人源化肝细胞共培养系统为基础的代谢活化系统研究

发布时间：2022-08-13 17:40

　　目的:通过构建不同组合的人源化肝细胞二维共培养体系,从细胞活性及主要细胞色素酶基因表达层面比较不同共培养体系作为代谢活化系统的优越性,并通过体外微核试验对优势共培养体系的代谢活化能力进行初步的验证,为人源化细胞共培养代谢活化系统在遗传毒性试验和致突变性试验中的应用提供理论基础和技术支持。方法:1.共培养模型的构建及细胞生长状态的观察与测定:应用穿孔法制作共培养6孔板。选择人肝癌HepG2/C3A细胞、人结直肠腺癌Caco-2细胞、人肾小管上皮HK-2细胞、人脐静脉内皮HUVEC细胞、人肝星形LX-2细胞作为共培养模型构建的待选细胞系。分别设置各细胞的单独培养组,四种双细胞共培养组 HepG2/C3A-Caco2（CL）、HepG2/C3A-HK2（CH）、HepG2/C3A-HUVEC（CU）和 HepG2/C3A-LX2（CL）,以及六种三细胞共培养组HepG2/C3A-Caco2-HK2(（COH）、HepG2/C3A-Caco2-HUVEC（COU）、HepG2/C3A-Caco2-LX2（COL）、HepG2/C3A-HK2-HUVEC（CHU）、HepG2/C3A-HK2-L... 

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
英文缩写词表
第一章 共培养模型的构建及模型中细胞活性的测定
    引言
    1 材料和方法
        1.1 主要仪器和试剂
        1.2 共培养细胞基本情况与共培养分组
        1.3 细胞生长情况的测量
        1.4 统计学方法
    2 结果
        2.1 共培养细胞生长状况
        2.2 CCK-8法比较单独培养与共培养细胞的生长情况
    3 讨论
    4 小结
第二章 模型中肝细胞主要代谢相关酶基因表达情况
    引言
    1 材料和方法
        1.1 主要仪器与试剂
        1.2 细胞基本情况和共培养及单独培养组别设置
        1.3 研究方法
        1.4 统计学方法
    2 结果
        2.1 主要Ⅰ相代谢酶基因的表达情况
        2.2 主要Ⅱ相代谢酶基因的表达情况
    3 讨论
    4 小结
第三章 共培养模型代谢活化能力的初步验证
    引言
    1 材料和方法
        1.1 主要仪器与试剂
        1.2 细胞基本情况
        1.3 研究方法
        1.4 统计学方法
    2 微核试验结果
    3 讨论
    4 小结
总结
参考文献
综述 HepaRG肝细胞的基本特征和应用前景
    参考文献
致谢
作者简历及在学期间发表论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]体外肝脏3D模型在药物肝毒性评价中的优势[J]. 卢贤欢,赵华琛,王雪,黄芝瑛,淡墨.  药学学报. 2017(12)
[2]基于类器官3D培养和高内涵成像的药物肝毒性评价模型研究[J]. 李朋彦,李春雨,陆小华,石伟,高源,崔鹤蓉,李婷婷,柏兆方,肖小河,王韫芳,王伽伯.  药学学报. 2017(07)
[3]不同基底硬度在调控HepaRG细胞分化为肝细胞样细胞中的作用[J]. 李甲志,王冰洁,劳建乐,徐静.  实用医学杂志. 2017(11)
[4]体外与体内肝细胞微核检测方法研究[J]. 文海若,宋捷,陈高峰,齐乃松,李琛,耿兴超,王雪.  中国新药杂志. 2016(07)
[5]多细胞系胞质分裂阻滞微核细胞组学试验法的建立与应用[J]. 文海若,淡墨,齐乃松,耿兴超,王雪.  癌变·畸变·突变. 2015(04)

博士论文
[1]多器官人源细胞系共培养模型的建立与初步应用[D]. 王磊.第二军医大学 2014



本文编号：3677467