与家蚕自噬相关的长链非编码RNA的筛选和功能初探
发布时间：2022-02-09 06:31
随着对长链非编码RNA（long non-coding RNA,LncRNA）研究的深入,家蚕长链非编码RNA的功能研究将为家蚕的遗传、进化和基因组研究奠定基础。长链非编码RNA的神经丰度和特异性对神经发育、认知活动和神经退行性过程有重要影响。由于细胞自噬（Autophagy）的分子机制在不同物种中具有一定保守性,自噬通路参与到多种疾病的发生与发展,且长链非编码RNA存在着时空特异性的表达模式。通过研究长链非编码RNA对家蚕自噬信号通路的调控机制,将为长链非编码RNA作为药物靶标在疾病的诊断和治疗中的功能研究具有重要价值和借鉴意义。本研究以家蚕为研究对象,通过对家蚕个体注射20-羟基蜕皮酮（20-hydroxyecdysone,20E）,又称为蜕皮激素,检测家蚕组织细胞的自噬变化,然后通过高通量测序技术以及实时荧光定量PCR（Real-time Quantitative PCR Detecting System,QPCR）技术,筛选出对家蚕自噬相关的LncRNAs,并对其进行序列鉴定,为进一步研究LncRNAs调控家蚕自噬信号通路的分子机制奠定基础,同时也为LncRNAs在疾病和肿瘤的...
【文章来源】：南阳师范学院河南省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
家蚕各个时期发育状态简易图
图 3-1 脂肪体处理不同时间溶酶体染色（40x）Figure 3-1 The lysosomal staining of fat body at different time (40x)CK 为溶剂对照处理的对照组，20E 为蜕皮激素处理的实验组。e: CK is the control group treated with solvent, and 20E is the experimental group treated hormone.据图片可以看出，在蜕皮激素处理 2 h、6 h、12 h 后，对照组之间红色荧不大；与对照组相比实验组中的红色荧光亮点明显增多，即溶酶体的数量增理时间的增加，自噬发生越明显。该结果与 Tian 等[58]的研究结果基本一明蜕皮激素成功诱导了家蚕脂肪体组织的自噬发生，且自噬发生比较明显处理前后 2 h 和 6 h 各三个重复样品送公司进行长链非编码 RNA 高通量测相关长链非编码 RNA 的筛选和验证序结果显示，蜕皮激素处理 2 h 前后具有显著差异表达的长链非编码 RN处理 6 h 前后差异表达的长链非编码 RNA 有 64 个，2 h 和 6 h 都存在显
与家蚕自噬相关的长链非编码 RNA 的筛选和功能初探-Lnc560 载体进行测序试验c560 扩增产物序列是否正确，我们将 Lnc560 基证。nc560 目的基因片段cDNA 为模板对 Lnc560 基因进行目的片段的 PC PCR 扩增，95℃，5 min；95℃ 30 s，55℃ 300 min。取 5 μL 扩增产物用 1%的琼脂糖凝胶电泳目的产物的单一，亮度高，分子量大小与 100 bp为 Lnc560 的扩增产物。
【参考文献】：
期刊论文
[1]lncRNA在细胞自噬调控中作用的研究进展[J]. 陈俊宇,龚向前,张爱青. 山东医药. 2018(36)
[2]肝细胞癌相关长链非编码RNA差异表达的研究[J]. 厉新妍,方亮,黄淑琳. 解剖学研究. 2016(04)
[3]肿瘤相关基因LncRNA H19的研究进展[J]. 周含,孙亚男. 现代肿瘤医学. 2016(11)
[4]家蚕变态发育过程中蜕皮激素诱导的细胞自噬先于凋亡启动的分子机制[J]. 蚕业科学. 2016(02)
[5]家蚕的变态发育过程及其激素调控[J]. 李琼艳. 现代农业科技. 2015(18)
[6]长链非编码RNA的生物学功能和研究方法[J]. 李冉,王恬,朱鸿亮. 中国生物工程杂志. 2015(09)
[7]长链非编码RNA调控细胞凋亡及自噬的研究进展[J]. 徐静,徐秋林,郭晓华. 中国病理生理杂志. 2015(08)
[8]药物性肝损伤与免疫性肝损伤肝组织中lncRNA表达谱的差异分析[J]. 周军,朱灵,曹海军,李善高,吕宾. 中国病理生理杂志. 2015(02)
