湛江红树林底泥中PCBs降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

发布时间：2023-04-05 15:14

　　多氯联苯(Polychlorinated biphenyls,PCBs)是一种环境中长期存在的持久性有机污染物,易在生物体内蓄积引起多种生物毒性,严重威胁生态与生物安全。红树林是海岸潮间带一种独特的生态系统,微生物资源丰富,本试验基于红树林相关降解菌的研究,旨在寻找高效的PCBs降解菌,通过生物修复治理PCBs环境污染。本研究主要进行了以下试验:(1)本试验以广东省湛江市高桥镇红树林国家级自然保护区为研究对象,采集高、中、低潮带3种生境底泥进行微生物宏基因组测序;(2)在原生数据分析的基础上,利用MM30无机盐培养基对红树林底泥微生物进行富集、驯化,再对富集培养物进行分离、鉴定;(3)通过气相色谱-质谱联用仪(Gas Chromatography-Mass Spectrometer,GC-MS)检测PCBs降解体系中PCBs的浓度,探究目标菌株对PCBs的降解效果。研究结果表明:(1)3组湛江红树林底泥生境样本的序列数、多样性指数和覆盖率均处于较高水平,OTU数目统计发现,在3组样本底泥样品中共获得了10054个OTU(S1:6761个、S2:7866个、S3:8073个),分属60个...

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 文献综述
    1.1 联苯与多氯联苯概况
        1.1.1 多氯联苯概述
        1.1.2 PCBs的危害
        1.1.3 PCBs治理方法
        1.1.4 PCBs检测方法
    1.2 红树林系统概述
        1.2.1 红树林研究进展
        1.2.2 湛江红树林概况
        1.2.3 湛江红树林生态系统
    1.3 研究目的与意义
2 湛江红树林底泥微生物组学研究
    2.1 材料与方法
        2.1.1 仪器
        2.1.2 试剂
        2.1.3 红树林底泥理化因子测定
        2.1.4 红树林底泥细菌基因组DNA提取
        2.1.5 PCR扩增
        2.1.6 Miseq文库构建
        2.1.7 测序及数据分析
    2.2 结果与分析
        2.2.1 底泥样品理化指标
        2.2.2 生物信息学分析
    2.3 讨论
        2.3.1 红树林底泥理化指标随潮带环境变化
        2.3.2 红树林底泥微生物结构与酸碱度有关
    2.4 小结
3 多氯联苯降解菌的分离鉴定
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试验所用培养基
        3.1.2 仪器
        3.1.3 试剂
        3.1.4 PCBs降解菌的富集与筛选
        3.1.5 菌种保存
        3.1.6 菌种鉴定
        3.1.7 PCR扩增
    3.2 结果与分析
        3.2.1 PCBs降解菌的传代与分离
        3.2.2 PCBs降解菌的鉴定
        3.2.3 PCR结果
    3.3 讨论
        3.3.1 PCBs降解菌的分离鉴定
        3.3.2 降解菌与特异性引物的关系
    3.4 小结
4 多氯联苯微生物降解体系的验证
    4.1 材料与方法
        4.1.1 试剂
        4.1.2 休眠细胞的制备
        4.1.3 4-氯联苯的出峰时间的确定
        4.1.4 4-氯联苯降解验证体系
        4.1.5 PCBs定量检测
        4.1.6 GC-MS条件
    4.2 结果与分析
        4.2.1 PCBs3标准图
        4.2.2 不同浓度菌株的降解效果
        4.2.3 不同时期PCBs残留率
    4.3 讨论
    4.4 小结
5 结论
附录
参考文献
致谢
作者简介
导师简介



本文编号：3783639