SENP1启动子G-四链体鉴定及其作用研究

发布时间：2023-03-24 05:40

　　目的:研究G-四链体(G4)对SUMO特异性蛋白酶1(SUMO-specific proteases 1,SENP1)基因的转录调控作用。方法:克隆不同的SENP1启动子片段构建SENP1启动子报告质粒,通过报告基因检测鉴定SENP1启动子核心转录调控区;分析SENP1启动子核心转录调控区序列,并进行G4形成序列预测;合成G4形成序列寡核苷酸,利用圆二色谱分析检测G4形成序列寡核苷酸的拓扑结构;通过G4配体TMPyP4处理和过表达G4解旋酶G4R1结合报告基因检测和Western blot鉴定启动子G4对SENP1转录表达的调控作用。结果:发现-910～+226区域是SENP1启动子的核心转录调控区,序列富含G/C;生信分析发现SENP1启动子核心区存在G4形成序列;圆二色谱分析证实SENP1启动子G4形成序列能够形成G4结构;报告基因检测和Western blot检测发现启动子G4对SENP1转录表达具有抑制作用。结论:SENP1启动子核心转录调控区存在G4结构并对其转录表达具有抑制作用,为揭示SENP1在生理和病理过程中的作用机制提供新的研究思路和试验线索。

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞
    1.2 试剂
    1.3 方法
        1.3.1 质粒构建
        1.3.2 细胞转染
        1.3.3 萤光素酶报告基因检测
        1.3.4 圆二色谱分析
        1.3.5 Western blot检测
        1.3.6 统计学分析
2 结果
    2.1 SENP1核心启动子鉴定
    2.2 SENP1启动子核心序列分析及G4形成序列预测
    2.3 SENP1启动子区G4形成序列的圆二色谱分析
    2.4 G4配体TMPyP4对SENP1表达的影响
    2.5 G4解旋酶G4R1对SENP1表达的影响
3 讨论



本文编号：3769553