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骨形态发生蛋白2及碱性成纤维生长因子2对大鼠骨髓间充质干细胞膜片增殖和成骨分化的影响

发布时间:2022-01-22 00:09
  背景:现阶段骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2对骨髓间充质干细胞膜片增殖、成骨分化的影响和作用机制还尚未可知,如何将生长因子与组织工程细胞膜片技术相整合,最终将其用于骨缺损修复具有重要意义。目的:探讨单独及联合应用骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2对骨髓间充质干细胞膜片增殖和成骨分化的影响。方法:体外分离培养鉴定SD大鼠骨髓间充质干细胞并构建细胞膜片,选用不同质量浓度的骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2单独及联合诱导骨髓间充质干细胞膜片,CCK-8法结合碱性磷酸酶活性检测确定2种因子促进膜片增殖和成骨分化的最佳有效质量浓度;然后对骨髓间充质干细胞膜片进行成骨诱导,通过大体及显微镜观察、Vonkossa染色、茜素红染色、RT-PCR检测相关成骨标志物来评估诱导效果。结果与结论:单独应用骨形态发生蛋白2可增强骨髓间充质干细胞膜片的碱性磷酸酶活性,最佳质量浓度为100μg/L(P <0.001),单独应用碱性成纤维生长因子2能加速骨髓间充质干细胞膜片的增殖,最佳质量浓度为20μg/L(P <0.001),而联合应用既可以促进膜片增殖又能提高其碱性磷酸酶活性(P <... 

【文章来源】:中国组织工程研究. 2020,24(01)北大核心

【文章页数】:7 页

【部分图文】:

骨形态发生蛋白2及碱性成纤维生长因子2对大鼠骨髓间充质干细胞膜片增殖和成骨分化的影响


骨髓间充质干细胞流式鉴定图

碱性成纤维细胞生长因子,骨髓间充质干细胞,膜片,形态变化


0.01,fP<0.001;B为BMP-2及FGF-2单独与联合作用后的细胞碱性磷酸酶活性,与对照组相比,aP<0.01,bP<0.001;与BMP-2组相比,cP<0.01,dP<0.001;与FGF-2组相比,eP<0.01,fP<0.001;BMP-2:骨形态发生蛋白2,FGF-2:碱性成纤维细胞生长因子2图3BMP-2及FGF-2对骨髓间充质干细胞膜片碱性磷酸酶活性的影响Figure3Effectsofbonemorphogeneticprotein2andbasicfibroblastgrowthfactor2onalkalinephosphataseactivityofbonemarrowmesenchymalstemcellsheetABCD图4骨髓间充质干细胞膜片经骨形态发生蛋白2及碱性成纤维细胞生长因子2成骨诱导后的形态变化(×50)Figure4Morphologicalchangesofbonemesenchymalstemcellsheetinducedbybonemorphogeneticprotein2andbasicfibroblastgrowthfactor2(×50)图注:图中A为联合组;B为骨形态发生蛋白2组;C为碱性成纤维细胞生长因子2组;D为对照组3d7d3d7d2.01.51.00.502.01.51.00.5050μg/LBMP-2组100μg/LBMP-2组200μg/LBMP-2组5μg/LFGF-2组10μg/LFGF-2组20μg/LFGF-2组空白组100μg/LBMP-2组20μg/LFGF-2组联合组对照组acacbdbdacacacacbdebde吸光度值吸光度值AB7d14d21d对照组20μg/LFGF-2组100μg/LBMP-2组联合组3.53.02.52.01.51.00.50吸光度值aabcbcbcaaaa图注:与对照组相比,aP<0.01,bP<0.001;与FGF-2组和BMP-2组相比,cP<0.001;BMP-2:骨形态发生蛋白2,FGF-2:碱性成纤维细胞生

骨髓间充质干细胞,后成,基因,碱性成纤维细胞生长因子


entificationofosteogenicdifferentiationofbonemarrowmesenchymalstemcellsheetinducedbybonemorphogeneticprotein2andbasicfibroblastgrowthfactor2(×50)对照组FGF-2组BMP-2组联合组对照组FGF-2组BMP-2组联合组对照组FGF-2组BMP-2组联合组1.51.00.5054321020151050COL-1mRAN表达Runx2mRAN表达BMP-2mRAN表达P<0.001P<0.001P<0.001图注:BMP-2:骨形态发生蛋白2,FGF-2:碱性成纤维细胞生长因子2图7RT-PCR检测骨髓间充质干细胞成骨诱导7d后成骨基因COL-1、Runx2/cbfa1、BMP-2的表达Figure7RT-PCRdetectionofexpressionofCOL-1,Runx2/cbfa1andBMP-2inbonemarrowmesenchymalstemcellsafter7daysofosteogenicinduction

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]生长因子FGF-2和VEGF对人牙周膜干细胞增殖、迁移、黏附及成骨分化能力的影响[D]. 张戎.第四军医大学 2013



本文编号:3601206

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