[9]长链非编码RNA研究进展[J]. 宿娅,张晨芳,魏强,李广林. 西北植物学报. 2014(11)
博士论文
[1]ATF6在内质网应激引起的HepG2细胞自噬与凋亡中作用机制的研究[D]. 王丛丛.中国农业大学 2014
[2]凋亡抑制蛋白XIAP抑制自噬促进肿瘤形成的作用机制研究[D]. 黄星.中国科学技术大学 2013
硕士论文
[1]家蚕Bme细胞自噬与凋亡关系初步研究[D]. 马源.华中师范大学 2010
本文编号：3616525
【文章来源】：南阳师范学院河南省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
家蚕各个时期发育状态简易图
图 3-1 脂肪体处理不同时间溶酶体染色（40x）Figure 3-1 The lysosomal staining of fat body at different time (40x)CK 为溶剂对照处理的对照组，20E 为蜕皮激素处理的实验组。e: CK is the control group treated with solvent, and 20E is the experimental group treated hormone.据图片可以看出，在蜕皮激素处理 2 h、6 h、12 h 后，对照组之间红色荧不大；与对照组相比实验组中的红色荧光亮点明显增多，即溶酶体的数量增理时间的增加，自噬发生越明显。该结果与 Tian 等[58]的研究结果基本一明蜕皮激素成功诱导了家蚕脂肪体组织的自噬发生，且自噬发生比较明显处理前后 2 h 和 6 h 各三个重复样品送公司进行长链非编码 RNA 高通量测相关长链非编码 RNA 的筛选和验证序结果显示，蜕皮激素处理 2 h 前后具有显著差异表达的长链非编码 RN处理 6 h 前后差异表达的长链非编码 RNA 有 64 个，2 h 和 6 h 都存在显
与家蚕自噬相关的长链非编码 RNA 的筛选和功能初探-Lnc560 载体进行测序试验c560 扩增产物序列是否正确，我们将 Lnc560 基证。nc560 目的基因片段cDNA 为模板对 Lnc560 基因进行目的片段的 PC PCR 扩增，95℃，5 min；95℃ 30 s，55℃ 300 min。取 5 μL 扩增产物用 1%的琼脂糖凝胶电泳目的产物的单一，亮度高，分子量大小与 100 bp为 Lnc560 的扩增产物。
【参考文献】：
期刊论文
[1]lncRNA在细胞自噬调控中作用的研究进展[J]. 陈俊宇,龚向前,张爱青. 山东医药. 2018(36)
[2]肝细胞癌相关长链非编码RNA差异表达的研究[J]. 厉新妍,方亮,黄淑琳. 解剖学研究. 2016(04)
[3]肿瘤相关基因LncRNA H19的研究进展[J]. 周含,孙亚男. 现代肿瘤医学. 2016(11)
[4]家蚕变态发育过程中蜕皮激素诱导的细胞自噬先于凋亡启动的分子机制[J]. 蚕业科学. 2016(02)
[5]家蚕的变态发育过程及其激素调控[J]. 李琼艳. 现代农业科技. 2015(18)
[6]长链非编码RNA的生物学功能和研究方法[J]. 李冉,王恬,朱鸿亮. 中国生物工程杂志. 2015(09)
[7]长链非编码RNA调控细胞凋亡及自噬的研究进展[J]. 徐静,徐秋林,郭晓华. 中国病理生理杂志. 2015(08)
[8]药物性肝损伤与免疫性肝损伤肝组织中lncRNA表达谱的差异分析[J]. 周军,朱灵,曹海军,李善高,吕宾. 中国病理生理杂志. 2015(02)
[9]长链非编码RNA研究进展[J]. 宿娅,张晨芳,魏强,李广林. 西北植物学报. 2014(11)
博士论文
[1]ATF6在内质网应激引起的HepG2细胞自噬与凋亡中作用机制的研究[D]. 王丛丛.中国农业大学 2014
[2]凋亡抑制蛋白XIAP抑制自噬促进肿瘤形成的作用机制研究[D]. 黄星.中国科学技术大学 2013
硕士论文
[1]家蚕Bme细胞自噬与凋亡关系初步研究[D]. 马源.华中师范大学 2010
本文编号：3616525
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3616525.html
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