Integrative Plant Biology. 1983(03)
[4]八种富含月桂酸、癸酸的樟科种子油[J]. 王静平,孟绍江,李京民.  油脂科技. 1982(03)
[5]西藏六种植物种子油的成份分析[J]. 张庆华,盂绍江,王静萍,何关福.  Journal of Integrative Plant Biology. 1979(01)



本文编号：3591899