植物乳杆菌CCFM8610缓解镉暴露诱导肠道损伤的效果评价及机制探究

发布时间：2022-02-24 07:47

　　镉（Cadmium,Cd）是一种在环境中广泛存在的重金属,近年来工业化进展的不断加速及污水农田灌溉技术的广泛使用,镉污染事件频频发生,严重危害了公共健康。过往研究表明,植物乳杆菌CCFM8610是一株对重金属镉具有良好的吸附能力的乳酸菌,可有效缓解机体内炎症,预防日常镉暴露。但现阶段,关于植物乳杆菌CCFM8610缓解镉暴露的研究主要集中在肝、肾方面。而肠道作为镉吸收的直接器官,植物乳杆菌CCFM8610对肠道镉暴露损伤的恢复效果及机制却并未有靶向研究。因此,本课题通过体内外实验,对植物乳杆菌CCFM8610恢复镉暴露诱导肠道损伤的效果及其机制进行了探究。首先通过构建慢性镉暴露动物模型,探究植物乳杆菌CCFM8610对慢性镉暴露小鼠肠道损伤的恢复能力。结果表明植物乳杆菌CCFM8610能有效降低小鼠脏器内约20%的镉蓄积,同时加快慢性镉暴露小鼠排便速度,缩短镉暴露小鼠排便时间近2小时,增强小鼠结肠肌条张力。检测小鼠肠道中神经递质,并对小鼠结肠c-kit蛋白进行免疫标记后发现,植物乳杆菌CCFM8610显著调节了镉暴露紊乱的肠道神经递质一氧化氮、5羟色胺、P物质、乙酰胆碱酯酶、血管活性肠... 

【文章来源】：江南大学江苏省211工程院校教育部直属院校

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文缩略词表
1 绪论
    1.1 重金属镉污染现状及危害
        1.1.1 重金属镉及其污染现状
        1.1.2 镉的致毒性效应及致毒机理
    1.2 镉对肠道造成的损伤
        1.2.1 镉暴露损伤肠道屏障
        1.2.2 镉暴露损伤肠道免疫
        1.2.3 镉暴露破坏肠稳态系统
    1.3 益生菌缓解有害化学物质诱导肠道损伤的潜力
        1.3.1 益生菌与重金属吸附结合
        1.3.2 维护肠道屏障的能力
        1.3.3 调节免疫的能力
        1.3.4 调节肠道微生态功能
    1.4 肠道动力
    1.5 植物乳杆菌CCFM8610对镉毒性的缓解作用
    1.6 立题意义
    1.7 主要研究内容
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 实验动物
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 菌株的活化与培养
        2.2.2 灌胃菌株菌粉制作
        2.2.3 小鼠排出首粒黑便时间
        2.2.4 小鼠粪便含水量的测定
        2.2.5 小鼠肝脏、肾脏和血液中镉含量
        2.2.6 小鼠结肠张力检测
        2.2.7 小鼠结肠、空肠和血清中细胞因子测定
        2.2.8 小鼠血液生理生化指标检测
        2.2.9 小鼠结肠c-Kit蛋白检测
        2.2.10 小鼠粪便菌群组成的测定
        2.2.11 人结肠癌HT-29 细胞的培养
        2.2.12 细胞实验设计
        2.2.13 镉暴露细胞总蛋白提取
        2.2.14 镉暴露细胞蛋白iTRAQ标记
        2.2.15 液相色谱质谱分析细胞镉暴露蛋白
        2.2.16 细胞镉暴露差异蛋白筛选
        2.2.17 转录水平RT-qPCR验证
        2.2.18 数据处理及分析方法
3 结果与讨论
    3.1 植物乳杆菌CCFM8610缓解镉暴露诱导肠道损伤的效果评价
        3.1.1 植物乳杆菌CCFM8610对小鼠血液、肾脏、肝脏中的镉含量的影响
        3.1.2 植物乳杆菌CCFM8610对小鼠慢性镉暴露期间粪便含水量的影响
        3.1.3 植物乳杆菌CCFM8610对小鼠慢性镉暴露后排出首粒黑便时间的影响
        3.1.4 植物乳杆菌CCFM8610对慢性镉暴露小鼠肠道动力的影响
    3.2 植物乳杆菌CCFM8610缓解镉暴露造成的小鼠肠道损伤途径分析
        3.2.1 植物乳杆菌CCFM8610缓解镉暴露损伤的肠道屏障
        3.2.2 植物乳杆菌CCFM8610缓解镉暴露造成的肠道炎症
        3.2.3 植物乳杆菌CCFM8610能缓解镉暴露损伤的肠道菌群
    3.3 探寻植物乳杆菌CCFM8610缓解镉暴露损伤的肠道的蛋白组学分析
        3.3.1 HT-29细胞自然状态与镉暴露状态下差异蛋白筛选
        3.3.2 差异蛋白GO通路分析
        3.3.3 差异蛋白KEGG通路分析
        3.3.4 差异蛋白互作(PPI)分析
        3.3.5 基于细胞蛋白组学探寻植物乳杆菌CCFM8610缓解镉暴露肠道损伤的机制
主要结论与展望
致谢
参考文献
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的文章


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3642286